專利名稱：一種用于檢測(cè)沙門(mén)氏菌的顯色培養(yǎng)基的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種微生物檢測(cè)的培養(yǎng)基，尤其涉及一種用于檢測(cè)沙門(mén)氏菌的顯色培養(yǎng)基。
背景技術(shù)：
沙門(mén)氏菌iSaltnonella)是腸桿菌科的重要致病菌屬，據(jù)統(tǒng)計(jì)在世界各國(guó)的細(xì)菌性食物中毒中，沙門(mén)氏菌引起的食物中毒常列榜首，一直以來(lái)均引起國(guó)際國(guó)內(nèi)的廣泛關(guān)注，它不但涉及到人類身體健康和國(guó)際貿(mào)易，而且嚴(yán)重影響社會(huì)的穩(wěn)定。據(jù)美國(guó)CDC2009年2月9日公布的統(tǒng)計(jì)數(shù)字，美國(guó)44個(gè)州有600人因食用兩種花生醬受到沙門(mén)氏菌感染。在我國(guó)，沙門(mén)氏菌污染也是最主要的食品安全問(wèn)題。調(diào)查顯示，我國(guó)每年發(fā)生的細(xì)菌性食物中毒 事件由沙門(mén)氏菌引起的占80 %。沙門(mén)氏菌傳統(tǒng)的檢測(cè)方法利用的是常規(guī)生化原理，由于與其它腸桿菌如志賀氏菌、檸檬酸菌屬及變形桿菌的生化特征非常相似，在傳統(tǒng)木糖-賴氨酸-去氧膽酸鹽培養(yǎng)基(X L D)中選擇效果不明顯，可疑菌落不易識(shí)別，而且當(dāng)有其它的腸道菌群存在時(shí)會(huì)影響沙門(mén)氏菌的檢測(cè)，給檢測(cè)技術(shù)人員帶來(lái)極大的工作量與不確定性。隨著現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，特別是免疫學(xué)、生物化學(xué)、分子生物學(xué)的不斷發(fā)展，不少快速、簡(jiǎn)便、特異、敏感、低耗且適用的沙門(mén)氏菌檢測(cè)方法，如PCR法、金標(biāo)試紙法、免疫法、乳膠凝集試驗(yàn)和DNA探針技術(shù)等快速檢驗(yàn)方法，已在不斷得到擴(kuò)大應(yīng)用。然而由于這些方法需要較高的技術(shù)且儀器試、劑的成本較高，而且酶聯(lián)免疫吸附法、乳膠凝集試驗(yàn)等會(huì)與沙門(mén)氏菌的多種血清型出現(xiàn)交叉反應(yīng)。相比以顯色培養(yǎng)基為基礎(chǔ)的特異性顯色生化鑒定技術(shù)在當(dāng)前能更好地與傳統(tǒng)方法相接軌，這種技術(shù)可以把檢測(cè)、計(jì)數(shù)和初步鑒別一次完成，大幅度提高檢測(cè)的速度和準(zhǔn)確性，檢測(cè)成本較低，因此其應(yīng)用前景廣闊。目前國(guó)內(nèi)外已有的沙門(mén)氏菌顯色培養(yǎng)基利用的原理為沙門(mén)氏菌能利用丙烯乙二醇產(chǎn)酸以及不含3 -半乳糖苷酶，但大腸桿菌及其它大腸菌群不能利用丙烯乙二醇產(chǎn)酸以及含3 -半乳糖苷，因此在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中添加丙烯乙二醇及3 -半乳糖苷酶的底物，這種顯色培養(yǎng)基中沙門(mén)氏菌顯示利用丙烯乙二醇產(chǎn)酸的色澤一亮紅色，而大腸桿菌及其它大腸菌群呈現(xiàn)半乳糖苷酶的底物中顯色基團(tuán)的色澤一藍(lán)綠色。