一種鐵皮石斛組培苗玻瓶馴化的方法
【專利摘要】本發明屬于植物組培快繁【技術領域】，提供了一種鐵皮石斛（DendrobiumofficinaleKimuraetMigo）組培苗通過培養瓶馴化的方法。本發明所述方法包括以下步驟：選取成熟組織培養瓶苗；瓶苗遮陰預培養；瓶苗去瓊脂、消毒；瓶苗晾干脫水；瓶苗再次入瓶內半開蓋培養；最后移栽苗床基質中。本發明所述方法操作簡單，成本低廉，有效地克服了鐵皮石斛組培苗出瓶后易潰爛死亡，栽種成活率低的技術難題。使得組培苗在出瓶后較短的時間里，葉片基本形成完善的角質層，能很好地進行有效的光合作用，合成各種物質。經過本法馴化的組培苗，根系發達，葉片變厚，葉色深綠，莖變粗變硬，保持生長的連貫性。移栽后，成活率可達95%以上。
【專利說明】一種鐵皮石斛組培苗玻瓶馴化的方法
【技術領域】
[0001 ] 本發明屬于植物組培快繁【技術領域】，具體涉及一種鐵皮石斛(Dendrobiumofficinale Kimura et Migo)組培苗通過培養瓶完成馴化的方法。
【背景技術】
[0002]鐵皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)是我國常用的名貴中藥,為蘭科石斛蘭屬多年生草本植物，具有滋陰清熱、生津益胃、潤肺止咳等功效，常用于熱病傷津、口干煩燥、病后虛熱等多種病癥。用途廣泛，需求量大。由于長期無節制采挖，再加上自身資源再生能力低，鐵皮石斛自然資源已漸趨枯竭。目前該種植物已成為國家重點保護藥材品種之一。人工種植鐵皮石斛具有廣闊的前景，種植規模正在不斷擴展，組培快繁規模化生產種苗是其關鍵技術之一。國內外學者在鐵皮石斛快速繁殖、擴大繁殖系數等方面已獲得關鍵性的進展，已能規模化生產鐵皮石斛組培苗。但目前普遍存在組培苗移栽成活率低的情況，從瓶苗到大田栽培的中間環節成為制約鐵皮石斛生產發展的一大障礙。如中國專利《鐵皮石斛的種植方法》( 申請人::桂平市白石洞天仙山鐵皮石斛專業合作社；申請日:2013年11月30日；申請號:CN201310623199.9)公開了一種鐵皮石斛的種植方法，所述方法中利用泥炭土、花生殼、松土糠、松樹皮和少量蝙蝠糞便等原料打粉作基質培育鐵皮石斛，但該方法中所述蝙蝠糞便較難獲得，并且所述基質需在io(Tii(rc下處理后使用，從一定程度上加大了培育成本，較為繁瑣，并且也存在組培苗移栽成活率低的情況。
[0003]綜上所述，目前急需一種方法操作簡單，成本低廉，組培苗移栽成活率低的鐵皮石斛的培育方法。

【發明內容】

[0004]本發明的目的在于開發出一種鐵皮石斛組培苗馴化煉苗的方法，大幅度提高鐵皮石斛組培苗移栽成活率。
[0005]該方法根據鐵皮石斛組培苗在出瓶之前其莖葉未形成完善的角質層，也不能進行有效的光合作用等生理特征，使用組培瓶并配合平衡營養液控制光溫濕微環境，使組培苗處于適宜生長的環境條件下，較快地完成從異養型代謝向自養型代謝的轉變，葉片表皮細胞發育成熟，能適應自然環境條件，完成鐵皮石斛組培苗的馴化過程。
[0006]本發明的目的是通過以下技術方案實現的:
一種鐵皮石斛組培苗玻瓶馴化的方法，所述方法包括以下步驟:
