專利名稱：一種奴卡氏菌培養基的制作方法
技術領域：
本發明涉及檢驗微生物培養領域，具體涉及一種適用于奴卡氏菌的培養基。
背景技術：
奴卡氏菌屬已有的種近30個，與醫學有關的種也近10個，屬于放線菌屬，為需氧菌，存在于土壤，可引起人的奴卡菌病。帶菌的灰塵、土壤或食物通過呼吸道、皮膚創口或消化道進入人體，然后局限于某一器官或組織，或經血循環散播至腦、腎或其他器官。由于該菌不很常見，而且生長較慢，使用傳統方法需要幾周方能較準確地做出鑒定，因而臨床上又很容易誤診。常用一般抗生素進行治療，結果延誤時間，造成多處病灶轉移，如轉移至腦部極易造成死亡。故臨床細菌檢查的正確與快速鑒定極為重要。目前臨床培養多使用血瓊脂平板，在37°C需氧培養下多數于3 7d才能生長為肉眼可見的針尖大的菌落，做生化反應進行鑒定則需培養4飛周。而且如果是痰標本，則很有可能會被痰標本中的正常菌群所掩蓋而產生誤診。

發明內容
本發明的技術任務是針對以上現有技術的不足，提供一種加速奴卡氏菌生長且分
離率高的培養基。本發明解決其技術問題的技術方案是一種奴卡氏菌培養基，其特征在，配制 IOOOml培養基的配方中含有
可溶性淀粉2 4g ； 牛肝粉l(T20g ； 苯唑青霉素0. 005^0. 02g ； 多枯菌素3 5萬單位； 蒜硫胺素0. Γ0. 4g ； 肌醇 0. 0Γ0. 2g ； 硫酸鎂0. 8 1. Ig ； 瓊脂15 20g ； 蒸餾水加至1000ml。優化方案中，每IOOOml培養基還含有胸腺嘧啶核苷0. 05、. 5g。優化方案中，每1000ml培養基還含有丙酮酸鈣0. θΓθ. lg。優化方案中，每1000ml培養基還含有檸檬酸鋅0. θΓθ. lg。優化方案中，上述的可溶性淀粉為薯蕷淀粉。其中所述的可溶性淀粉、牛肝粉提供碳氮源和能量；苯唑青霉素、多枯菌素抑制雜菌生長，提高了奴卡氏菌的分離率；肌醇為營養增強劑，蒜硫胺素為激活劑，可以促進肌醇攝取；硫酸鎂為緩沖劑，且可以破壞標本中殘留的抗真菌菌素；瓊脂是培養基的凝固劑；胸腺嘧啶核苷為營養增強劑，丙酮酸鈣和檸檬酸鋅除有營養增強作用外，還可以抑制革蘭氏陽性菌生長。本發明與現有技術相比較，具有檢出可靠、奴卡氏菌分離率高的特點。
具體實施例方式以下結合實際情況，對本發明的具體實施方式
作詳細說明。實施例1，配制IOOOml培養基的配方中含有玉米淀粉2g ；牛肝粉20g ；硫酸鎂
0.Sg ；瓊脂15g ；苯唑青霉素0. 02g ；多枯菌素5萬單位；蒜硫胺素0. lg，肌醇0. 2g ；蒸餾水加至 IOOOml0實施例2，配制IOOOml培養基的配方中含有豌豆淀粉4g ；牛肝粉IOg ；硫酸鎂
1.Ig ；瓊脂20g ；苯唑青霉素0. 005g ；多枯菌素3萬單位；蒜硫胺素0. 4g，肌醇0. Olg ；蒸餾水加至1000ml。實施例3，配制IOOOml培養基的配方中含有土豆淀粉2g ；牛肝粉20g ；硫酸鎂
0.Sg ；瓊脂15g ；苯唑青霉素0. 02g ；多枯菌素5萬單位；蒜硫胺素0. lg，肌醇0. 2g，胸腺嘧啶核苷0. 05g ；蒸餾水加至1000ml。實施例4，配制IOOOml培養基的配方中含有薯蕷淀粉4g ；牛肝粉IOg ；硫酸鎂
1.Ig ；瓊脂20g ；苯唑青霉素0. 005g ；多枯菌素3萬單位；蒜硫胺素0. 4g，肌醇0. Olg，胸腺嘧啶核苷0. 5g ；蒸餾水加至1000ml。實施例5，配制1000ml培養基的配方中含有土豆淀粉3g ；牛肝粉15g ；硫酸鎂Ig ； 瓊脂18g ；苯唑青霉素0. Olg ；多枯菌素4萬單位；蒜硫胺素0. 2g，肌醇0. Ig,胸腺嘧啶核苷 0. Ig ；蒸餾水加至1000ml。實施例6，配制IOOOml培養基的配方中含有土豆淀粉2g ；牛肝粉20g ；硫酸鎂
