專利名稱：一種海洋枯草芽孢桿菌及其篩選方法
技術領域：
本發明涉及海洋微生物應用生物技術及杉木根際土壤真菌病害防治， 具體的說是一種用于防治杉木人工林根際土壤真菌病害的海洋枯草芽孢桿 菌及其篩選方法。
背景技術：
杉木(0^m'唯/wm/a /朋ceo/ato)是我國特有的速生豐產的用材樹種，分 布在我國南方的17個省、市、自治區，現有杉木人工林面積1214.07萬公 頃，約占我國人工林總面積的24%。多年來的研究表明隨著杉木連栽代 數的增加，杉木生產力就會下降，出現杉木連栽障礙。杉木純林連栽，土 壤肥力下降，杉木幼苗立枯病害增加，土壤中有毒物質積累，土壤微生物 數量逐年減少，土壤中致害真菌增加，環境退化日益嚴重，栽種第3代杉 木土壤上的20年生杉木人工林較同年栽種第l代杉木，其胸徑、樹高和立 木蓄積分別降低22%、 30%和54%。杉木連栽引起生產力下降是一個普遍 現象，究其原因有很多，例如過去對土壤養分轉化受阻，土壤養分含量下 降，土壤理化性狀變劣，杉木病蟲害增多報道較多，而對引起杉木連栽障 礙之一是土壤微生物多樣性大大減少，對杉木生長致害的病原真菌明顯增 多，經過微生物學鑒定杉木連栽土壤中主要致害菌中的尖孢鐮刀菌萎蔫專 "(七型(^Fksan'w附 ovy5/ orw附 /5p.vas7>^c MW)， 正青毒菌(五wpe"/c/〃/w附 6^>/^"，附)等，所引起的杉木連栽土壤中毒，使杉木幼苗枯萎等毒害尤為 突出這方面的研究報道不多。近五年來，對杉木純林連栽后出現真菌病原 菌增多，有毒物質積累，引起土壤中毒、地力下降，杉木幼苗立枯病嚴重 的情況，予以了足夠的重視，但尚沒有理想的、針對性的防治技術，亟需 早日能夠有新的生防技術，解決杉木人工林土壤病害及地力衰退問題。
發明內容
本發明的目的在于提供一種海洋枯草芽孢桿菌及其篩選方法，本發明 獲得的海洋枯草芽孢桿菌菌種可用于防治杉木人工林根際土壤真菌病害， 進一步可制成用于杉木人工林土傳真菌病害的防病減毒微生物制劑。
同時，本發明還提供了一種可以對杉木根際土壤真菌病害防治的海洋 枯草芽孢桿菌進行有效篩選的方法。
為實現上述目的，本發明采用的技術方案為-
一種海洋枯草芽孢桿菌，其為Bflc/〃wwto7& 3728C，已經于2007年4月23日保藏在中國典型培養物保藏中心，地址中國.武漢.武漢大學，
保藏號為CCTCC No.M 207052。
所述海洋枯草芽孢桿菌的篩選方法為
1) 菌株豐刀f帝以纟工f對林(Afa"grove)白勺木禾覽(萬rwg/enaf gy附"ofr/ /za ) 幼根根表土壤為分離菌種的樣品，將帶有根表土壤的木欖幼年根樣品剪成 0.5-4cm長小段，而后放于盛有海水的三角瓶中，三角瓶放在70-90。C水浴 中，熱處理15-20分鐘(以殺滅根表土壤樣品中的非芽孢菌，達到有效分離 高活性目的菌株)，取出冷卻，用稀釋平皿分離方法涂平皿，進行初篩，初 篩平皿放在25-3(TC保溫箱中保溫培養36-60小時，以形態觀察挑取單菌落， 編#;
戶)f述其木欖幼根為幼年支持根。此時的幼年根有彈性，篩管纖維中空， 似海綿狀，有充氣容氧的效果，此時的杉木幼年根根表土壤中的海洋芽孢 桿菌與木欖幼根間有聯合共生的作用(老年根已木質化，無理想菌株可篩 選)，用此土壤樣品作為篩選分離菌種的樣品，經相互拮抗試驗篩選與定向 篩選相結合方法進行菌種篩選后，可以獲得目的菌株。