O選取成熟的培養瓶苗；
2)瓶苗遮陰預培養；
3)瓶苗去瓊脂、消毒；
4)瓶苗晾干脫水；
5)瓶苗再次入瓶內半開蓋培養，；最后將其移栽苗床基質中，得到的鐵皮石斛組培苗。
[0007]所述的成熟的鐵皮石斛培養瓶苗，是指苗高5-8cm，有明顯莖節，具4-6條根。所述的瓶苗遮陰預培養，是指在可遮雨的塑料大棚，或者溫室內培養，蔭蔽度約為70%，預培養20-30 d，并在苗子出瓶處理的前3 d敞開瓶蓋預培養。所述的瓶苗去瓊脂、消毒，是指將預培養過的瓶苗取出，用飲用自來水輕柔漂洗，洗凈組培苗上粘附的培養基。洗完后晾干并用
0.1%多菌靈侵泡消毒30 S。所述的瓶苗晾干脫水，是指將將消毒好的組培苗晾干脫水1-2d，晾干至根系完全發白。所述的瓶苗再次入瓶內半開蓋培養，是指將將苗再放回組培瓶內進行半開瓶蓋培養。使用自來水、營養液定期噴霧補液，瓶內培養14-21 d。所述的移栽苗床基質中，是指將苗移栽于由椰糠、木屑刨花、樹皮等混合而成的苗床基質中，經30-40 d栽培為成苗。
[0008]本發明相比現有技術的有益效果為:
本發明所述方法操作簡單，成本低廉，有效地克服了鐵皮石斛組培苗出瓶后易潰爛死亡，栽種成活率低的技術難題。使得組培苗在出瓶后較短的時間里，葉片基本形成完善的角質層，能很好地進行有效的光合作用，合成各種物質。經過本法馴化的組培苗，根系發達，葉片變厚，葉色深綠，莖變粗變硬，保持生長的連貫性。移栽后，成活率可達95%以上。
【具體實施方式】
[0009]依據本發明提出的鐵皮石斛組培苗玻瓶馴化方法，【具體實施方式】詳細敘述如下: 實施例1
一種鐵皮石斛組培苗玻瓶馴化的方法，所述方法包括以下步驟:
1)選取成熟的培養 瓶苗；
2)瓶苗遮陰預培養；
3)瓶苗去瓊脂、消毒；
4)瓶苗晾干脫水；
5)瓶苗再次入瓶內半開蓋培養，最后將其移栽苗床基質中，得到的鐵皮石斛組培苗。
[0010]進一步的，步驟I)所述成熟的培養瓶苗，是指苗高5-8cm，有明顯莖節，具4_6條根。
[0011]進一步的，步驟2 )所述瓶苗遮陰預培養，是指在可遮雨的塑料大棚，或者溫室內培養，蔭蔽度約為70%，預培養20-30 d，并在苗子出瓶處理的前3 d敞開瓶蓋預培養。
[0012]進一步的，步驟3)所述瓶苗去瓊脂、消毒，是指將所述步驟2)預培養過的瓶苗取出，用飲用自來水輕柔漂洗，洗凈組培苗上粘附的培養基，洗完后晾干并用0.1%多菌靈侵泡消毒30 S。
[0013]進一步的，步驟4)所述瓶苗晾干脫水，是指將將消毒好的組培苗晾干脫水1-2 d。
[0014]進一步的，步驟5)所述瓶苗再次入瓶內半開蓋培養，是指將將苗再放回組培瓶內進行半開瓶蓋培養，使用自來水、營養液定期噴霧補液，瓶內培養14-21 d。
[0015]進一步的，步驟5 )所述移栽苗床基質中，是指將苗移栽于苗床基質中，經30-40 d栽培為成苗。
[0016]進一步的，所述苗床基質為椰糠、木屑刨花、樹皮或上述兩種或三種的混合物。
[0017]本實施例的單位為克，也可以為千克。
[0018]本實施例中所述的各原料均為市場上出售的常規產品，本實施例的培育方法中采用的設備也均為市場上出售的常規產品。[0019]實施例2