如德國(guó)Merck公司生產(chǎn)的顯色培養(yǎng)基Rambach agar以及國(guó)內(nèi)的某些品牌的培養(yǎng)基，這種原理的顯色培養(yǎng)基不可以檢測(cè)沙門(mén)氏菌中的傷寒沙門(mén)氏菌和甲副傷寒沙門(mén)氏菌，這兩種菌在此類顯色培養(yǎng)基上不能顯示特征性的色澤。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種用于檢測(cè)沙門(mén)氏菌的顯色培養(yǎng)基。本發(fā)明的所采用的技術(shù)方案為
一種用于檢測(cè)沙門(mén)氏菌的顯色培養(yǎng)基，每IOOOmL培養(yǎng)基含有瓊脂10 18g、蛋白胨8 20g、牛肉浸粉2 10g、氯化鈉3 10g、表面活性劑I 10g、辛酸酯酶顯色底物0. I 0.7g、^ -半乳糖苷酶顯色底物0. I 0. 6g、氨基己糖苷酶顯色底物0. I 0. 6g、酶誘導(dǎo)劑
0.05 0. 3g、膽鹽3 10g、新生霉素5 20mg。辛酸酯酶顯色底物為5-溴-6-氯-3-卩引哚-辛酯(Magenta-caprylate)。^ -半乳糖苷酶顯色底物為5-溴-4-氯-3-吲哚-P -D-半乳糖苷(X-Gal )。氨基己糖苷酶顯色底物為5-溴-4-氯-3-吲哚-N-乙酰-P-D-氨基葡萄糖苷(X-GLUCOSAMINIDE)。表面活性劑為吐溫系列中的任一種。酶誘導(dǎo)劑為IPTGU-硫代-B-D-乙基半乳糖苷、1-0-甲基-b-D-吡喃半乳糖苷、甲基_1-硫代-B -D-半乳糖苷、苯基_ P -D-硫代批喃半乳糖苷中的任一種。 膽鹽為牛膽鹽、豬膽鹽、三號(hào)膽鹽、去氧膽酸鈉中的至少一種。優(yōu)選的，用于檢測(cè)沙門(mén)氏菌的顯色培養(yǎng)基，每IOOOmL培養(yǎng)基含有瓊脂15g、蛋白胨12g、牛肉浸粉5g、氯化鈉5g、吐溫-20 5g、5-溴-6-氯-3-吲哚-辛酯0. 35g、5-溴-4-氯-3-吲哚-￠-半乳糖苷0. 4g、IPTG 0. 15g、5-溴-4-氯-3-吲哚-N-乙酰-3 -氨基葡萄糖苷0. 4g、豬膽鹽6g、新生霉素12mg。本發(fā)明在培養(yǎng)基中添加了 5-溴-6-氯-3-吲哚-辛酯，沙門(mén)氏菌(包括亞利桑那沙門(mén)氏菌亞屬)、弗氏檸檬酸桿菌和念珠菌在辛酸酯酶作用下顯示出紫紅色色澤。本發(fā)明在培養(yǎng)基中添加了表面活性劑，其作用在于誘導(dǎo)沙門(mén)氏菌的辛酸酯酶，使之能利用顯色底物5-溴-6-氯-3-吲哚-辛酯，從而沙門(mén)氏菌顯示出紫紅色色澤。表面活性劑包括吐溫系列(吐溫-20、吐溫-40、吐溫-60和吐溫-80)，吐溫-20可使辛酸酯酶的活力得到相對(duì)高的表達(dá)，因此優(yōu)選了吐溫-20。本發(fā)明在培養(yǎng)基中添加了 ￠-半乳糖苷酶顯色底物，其它的腸桿菌屬如大腸桿菌和大腸菌群在3 -半乳糖苷酶作用下分解底物，游離出顯色基團(tuán)，使菌落呈現(xiàn)出顯色基團(tuán)的色澤一藍(lán)綠色。