所述初篩用的培養基采用牛肉膏蛋白胨麥芽汁瓊脂培養基，具體的說就 是以等重量的牛肉膏蛋白胨瓊脂培養基，與等重量的糖度為波美7度的麥 芽汁瓊脂培養基，分別裝瓶，滅菌冷卻，臨用時分別加熱融化，無菌室內 混合均勻倒平皿使用。
2) 菌株復篩將上述初篩得到形態特征為枯草芽孢桿菌典型的菌落，
移接到盛有牛肉膏蛋白胨瓊脂的斜面試管中，分別挑取單菌落5-10個，放 置于25-30'C保溫培養36-60小時，供復篩用；
復篩采用平皿拮抗試驗方法，所述平皿相互拮抗試驗篩選模型與定向篩 選相結合的方法，是以已經分離得到杉木人工林根際土壤中主要致害真菌 為靶標菌株，與已經分離純化的木欖幼根根表土壤中得到海洋芽孢桿菌菌 株之間進行拮抗試驗篩選與定向篩選相結合的方法，篩選出高活性的海洋 芽孢桿菌。
具體為以杉木根際土壤病害真菌為靶子菌，按常規方法在平皿上進行 對峙的拮抗試驗，在25-3(TC保溫36-60小時，取出平皿，檢測初篩菌株對 靶子菌的抑菌圈大小，抑菌圈直徑達到16mm或16mm以上的為合格，擇 優保存；
所述杉木根際土壤病害真菌為尖孢鐮刀菌萎蔫專化型(Fwar/z^
3) 已復篩選定的海洋枯草芽孢桿菌可以進行杉木一年生實生苗盆栽土 壤中的定殖試驗；
定殖試驗將海洋枯草芽孢桿菌試管斜面菌種，移接擴繁，然后在 25-3(TC保溫培養36-60小時，此時海洋枯草芽孢桿菌菌苔已長得十分豐滿， 可以用無菌水刮洗下來，制成菌懸液，使每毫升菌懸液中的菌體細胞數達到10億個CFU以上，即達到109濃度，可以與杉木苗盆栽土壤均勻混合， 使每克土壤中的試驗測定的枯草芽孢桿菌的細胞數達105CFU以上，即每克 土壤中達到IO萬個CFU細胞以上；土壤裝入盆內，每盆移栽杉木一年生 實生苗，按盆栽試驗常規方法管理，接入土中2-16周后，海洋枯草芽孢桿 菌細胞數穩定在10SCFU/克，土水平的，說明得到的海洋枯草芽孢桿菌能在 杉木根際土壤中定殖，此菌株為有效菌株，可供應用試驗或推廣應用。從 土壤中分離出來的定殖的枯草芽孢桿菌對靶標菌的抑菌圈直徑不低于實驗 室測定的結果，抑菌圈直徑^16.6mm。
所述得到的對病原菌的抑制作用的海洋孢桿菌為枯草芽孢桿菌，用傳 統的細菌學鑒定或16SrDNA序列檢測證明其為枯草芽孢桿菌(^ c/〃w /Sm6"7/力。
本發明具有如下的優點
1、 供篩選高效防治杉木根際土壤鐮刀菌病原菌的樣品目標明確，采用 紅樹林木欖幼年支持根(帶有根表土壤)，以此類樣品按本發明方法進行分離 篩選，可以獲得具有高效防治杉木根際土壤中尖孢鐮刀菌等病原真菌病害 的優良的海洋枯草芽孢桿菌。
2、 本發明的篩選方法簡明易行，篩選得率，。以上選擇紅樹林木欖 (SrMgw/era gymw ;r/2/za)幼年支持根(帶有根表土壤)為分離篩選目的菌株的 樣品，采用實驗室無菌操作技術，將木欖幼年支持根(帶有根表土壤)經85 °C 、 15分鐘熱處理后，以平皿稀釋法分離目的菌株，菌株編號，與靶標菌株杉 木根際土壤致害真菌尖孢鐮刀菌萎蔫專化型(Fw犯n'Mm o砂son/m w^'"yk^m)之間，進行平皿拮抗試驗，篩選出有高拮抗活性的編號菌株， 經傳統的細菌學鑒定或16S rDNA序列檢測證明其為枯草芽孢桿菌(Sa"7/w