本實施例是在實施例1的基礎上的優選化方案，提供了一種鐵皮石斛組培苗玻瓶馴化的方法。本實施例中與實施例1相同的部分，請參照實施例1中公開的內容進行理解，實施例I公開的內容也應當作為本實施例的內容，此處不作重復描述。
[0020]所述方法包括以下步驟:
1、選取成熟的鐵皮石斛組培苗:選擇苗高5-8 Cm，有明顯莖節，具4-6條根的組培苗作為瓶苗。
[0021]2、瓶苗遮陰預培養:將步驟I)選取的瓶苗放在可遮雨的塑料大棚內培養，蔭蔽度約為70%，預培養20-30 d，并在苗子出瓶處理的前3 d敞開瓶蓋預培養。
[0022]3、瓶苗去瓊脂、消毒:將陰棚內預培養的瓶苗開蓋，取出苗，用飲用自來水輕柔漂洗，洗凈組培苗上粘附的培養基。洗完后晾干并用0.1%多菌靈侵泡消毒30 S，防止微生物感染。
[0023]4、瓶苗晾干脫水:將將消毒好的組培苗晾干脫水1-2 d，使苗表層細胞快速角質化。必須晾干至根系完 全發白。
[0024]5、瓶苗再次入瓶內半開蓋培養:將上述處理好的苗再放回組培瓶內培養。空瓶、瓶底保持少量水分，瓶蓋半開，I次/1-2 d噴霧補水，使用1/10的MS培養液營養液I次/周噴霧補液，瓶內培養14-21 d。
[0025]6、移栽苗床基質中:將苗移栽于木屑刨花、椰糠(刨花:椰糠=2.5:1 ;預先泡透)混合而成的基質中，經30-40 d栽培為成苗。
[0026]移栽后，成活率可達95.9%。
[0027]實施例3
本實施例是在實施例1的基礎上的優選化方案，提供了一種鐵皮石斛組培苗玻瓶馴化的方法。本實施例中與實施例1相同的部分，請參照實施例1中公開的內容進行理解，實施例I公開的內容也應當作為本實施例的內容，此處不作重復描述。
[0028]所述方法包括以下步驟:
1、選取成熟的鐵皮石斛組培苗:選擇苗高5-8 Cm，有明顯莖節，具4-6條根的組培苗作為瓶苗。
[0029]2、瓶苗遮陰預培養:將步驟I)選取的瓶苗放在可遮雨的塑料大棚內培養，蔭蔽度約為70%，預培養20-30 d，并在苗子出瓶處理的前3 d敞開瓶蓋預培養。
[0030]3、瓶苗去瓊脂、消毒:將陰棚內預培養的瓶苗開蓋，取出苗，用飲用自來水輕柔漂洗，洗凈組培苗上粘附的培養基。洗完后晾干并用0.1%多菌靈侵泡消毒30 S，防止微生物感染。
[0031]4、瓶苗晾干脫水:將將消毒好的組培苗晾干脫水1-2 d，使苗表層細胞快速角質化。必須晾干至根系完全發白。
[0032]5、瓶苗再次入瓶內半開蓋培養:將上述處理好的苗再放回組培瓶內培養。培養瓶瓶底墊1/4厚度基質(新鮮刨花:水苔=3:1 ;所述新鮮刨花和水苔需預先用水泡透)，基質保持濕潤，瓶蓋半開，I次/1-2 d噴霧補水，使用1/10的MS培養液營養液I次/周噴霧補液，瓶內培養14-21 d。
[0033]6、移栽苗床基質中:是指將苗移栽于樹皮(松樹皮粗:細=2:1 ;預先泡透)等混合而成的苗床基質中，經30-40 d栽培為成苗。
[0034]移栽后，成活率可達97.4%。
