專利名稱：以麻類纖維果膠為底物的紡織專用果膠酶酶活力的測定的制作方法
技術領域：
本發明屬于果膠酶酶活力的測定領域，特別涉及一種以麻類纖維果膠為底物的紡織專用果膠酶酶活力的測定方法。
背景技術：
果膠是植物細胞壁的組成成分之一，存在于相鄰細胞壁間的中膠層中，起著將細胞粘合在一起的作用。果膠的主要成分是D-半乳糖醛酸，同時還有一些天然中性糖如鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、半乳糖、葡萄糖等的存在。果膠存在3種形態原果膠、果膠、果膠酸。 果膠一般以不溶于水的原果膠形式存在，它提取的基本原理是將不溶性果膠轉變為可溶性果膠，并使可溶性果膠向液相轉移從而分離出來。目前，果膠的提取技術包括酸提取法、堿萃取法、酶解法、膜分離技術、離子交換法、微波提取法、微生物法、樹脂法。果膠酶是指降解果膠物質多種酶的總稱。目前已在食品工業、飼料工業、紡織品加工和造紙工業等諸多領域得到應用。酶活力是果膠酶催化果膠降解的一個重要參數。測定果膠酶酶活力的方法有很多，但基本上都是利用酶促反應降解果膠產生的粘度下降或生成的還原性醛基來測定果膠酶酶活。這些方法概括起來主要有脫膠作用時間法、粘度降低法、滴定法、納爾遜-索模吉法、DNS顯色法和紫外法等。粘度降低法用來測定果膠酶的復合酶活力比較準確，但操作過程也相對復雜，且測定靈敏度不高。滴定法設備使用簡單，測試重現性好，準確度高，但測定時間長，過程較繁瑣，試劑用量較大。而DNS顯色法和紫外法等分光光度法測定的靈敏度、準確度均高，重現性好，試劑用量少，尤其是操作省時、簡便。實際上，天然纖維中的果膠與水果果膠是不一樣的，而且，不同果膠酶催化果膠降解的能力也是不一樣的，選擇合適的果膠作為底物對果膠酶酶活力準確測定是非常重要的。

發明內容
本發明所要解決的技術問題是提供一種以麻類纖維果膠為底物的紡織專用果膠酶酶活力的測定方法，該方法操作簡便，底物原料來源廣泛，成本低，提高紡織專業果膠酶酶活力測定的準確性。本發明的一種以麻類纖維果膠為底物的紡織專用果膠酶酶活力的測定方法，包括(1)從麻類植物中提取果膠，得麻類纖維果膠；(2)將上述的麻類纖維果膠溶于緩沖溶液中，制成l_4g/l的果膠溶液；取l_3ml 上述的果膠溶液在30-70°C恒溫下預熱5-30min，然后加入紡織專用果膠酶，再加入l_5ml 緩沖溶液，在30-70°C恒溫下處理10-120min，最后測定紡織專用果膠酶的酶活力。步驟(1)中所述的麻類植物為苧麻、亞麻、黃麻、劍麻、大麻中的一種或幾種。步驟(1)中所述的提取果膠的提取方法為酸提取法、酶提取法、微波提取法、膜分離技術或離子交換法。上述的酸提取方法為將麻類植物剪碎后烘干，得到干燥的麻類植物原料，然后將I-IOg干燥的麻類植物原料放入30-70°C中浸泡10-60min，取出烘干，再浸入50_300mL l-10g/L的草酸銨溶液中，在60-95°C下處理20-240min，過濾，將濾液濃縮至1/4-1/6體積后，加入丙酮沉淀，抽濾，將沉淀于40°C真空干燥，得麻類纖維果膠。上述的麻類植物為苧麻。步驟O)中所述的緩沖溶液均為pH值=8的0. 2M的檸檬酸-磷酸氫二鈉溶液。步驟O)中所述的紡織專用果膠酶的酶活力的測定方法為滴定法、脫膠作用時間法、粘度下降法、DNS顯色法、紫外吸收測定法、納爾遜-索模吉法和染料釋放分析法中的一種。步驟O)中所述的紡織專用果膠酶為kourzyme Np果膠酶(由Novozymes公司提供)。步驟O)中所得到的紡織專用果膠酶的酶活用于測定紡織專用果膠酶的酶活力比，即以麻類纖維果膠為底物測定的酶活力與以蘋果果膠為底物測定的酶活力之比；酶活力比> 1的果膠酶適合于纖維加工，其酶活力比< 1的果膠酶適合于食品或飼料加工。經實驗證明用不同底物測定的果膠酶酶活力是不同的。以蘋果果膠為底物測定果膠酶酶活力為例，發現所測定的酶活力與其在食品、飼料的果膠酶催化效果基本一致， 但與棉織物的酶催化精練效果大相徑庭。因此，篩選和提取一種紡織專用果膠酶酶活力的底物，對提高紡織專業果膠酶酶活力測定的準確性有重要意義；紡織專用果膠酶一般用于天然纖維素纖維及其混紡織物的生物脫膠、精練等工序。本發明所指紡織專用果膠酶酶活力測定的結果適用于天然纖維素纖維及其混紡織物的生物脫膠、精練等果膠酶的催化活性的評價。有益效果本發明的紡織專用果膠酶酶活力的測定方法，操作簡便，底物原料來源廣泛，成本低；采用麻類纖維果膠作為紡織專用果膠酶酶活力測定的底物，能提高紡織專用果膠酶酶活力測定的準確性。