本發(fā)明在培養(yǎng)基中添加了氨基己糖苷酶顯色底物，念珠菌在氨基己糖苷酶作用下分解底物，游離出顯色基團(tuán)，使菌落呈現(xiàn)出顯色基團(tuán)的色澤一藍(lán)綠色。由于弗氏檸檬酸桿菌同時(shí)具有辛酸酯酶和3 -半乳糖苷酶，而念珠菌同時(shí)具有辛酸酯酶和氨基己糖苷酶，通過(guò)顯色底物量的調(diào)整以及誘導(dǎo)劑對(duì)酶的誘導(dǎo)，最終使弗氏檸檬酸桿菌和念珠菌呈現(xiàn)出5-溴-4-氯-3-吲哚-P -半乳糖苷底物以及5-溴-4-氯-3-吲哚-N-乙酰-P -氨基葡萄糖苷底物顯色基團(tuán)的色澤一藍(lán)綠色，從而可以與沙門(mén)氏菌相區(qū)分。本發(fā)明在培養(yǎng)基中添加了酶的誘導(dǎo)劑，其作用在于誘導(dǎo)腸桿菌屬的￠-半乳糖苷酶，使之能利用顯色底物5-溴-4-氯-3-吲哚-3 -半乳糖苷，從而使腸桿菌屬顯不出藍(lán)綠色色澤。誘導(dǎo)劑包括了 IPTG (Isopropy 1-beta-D-thiogalactopyranos idedioxane free)、I-硫代-B-D-乙基半乳糖苷(Ethyl-beta-D-thiogalactopyranoside)、1-0-甲基-b_D-批喃半乳糖苷(I-O-Methy 1-beta-D-galactopyranoside)> 甲基-I-硫代-B -D-半乳糖苷(Methyl-beta-D-thiogalactopyranoside)以及苯基--D-硫代批喃半乳糖苷(Pheny 1-beta-D-thiogalactopyranoside)。IPTG較適于固體培養(yǎng)基中誘導(dǎo)^ -半乳糖苷酶的表達(dá)，其它幾種誘導(dǎo)劑比較適合于液體培養(yǎng)基中誘導(dǎo)P -半乳糖苷酶的表達(dá)。本發(fā)明中辛酸酯酶顯色底物、￠-半乳糖苷酶顯色底物和氨基己糖苷酶底物是由糖苷類特定結(jié)合物和顯色基團(tuán)合成的，顯色底物包括X-caprylate、Salmon-caprylate、Magenta-caprylateg、MU-caprylate、 X -Gal、Salmon-Gal、Magenta - Gal、Iodo -Gal、Magenta - NAG、Salmon- NAG 和 X-NAG 等。本發(fā)明采用了 5-溴-6-氯-3-吲哚-辛酯(M agenta-capryIate)>5-溴 _4_ 氯 _3_ 卩引哚-0 -D-半乳糖苷(X-Gal)和5-溴-4-氯-3-吲哚-N-乙酰-P -氨基葡萄糖苷(X-GLUCOSAMINIDE)，這三種底物的搭配在此顯色培養(yǎng)基中檢測(cè)辛酸酯酶、3-半乳糖苷酶及氨基己糖苷酶的活性比其它顯色底物更有效。本發(fā)明在培養(yǎng)基中添加了膽鹽，可抑制樣品中大部分的革蘭氏陽(yáng)性球菌。膽鹽包括牛膽鹽、豬膽鹽、三號(hào)膽鹽、去氧膽酸鈉和混合膽鹽。本發(fā)明優(yōu)選豬膽鹽。本發(fā)明在培養(yǎng)基中添加了抗生素，可抑制樣品中部分的革蘭氏陰性桿菌如容易擴(kuò)散生長(zhǎng)的變型桿菌以及氣單胞菌。