3. 篩選結果可信度高。所述得到的海洋枯草芽孢桿菌，進行杉木一年 生實生苗盆栽試驗，在杉木根際土壤中能高密度定殖(接入土中12周后，海 洋枯草芽孢桿菌在根際的定殖密度達10SCFU/克.土以上)、高活性抑制病原 菌(從根際分離已定殖的達95%以上的菌株抑制病原菌活性不低于實驗室測 定抑菌圈直徑16.6mm)。并要求接種定殖的海洋枯草芽孢桿菌對杉木生長無 抑制作用，或具有促進杉木生長作用的菌株，對這些有拮抗靶標菌株的菌 株中選優保存，所得到的菌株即為有效菌株，從而完成了防治杉木人工林 根際土壤真菌病害的海洋枯草芽孢桿菌的篩選。
4. S編7/m 3728C應用效果好。所得到的海洋枯草芽孢桿菌 3728C，抑制杉木土壤中鐮刀菌的活性強(抑菌圈直徑16.66mm)，在杉木根 際土壤中定殖能力強(進行杉木一年生實生苗的盆栽試驗，接種枯草芽孢桿 菌后12周，測定其在杉木幼苗根際土壤中的定殖密度l()SCFU/克.土，其為 篩選得到的高效菌株，從土壤中分離出來的定殖的枯草芽孢桿菌對靶標菌的抑菌圈直徑不低于實驗室測定的結果，抑菌圈直徑16.66mm)對杉木生長 無抑制，并有促進生長的作用，并對環境友好，制成生態制劑，在杉木人 工林應用試驗效果好，有利于應用推廣。
本發明中所涉及的Sac/〃w w^7/s 3728C，已經于2007年4月23日保 藏在中國典型培養物保藏中心，地址中國.武漢.武漢大學，保藏號為 CCTCC No.M 207052。
圖1為海洋細菌3728 (即為本發明中涉及的B"c/〃w 3728C)和
相關菌株的系統發育樹。
具體實施例方式
本發明采用常規的平皿相互拮抗篩選模型和定向篩選相結合的方法， 其具體步驟①采集熱帶或亞熱帶地區沿海的紅樹林(7Wa"grave/om^)林 區的木欖(6wgw'eragvwwo/T&za)幼年支持根(有彈性，篩管纖維中空， 似海綿狀，有充氣容氧的效果。不取老年根，因老年根已逐漸木質化，變 硬。)帶有土壤的樣品；②經85°C、 15分鐘處理后，以平皿稀釋法分離所 需菌株；③以杉木人工林根際土壤中主要致害真菌尖孢鐮刀菌萎蔫專化型 為靶標，通過平皿拮抗試驗篩選出具有高效拮抗活性的木欖根表土壤樣品 分離的海洋枯草芽孢桿菌；④通過盆栽試驗篩選出具有高效拮抗活性且能 在杉木人工林土壤上栽種杉木苗的杉木根際土壤中定殖的，在原位土壤中 測定有明顯抑制杉木根際土壤中致害真菌(尖孢鐮刀菌萎蔫專化型)作用 的拮抗菌株，此菌株同時要對杉木生長無抑制作用，或略有促進生長作用， 進行挑選，經16SrDNA分析確定其為枯草芽孢桿菌，所得到的菌株，即為 高效菌株3728C。
用于防治杉木人工林根際土壤真菌病害的海洋枯草芽孢桿菌3728C已 在中國典型培養物保藏中心保藏，其保藏號為CCTCC No，M207052。海洋 枯草芽孢桿菌3728C具有典型枯草芽孢桿菌特征，芽孢柱狀、中生、不膨 大。菌體為桿狀或短桿狀，革蘭氏染色陽性，菌落呈淡黃色、不透明、干 燥、表面粗糙，邊緣不規則。水解淀粉，接觸酶陽性，利用檸檬酸鹽，能 在7%NaCl和45'C生長，分子生物學鑒定3728C菌株的16S rDNA序列與 枯草芽孢桿菌的序列相似性最高為99.5%。 3728C菌株能在杉木根際土壤 中高密度定殖(〉105CFU/^±)，對杉木人工林根際土壤真菌病害有明顯的 防治效果(抑菌率>60%，防效達60%以上)；
通過本發明篩選出來的防治杉木人工林根際土壤致害真菌的木欖根際 的海洋枯草芽孢桿菌，以此菌株為主要組分之一研制成克服杉木連栽障礙 的防病減毒生態制劑，是一種高效、無毒、安全、無殘留、能促進杉木人 工林綠色生態體系發展的微生物制劑，經在湖南會同杉木人工林地區的應用試驗結果良好，有發展前途。