[0035]所述MS培養液MS培養基為植物組織和細胞培養最常見的培養基之一，由威斯康星大學的村重敏夫(英語:Toshio Murashige)和福爾克.K ?斯科格(英語:Folke K.Skoog)所研發并用于植物激素的研究。培養基以兩人的姓氏首字母命名，包括大量元素組分和微量元素組分，其配方如下:
大量元素
硝酸銨(NH4NO3) 1,650 mg/1 氯化鈣(CaCl2.2H20) 440 mg/1 硫酸鎂(MgSO4.7H20) 370 mg/1 磷酸二氫鉀(KH2PO4) 170 mg/1 硝酸鉀(KNO3) 1,900 mg/1。[0036]微量元素
硼酸(H3BO3) 6.2 mg/1 氯化鈷(CoCl2.6H20) 0.025 mg/1 硫酸銅(CuSO4.5H20) 0.025 mg/1 硫酸亞鐵(FeSO4.7H20) 27.8 mg/1 硫酸錳(MnSO4.4H20) 22.3 mg/1 碘化鉀(ΚΙ) 0.83 mg/1 鑰酸鈉(Na2MoO4.2H20) 0.25 mg/1 硫酸鋅(ZnSO4.7H20) 8.6 mg/1 Na2EDTA.2H20 37.2 mg/1。
【權利要求】
1.一種鐵皮石斛組培苗玻瓶馴化的方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟: 1)選取成熟的培養瓶苗； 2)瓶苗遮陰預培養； 3)瓶苗去瓊脂、消毒； 4)瓶苗晾干脫水； 5)瓶苗再次入瓶內半開蓋培養，最后將其移栽苗床基質中，得到的鐵皮石斛組培苗。
2.如權利要求1所述的鐵皮石斛組培苗玻瓶馴化的方法，其特征在于，步驟I)所述成熟的培養瓶苗，是指苗高5-8cm，有明顯莖節，具4-6條根。
3.如權利要求1所述的鐵皮石斛組培苗玻瓶馴化的方法，其特征在于，步驟2)所述瓶苗遮陰預培養，是指在可遮雨的塑料大棚，或者溫室內培養，蔭蔽度約為70%，預培養20-30d,并在苗子出瓶處理的前3 d敞開瓶蓋預培養。
4.如權利要求1所述的鐵皮石斛組培苗玻瓶馴化的方法，其特征在于，步驟3)所述瓶苗去瓊脂、消毒，是指將所述步驟2)預培養過的瓶苗取出，用飲用自來水輕柔漂洗，洗凈組培苗上粘附的培養基 ，洗完后晾干并用0.1%多菌靈侵泡消毒30 S。
5.如權利要求1所述的鐵皮石斛組培苗玻瓶馴化的方法，其特征在于，步驟4)所述瓶苗晾干脫水，是指將將消毒好的組培苗晾干脫水1-2 d。
6.如權利要求1所述的鐵皮石斛組培苗玻瓶馴化的方法，其特征在于，步驟5)所述瓶苗再次入瓶內半開蓋培養，是指將將苗再放回組培瓶內進行半開瓶蓋培養，使用自來水、營養液定期噴霧補液，瓶內培養14-21 d。
7.如權利要求1所述的鐵皮石斛組培苗玻瓶馴化的方法，其特征在于，步驟5)所述移栽苗床基質中，是指將苗移栽于苗床基質中，經30-40 d栽培為成苗。
8.如權利要求7所述的鐵皮石斛組培苗玻瓶馴化的方法，其特征在于，所述苗床基質為椰糠、木屑刨花、樹皮或上述兩種或三種的混合物。
【文檔編號】A01H4/00GK103918558SQ201410183404
【公開日】2014年7月16日 申請日期:2014年5月4日 優先權日:2014年5月4日
【發明者】李娟 , 林位夫, 張朝陽 申請人:中國熱帶農業科學院橡膠研究所