具體實施例方式下面結合具體實施例，進一步闡述本發明。應理解，這些實施例僅用于說明本發明而不用于限制本發明的范圍。此外應理解，在閱讀了本發明講授的內容之后，本領域技術人員可以對本發明作各種改動或修改，這些等價形式同樣落于本申請所附權利要求書所限定的范圍。實施例1將苧麻剪成一定的長度，烘干稱取5g左右的苧麻，放入溫水中浸泡30min左右，烘干后，放入圓底燒瓶，加入150mL 5g/L的草酸銨溶液，在90°C下處理90min，過濾，將萃取液濃縮至1/5體積后，加入丙酮沉淀，抽濾，將沉淀放在40°C的真空干燥器中進行干燥，得麻類纖維果膠。然后測定麻類纖維果膠中灰分、甲氧基和半乳糖醛酸的含量，如表1所示。表1苧麻果膠主要成分的含量
權利要求
1.一種以麻類纖維果膠為底物的紡織專用果膠酶酶活力的測定方法，包括(1)從麻類植物中提取果膠，得麻類纖維果膠；(2)將上述的麻類纖維果膠溶于緩沖溶液中，制成l_4g/l的果膠溶液；取l_3ml上述的果膠溶液在30-70°C恒溫下預熱5-30min，然后加入紡織專用果膠酶，再加入l_5ml緩沖溶液，在30-70°C恒溫下處理10-120min，最后測定紡織專用果膠酶的酶活力。
2.根據權利要求1所述的一種以麻類纖維果膠為底物的紡織專用果膠酶酶活力的測定方法，其特征在于步驟(1)中所述的麻類植物為苧麻、亞麻、黃麻、劍麻、大麻中的一種或幾種。
3.根據權利要求1所述的一種以麻類纖維果膠為底物的紡織專用果膠酶酶活力的測定方法，其特征在于步驟(1)中所述的提取果膠的提取方法為酸提取法、酶提取法、微波提取法、膜分離技術或離子交換法。
4.根據權利要求3所述的一種以麻類纖維果膠為底物的紡織專用果膠酶酶活力的測定方法，其特征在于所述的酸提取方法為將麻類植物剪碎后烘干，得到干燥的麻類植物原料，然后將I-IOg干燥的麻類植物原料放入30-70°C中浸泡10-60min，取出烘干，再浸入50-300mL l-10g/L的草酸銨溶液中，在60_95°C下處理20_240min，過濾，將濾液濃縮至 1/4-1/6體積后，加入丙酮沉淀，抽濾，將沉淀于40°C真空干燥，得麻類纖維果膠。
5.根據權利要求4所述的一種以麻類纖維果膠為底物的紡織專用果膠酶酶活力的測定方法，其特征在于所述的麻類植物為苧麻。
6.根據權利要求1所述的一種以麻類纖維果膠為底物的紡織專用果膠酶酶活力的測定方法，其特征在于步驟⑵中所述的緩沖溶液均為PH值=8的0. 2M的檸檬酸-磷酸氫二鈉溶液。
7.根據權利要求1所述的一種以麻類纖維果膠為底物的紡織專用果膠酶酶活力的測定方法，其特征在于步驟O)中所述的紡織專用果膠酶的酶活力的測定方法為滴定法、脫膠作用時間法、粘度下降法、DNS顯色法、紫外吸收測定法、納爾遜-索模吉法和染料釋放分析法中的一種。
8.根據權利要求1所述的一種以麻類纖維果膠為底物的紡織專用果膠酶酶活力的測定方法，其特征在于步驟O)中所述的紡織專用果膠酶為kourzyme Np果膠酶。
9.根據權利要求1所述的一種以麻類纖維果膠為底物的紡織專用果膠酶酶活力的測定方法，其特征在于步驟O)中所得到的紡織專用果膠酶的酶活力用于測定紡織專用果膠酶的酶活力比，即以麻類纖維果膠為底物測定的酶活力與以蘋果果膠為底物測定的酶活力之比；酶活力比> 1的果膠酶適合于纖維加工，基酶活比小于1的果膠酶適合于食品或飼料加工。
全文摘要
本發明涉及一種以麻類纖維果膠為底物的紡織專用果膠酶酶活力的測定方法，包括(1)從麻類植物中提取果膠，得麻類纖維果膠；(2)將上述的麻類纖維果膠溶于緩沖溶液中，制成1-4g/l的果膠溶液；取1-3ml上述的果膠溶液在30-70℃恒溫下預熱5-30min，然后加入紡織專用果膠酶，再加入1-5ml緩沖液，在30-70℃恒溫下處理10-120min，最后測定紡織專用果膠酶的酶活。本發明的紡織專用果膠酶酶活力的測定方法，操作簡便，底物原料來源廣泛，成本低；采用麻類纖維果膠作為紡織專用果膠酶酶活測定的底物，能提高紡織專用果膠酶酶活測定的準確性。
文檔編號C12Q1/34GK102533936SQ20121000407
公開日2012年7月4日 申請日期2012年1月6日 優先權日2012年1月6日
發明者付康麗, 陸大年, 陳小湘 申請人:東華大學