用本發明篩選方法得到的海洋枯草芽孢桿菌(^^7/w ^&///" 3728C， 具有高效防治杉木人工林根際土壤真菌病害的作用，抑制杉木土壤中尖孢 鐮刀菌的活性強度大(抑菌圈直徑達到16.6 mm)，并對杉木生長無抑制作用 且具有一定的促生長效果，對環境友好。
防治杉木人工根際真菌病害(鐮刀菌)的海洋枯草芽孢桿菌的篩選方法
步驟如下
1、 樣品采集在實驗室準備無菌采樣瓶子，已滅菌的剪刀，酒精棉球， 帶至熱帶、亞熱帶紅樹林地區，選好木欖樹，取木欖幼年支持根(帶有根表 土壤)，用已滅菌的剪刀，剪取根尖前段幼年支持根約3cm長的根段，放入
到無菌采樣瓶中，用冰瓶保藏帶回至實驗室，待分離篩選目的菌之用，所 采的木欖幼年支持根要有彈性感，其篩管纖維中空，似海綿狀，幼年根的 粗細直徑似人的小手指狀，木欖幼年支持根表面要帶有自然狀態的土壤(即 沾在根上的海泥，不要經抖動能掉下的土壤)。
2、 菌株初篩將木欖幼年根(帶有根表土壤)樣品，用無菌剪刀把木欖 幼年支持根剪成2cm長小段，而后放于盛有海水的三角瓶中(用500mL三 角瓶，裝海水100mL，12rC滅菌20分鐘)，并將此三角瓶放在85。C水浴中， 熱處理15-20分鐘，殺滅非芽孢細菌，取出冷卻，用稀釋平皿分離方法涂平 皿，進行初篩，初篩平皿放在28'C保溫箱中保溫培養48小時，以形態觀察 挑取單菌落，編號。初篩用的培養基采用牛肉膏蛋白胨麥芽汁瓊脂培養基， 具體的說就以等重量的牛肉膏蛋白胨瓊脂培養基，與等重量的糖度為波美7 度的麥芽汁瓊脂培養基，分別裝瓶，滅菌冷卻，臨用時分別加熱融化，無 菌室內混合均勻倒平皿使用。木欖幼年根(帶有根表土壤)樣品懸液，用稀釋 法涂此平皿，28'C保溫培養，皿上長出來的單菌落，菌落形態十分典型， 海洋枯草芽孢桿菌在此平皿上，形成的單菌落形態(48小時)菌落有限生 長，周邊不整齊，菌落直徑2-4mm，淺土黃色，表面粗糙，干燥，有明顯 而典型的褶皺，海洋枯草芽孢桿菌在此平皿上生長獨特，與此平皿上生長 出來的其他單菌落形態特征有明顯的不同，易于區分。
以上所述的兩種培養基為
(1) 牛肉膏蛋白胨瓊脂培養基組成為牛肉膏3g，蛋白胨5g，水 lOOOmL，瓊脂20g， pH7.0-7.2。 121°C，滅菌20分鐘，備用；
(2) 麥芽汁瓊脂培養基組成為糖度為波美7度的麥芽汁1000mL， 瓊脂20g， pH7.0-7.2。 121°C，滅菌20分鐘，備用；
麥芽汁的制備
(i)先制備麥芽粉取普通大麥(最好當年收獲的)種子浸泡24小
時，置于水筐內，上面蓋濕布，在2(TC左右保溫，每天沖水l-2次(淋洗)， 至芽長為麥粒長度的1-1.5倍時，即可曬(烘)干磨成粉。
(ii)麥芽糖化將每1000g麥芽干粉加水3公斤，55。C糖化，加碘液檢測，至不呈藍色時為止(約6-7小時)，再煮沸30分鐘，使蛋白質沉淀，調 pH至中性，以紗布過濾后，將濾液倒入量筒中，靜置過夜，然后虹吸法吸 出上清液，用糖度計測定之，用水稀釋至所需要的波美7度分裝三角瓶， 121 。C滅菌20分鐘，7令去卩備用。
3、 菌株復篩將上述初篩得到形態特征為枯草芽孢桿菌典型的菌落， 移接到盛有牛肉膏蛋白胨瓊脂的斜面試管中，分別挑取典型的豐滿健壯的
