本發明涉及鐵皮石斛種植技術領域,尤其是一種鐵皮石斛的組培快繁方法。
背景技術:
鐵皮石斛為蘭科石斛屬植物,是傳統名貴中藥材。《神農本草經》中將石斛列為上品,具有益胃生津,滋陰清熱,止咳潤肺的功效?,F代藥理研究表明,石斛還具有抗腫瘤、抗衰老、增強人體免疫力和擴張血管的作用。近年來,隨著人們對鐵皮石斛的了解越來越多,對鐵皮石斛的需求日趨增加,而石斛自然繁殖力極低,種子需與真菌共生才能萌發,加上長期采挖,稀缺的野生資源日益枯竭,成為瀕危植物,被列為國家重點保護的野生藥材品種。
技術實現要素:
本發明的目的是為了解決上述技術的不足而提供一種實現對鐵皮石斛進行人工栽培的鐵皮石斛的組培快繁方法。
為了達到上述目的,本發明所設計的一種鐵皮石斛的組培快繁方法,(1)培養基的制備,量取800ml純凈水于潔凈的大燒杯中,稱取100g香蕉果肉,用榨汁機榨碎,并倒入大燒杯中加熱至沸騰、攪拌混合均勻;按照大量、微量、鐵鹽、有機物的順序分別量取MS各種母液導入大燒杯中,充分攪拌;再稱取30g蔗糖,8g瓊脂放入大燒杯,加熱至瓊脂完全溶解;加熱結束后調節PH值至5.6-5.8,然后進行分裝;分裝后的培養基放入滅菌鍋,在氣壓為0.1MP,溫度121℃下滅菌30min,滅菌后將培養基取出冷卻凝固備用;(2)外植株的選取和預處理,選取健康的鐵皮石斛植株,以莖段為中心切下,芽的上下各留0.5cm的莖段,用洗衣粉溶液浸泡20min,取出后用自來水沖洗30min,備用;或者選取成熟飽滿的果莢,用75%濃度的酒精擦拭后備用;(3)外植株的滅菌,將預處理后的莖段用75%的酒精溶液滅菌0.5min后用無菌水沖洗1次,將莖段腋芽的苞葉拔去,然后用0.1%濃度的升汞溶液滅菌10min,滅菌過程中不斷搖動燒杯,最后用無菌水沖洗5次,備用;或者將預處理后的果莢用0.1%濃度的升汞溶液滅菌8min,最后用無菌水沖洗5次,備用;(4)接種,將滅菌后的莖段在超凈工作臺里接種到培養基中;或者將滅菌后的果莢在超凈工作臺上用刀將其割開,將果莢里的種子播種要培養基中;(5)培養環境的控制,將接種完成的莖段或種子放到無菌培養室內,前10天進行暗培養,10天后每天增加2小時的光照,光照強度控制在2000-3000lux,溫度控制在23-27℃,濕度為50%。
本發明所得到的一種鐵皮石斛的組培快繁方法,實現了鐵皮石斛人工栽培,快速繁殖,極大的提高了鐵皮石斛的產量。
具體實施方式
下面通過實施例對本發明作進一步的描述。
實施例1:
本實施例描述的一種鐵皮石斛的組培快繁方法,(1)培養基的制備,量取800ml純凈水于潔凈的大燒杯中,稱取100g香蕉果肉,用榨汁機榨碎,并倒入大燒杯中加熱至沸騰、攪拌混合均勻;按照大量、微量、鐵鹽、有機物的順序分別量取MS各種母液導入大燒杯中,充分攪拌,該步驟為現有技術;再稱取30g蔗糖,8g瓊脂放入大燒杯,加熱至瓊脂完全溶解;加熱結束后調節PH值至5.6-5.8,然后進行分裝;分裝后的培養基放入滅菌鍋,在氣壓為0.1MP,溫度121℃下滅菌30min,滅菌后將培養基取出冷卻凝固備用;(2)外植株的選取和預處理,選取健康的鐵皮石斛植株,以莖段為中心切下,芽的上下各留0.5cm的莖段,用洗衣粉溶液浸泡20min,取出后用自來水沖洗30min,備用;或者選取成熟飽滿的果莢,用75%濃度的酒精擦拭后備用;(3)外植株的滅菌,將預處理后的莖段用75%的酒精溶液滅菌0.5min后用無菌水沖洗1次,將莖段腋芽的苞葉拔去,然后用0.1%濃度的升汞溶液滅菌10min,滅菌過程中不斷搖動燒杯,最后用無菌水沖洗5次,備用;或者將預處理后的果莢用0.1%濃度的升汞溶液滅菌8min,最后用無菌水沖洗5次,備用;(4)接種,將滅菌后的莖段在超凈工作臺里接種到培養基中;或者將滅菌后的果莢在超凈工作臺上用刀將其割開,將果莢里的種子播種要培養基中;(5)培養環境的控制,將接種完成的莖段或種子放到無菌培養室內,前10天進行暗培養,10天后每天增加2小時的光照,光照強度控制在2000-3000lux,溫度控制在23-27℃,濕度為50%。
上述步驟(1)中的培養基則用于幼株生根的培養基。
實施例2:
本實施例描述的一種鐵皮石斛的組培快繁方法,其與實施例1的區別在于:培養基中香蕉更換為馬鈴薯,其培養基用于原球莖的增殖和原球莖的分化。
實施例3:
本實施例描述的一種鐵皮石斛的組培快繁方法,其與實施例1的區別在于:培養基中香蕉去除,其培養基用于原球莖的誘導。