0.Sg ；瓊脂15g ；苯唑青霉素0. 02g ；多枯菌素5萬單位；蒜硫胺素0. Ig,肌醇0. Olg,胸腺嘧啶核苷0. 05g，丙酮酸鈣0. lg，檸檬酸鋅0. Ig;蒸餾水加至1000ml。實施例7，配制IOOOml培養基的配方中含有薯蕷淀粉4g ；牛肝粉IOg ；硫酸鎂
1.Ig ；瓊脂20g ；苯唑青霉素0. 005g ；多枯菌素3萬單位；蒜硫胺素0. 4g，肌醇0. 2g，胸腺嘧啶核苷0. 5g，丙酮酸鈣0. Olg，檸檬酸鋅0. Olg ；蒸餾水加至1000ml。實施例8，配制1000ml培養基的配方中含有薯蕷淀粉3g ；牛肝粉15g ；硫酸鎂Ig ； 瓊脂18g ；苯唑青霉素0. Olg ；多枯菌素4萬單位；蒜硫胺素0. 3g，肌醇0. Ig,胸腺嘧啶核苷 0. 2g，丙酮酸鈣0. 05g,檸檬酸鋅0. 05g ；蒸餾水加至IOOOml。實施例廣8培養基的制備方法可以為取除多枯菌素、苯唑青霉素外的原料溶于蒸餾水中，混勻，蒸餾水定容至1000ml，121°C，15min滅菌后，降溫到5(T60°C，無菌操作下加入多枯菌素、苯唑青霉素溶解混勻，分裝。本發明所得奴卡氏菌培養基具有奴卡氏菌生長快，分離率高的特點，為臨床資料充分證明20株奴卡氏菌菌株(其中星形奴卡氏菌8株、巴西氏奴卡氏菌8株及豚鼠奴卡氏菌4株)制成生理鹽水菌懸液，以McFarland 0. 5標準比濁管調整菌懸液濁度，用鹽水連續10倍稀釋，分別取0. Irnl接種于實施例8方案培養基、實施例5方案培養基、實施例2 方案培養基、血瓊脂平板上。36 37°C保溫，48小時時各組檢出陽性菌株(中央內凹，表面有皺褶，顆粒狀橙黃色，菌落表面有白色菌絲生長)例數為實施例8方案培養基15例、實施例 5方案培養基12例、實施例2方案培養基8例、血瓊脂平板6例。96小時時各組檢出菌例
4數為實施例8方案培養基20例、實施例5方案培養基20例、實施例2方案培養基18例、 血瓊脂平板14例。結果表明，本發明實施例奴卡氏菌分離率明顯高目前常用于的血瓊脂平板。
權利要求
1.一種奴卡氏菌培養基，其特征在于，配制IOOOml培養基的配方中含有可溶性淀粉2 4g ；牛肝粉l(T20g ；苯唑青霉素0. 005^0. 02g ；多枯菌素3 5萬單位；蒜硫胺素0. Γ0. 4g ；肌醇 0. 0Γ0. 2g ；硫酸鎂0. 8 1. Ig ；瓊脂15 20g ；蒸餾水加至1000ml。
2.根據權利要求1所述的一種奴卡氏菌培養基，其特征在于每IOOOml培養基還含有胸腺嘧啶核苷0. 05 0. 5g。
3.根據權利要求1所述的一種奴卡氏菌培養基，其特征在于每IOOOml培養基還含有丙酮酸鈣0.0廣0. Igo
4.根據權利要求1所述的一種奴卡氏菌培養基，其特征在于每IOOOml培養基還含有檸檬酸鋅0.0廣0. Igo
5.根據權利要求1所述的一種奴卡氏菌培養基，其特征在于所述的可溶性淀粉為薯蕷淀粉。
全文摘要
本發明公開了一種奴卡氏菌培養基。其特征在于，配制1000ml培養基的配方中含有可溶性淀粉2~4g；牛肝粉10~20g；苯唑青霉素0.005~0.02g；多枯菌素3~5萬單位；蒜硫胺素0.1~0.4g；肌醇0.01~0.2g；硫酸鎂0.8~1.1g；瓊脂15~20g；蒸餾水加至1000ml。本發明與現有技術相比較，具有檢出可靠、奴卡氏菌分離率高的特點。
文檔編號C12R1/04GK102559841SQ201210056470
公開日2012年7月11日 申請日期2012年3月6日 優先權日2012年3月6日
發明者劉森, 李艷, 王京軍 申請人:王京軍