單菌落5-10個，移接斜面后編號，放置于28"C保溫培養48小時，供復篩 用。復篩采用平皿拮抗試驗方法，以杉木根際土壤病害真菌尖孢鐮刀菌萎 蔫專化型(i^yaWww ax^/7WMw/s; .vas7'"yk;mw)為革巴子菌，在初篩已得歪lj 的初步認為是枯草芽孢桿菌(已編號的)，按常規方法在平皿上進行對峙的 拮抗試驗，在28。C保溫72小時，取出平皿，檢測初篩菌株對尖孢鐮刀菌萎 蔫專化型的抑菌圈大小，抑菌圈直徑達到16mm以上的為合格，擇優保存。 此復篩得到的菌株，可以進行杉木根際土壤的定殖試驗。
4、 定殖試驗已復篩選定的海洋枯草芽孢桿菌可以進行杉木一年生實 生苗盆栽土壤中的定殖試驗。將海洋枯草芽孢桿菌試管斜面菌種，移接到 250mL的克氏瓶大斜面上(斜面培養基都用牛肉膏蛋白胨瓊脂培養基)擴 繁，然后在28'C保溫培養48小時，此時海洋枯草芽孢桿菌3728C菌苔己 長得十分豐滿，可以用無菌水刮洗下來，制成菌懸液，使每毫升菌懸液中 的菌體細胞數達到10億個CFU以上，即達到109濃度，可以與杉木苗盆栽 土壤均勻混合，使每克土壤中的試驗測定的枯草芽孢桿菌的細胞數達 105CFU以上(即每克土壤中達到10萬個CFU細胞以上)。土壤裝入盆內， 每盆移栽兩棵杉木一年生實生苗，按盆栽試驗常規方法管理，此時在盆栽 杉木苗根際土壤中接入的海洋枯草芽孢桿菌細胞數，先升后降，前三周杉 木根際土壤中枯草芽孢桿菌的數量增加很快，達到10、1(^CFU/克.土，三周 以后有所下降，逐步趨于穩定，海洋枯草芽孢桿菌細胞數穩定在105CFU/ 克-土水平，說明得到的海洋枯草芽孢桿菌能在杉木根際土壤中定殖，經測 量對杉木苗的生長無抑制作用，而卻有一定促進生長的效果(株高、地徑 都較不接菌的對照有所增加，試驗與對照盆栽各三至五盆，盆栽試驗時間 不短于三個月)。定殖試驗成功的菌株，可以進一歩作經典的細菌學鑒定和 16SrDNA序列分析，最后試驗結果綜合數據確定篩選得到菌株的命名，一 般情況下98%的結果與初篩形態鑒定結果是一致的。至此實驗篩選方法的 步驟都已經完成，此菌株為有效菌株，可供應用試驗或推廣應用。
用本發明篩選方法獲得用于防治杉木人工林根際土壤真菌病害的海洋 細菌3728的有效菌株，經測定具有如下特征
1、海洋細菌3728的形態特征具有典型芽孢菌的特征，能產生芽孢， 芽孢形態為柱狀、中生、不膨大，菌體細胞形態為桿狀或短桿狀，革蘭氏 染色陽性，周生鞭毛，菌落呈淡黃色、干燥、不透明、表面粗糙、邊緣不規則。
2、 海洋細菌3728的生理生化特征水解淀粉，明膠液化，接觸酶陽 性，利用檸檬酸鹽，能在3%、 5。％、 7XNaCl及45。C生長。能利用葡萄糖、 棉子糖、木糖、蔗糖、甘露醇、阿拉伯糖、果糖，不能利用半乳糖、山梨 糖、鼠李糖、菊糖、甲酸鹽、乙酸鹽、丙酸鹽。
3、 分子生物學鑒定，海洋細菌3728的16S rDNA序列與枯草芽孢桿 菌(&"7/mSm^'"s)的序列相似性最高為99.5%,在系統發育樹(進化樹) 中也與枯草芽孢桿菌(Sfl"7/wSw^/fc)處于同一分枝上，見附圖。
4、 在杉木根際土壤中能高密度定殖(〉105CFU/gD，對杉木人工林 根際土壤真菌病原菌尖孢鐮刀菌萎蔫專化型及正青霉等有很強的抑制作 用，對杉木幼樹立枯病有很好防效。
權利要求
1.一種海洋枯草芽孢桿菌，其特征在于所述微生物為Bacillus subtilis3728C，保藏號為CCTCC No.M 207052。
2. 權利要求1所述海洋枯草芽孢桿菌的篩選方法，其特征在于1) 菌株初篩以紅樹林的木欖幼根根表土壤為分離菌種的樣品，將帶 有根表土壤的木欖幼年根樣品剪成0.5-4cm長小段，而后放入盛有海水的三 角瓶中，三角瓶置于70-90。C水浴中，熱處理10-20分鐘，取出冷卻，用稀 釋平皿分離方法涂平皿，進行初篩，初篩平皿放在25-3(TC保溫箱中保溫培 養36-60小時，以形態觀察挑取單菌落，編號；2) 菌株復篩將上述初篩得到形態特征為枯草芽孢桿菌典型的菌落， 移接到盛有牛肉膏蛋白胨瓊脂的斜面試管中，分別挑取單菌落5-10個，放 置于25-3(TC保溫培養36-60小時，供復篩用；復篩采用平皿拮抗試驗方法，以杉木根際土壤病害真菌為靶子菌，按常 規方法在平皿上進行對峙的拮抗試驗，在25-3(TC保溫60-84小時，取出平 皿，檢測初篩菌株對靶子菌的抑菌圈大小，抑菌圈直徑達到16mm或16mm 以上的為合格，擇優保存。
3. 按照權利要求2所述的篩選方法，其特征在于所述其木欖幼根為 幼年支持根。
4.按照權利要求2所述的篩選方法，其特征在于所述初篩用的培養 基采用牛肉膏蛋白胨麥芽汁瓊脂培養基，具體的說就以等重量的牛肉膏蛋 白胨瓊脂培養基，與等重量的糖度為波美7度的麥芽汁瓊脂培養基，分別 裝瓶，滅菌冷卻，臨用時分別加熱融化，無菌室內混合均勻倒平皿使用。
5. 按照權利要求2所述的篩選方法，其特征在于已復篩選定的海洋 枯草芽孢桿菌可以進行杉木一年生實生苗盆栽土壤中的定殖試驗；定殖試驗將海洋枯草芽孢桿菌試管斜面菌種，移接擴繁，然后在 25-30'C保溫培養36-60小時，此時海洋枯草芽孢桿菌菌苔已長得十分豐滿， 可以用無菌水刮洗下來，制成菌懸液，使每毫升菌懸液中的菌體細胞數達 到10億個CFU以上，即達到109濃度，可以與杉木苗盆栽土壤均勻混合， 使每克土壤中的試驗測定的枯草芽孢桿菌的細胞數達105CFU以上，即每克 土壤中達到IO萬個CFU細胞以上；土壤裝入盆內，每盆移栽杉木一年生 實生苗，按盆栽試驗常規方法管理，接入土中12周后，海洋枯草芽孢桿菌 細胞數穩定在10SCFU/克.土水平的，說明得到的海洋枯草芽孢桿菌能在杉 木根際土壤中定殖，此菌株為有效菌株，可供應用試驗或推廣應用。
6. 按照權利要求2所述的篩選方法，其特征在于所述杉木根際土壤 病害真菌為尖孢鐮刀菌萎蔫專化型。
全文摘要
本發明涉及海洋微生物應用技術及杉木人工林根際土壤真菌病害防治，具體地說是一種海洋枯草芽孢桿菌及其篩選方法，所述微生物為Bacillus subtilis 3728C，保藏號為CCTCC No.M 207052，所采用的方法為常規的平皿相互拮抗篩選模型和定向篩選相結合的方法。通過本發明篩選出來的防治杉木人工林根際土壤致害真菌的木欖根際的海洋枯草芽孢桿菌，以此菌株為主要組分之一研制成克服杉木連栽障礙的防病減毒生態制劑，是一種高效、無毒、安全、無殘留、能促進杉木人工林綠色生態體系發展的微生物制劑，經在湖南會同杉木人工林地區的應用試驗結果良好，有發展前途。
文檔編號C12R1/125GK101298597SQ200710011179
公開日2008年11月5日 申請日期2007年4月30日 優先權日2007年4月30日
發明者麗 劉, 徐洪利, 汪思龍, 王書錦, 胡江春, 薛德林, 馬成新 申請人:中國科學院沈陽應用生態研究所