本發(fā)明的有益效果是 本發(fā)明的顯色培養(yǎng)基用于檢測(cè)沙門(mén)氏菌，檢測(cè)靈敏度高，特異性好，直接根據(jù)菌落顏色就可對(duì)菌株作出鑒別，檢測(cè)周期短、可操作性強(qiáng)、適用于處理大通量的樣本、易于產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)，可對(duì)臨床標(biāo)本、食品、化妝品和環(huán)境中沙門(mén)氏菌進(jìn)行全面、系統(tǒng)、準(zhǔn)確的檢測(cè)和初步鑒定，為微生物快速檢測(cè)提供了新的途徑。本發(fā)明的顯色培養(yǎng)基能準(zhǔn)確快速地從腸道菌中鑒別出大沙門(mén)氏菌，本發(fā)明的顯色培養(yǎng)基中添加了辛酸酯酶顯色底物，特點(diǎn)為沙門(mén)氏菌含有相對(duì)應(yīng)的酶而其它大部分腸道菌不含，添加了 3 -半乳糖苷酶顯色底物，大部分其它腸道菌含有相對(duì)應(yīng)的酶而沙門(mén)氏菌不含，添加了氨基己糖苷酶顯色底物，念珠菌含有相對(duì)應(yīng)的酶而沙門(mén)氏菌不含，以顯色反應(yīng)來(lái)區(qū)分目標(biāo)菌株，觀察方便，還添加了膽鹽和抗生素，能抑制部分的革蘭氏陽(yáng)性球菌和陰性桿菌。
具體實(shí)施例方式—種用于檢測(cè)沙門(mén)氏菌的顯色培養(yǎng)基，每IOOOmL培養(yǎng)基含有瓊脂10 18g、蛋白胨8 20g、牛肉浸粉2 10g、氯化鈉3 10g、表面活性劑I 10g、辛酸酯酶顯色底物
0.I 0. 7g、^ -半乳糖苷酶顯色底物0. I 0. 6g、氨基己糖苷酶顯色底物0. I 0. 6g、酶誘導(dǎo)劑0. 05 0. 3g、膽鹽3 10g、新生霉素5 20mg。辛酸酯酶顯色底物為5-溴-6-氯-3-卩引哚-辛酯(Magenta-caprylate)。^ -半乳糖苷酶顯色底物為5-溴-4-氯-3-吲哚-P -D-半乳糖苷(X-Gal )。氨基己糖苷酶顯色底物為5-溴-4-氯-3-吲哚-N-乙酰-P _D_氨基葡萄糖苷(X-GLUCOSAMINIDE)。表面活性劑為吐溫系列中的任一種。酶誘導(dǎo)劑為IPTG、I-硫代-B -D-乙基半乳糖苷、1_0_甲基_b_D_吡喃半乳糖苷、甲基_1-硫代_ B -D-半乳糖苷、苯基_ P -D-硫代批喃半乳糖苷中的任一種。膽鹽為牛膽鹽、豬膽鹽、三號(hào)膽鹽、去氧膽酸鈉中的至少一種，優(yōu)選為豬膽鹽。本發(fā)明的顯色培養(yǎng)基用于檢測(cè)沙門(mén)氏菌的方法，包括如下步驟
1)制備顯色平板每IOOOmL去離子水中加入上述顯色培養(yǎng)基的原料，攪拌，加熱煮沸至完全溶解，調(diào)節(jié)pH值約為7. 0±0. 2，煮沸2min，待冷至約50°C倒平板，備用；
2)接種培養(yǎng)將樣品或含樣品的增菌液接種到顯色平板上，37°C培養(yǎng)22 26h ；3)結(jié)果分析若顯色平板上出現(xiàn)光滑、略突起、直徑I 3_、邊緣整齊的紫紅色的菌落，說(shuō)明該樣品存在沙門(mén)氏菌，其它腸道菌或被抑制或?yàn)轱@示藍(lán)綠色或無(wú)色的菌落。下面結(jié)合具體的實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的說(shuō)明，但并不局限如此。5-溴-6-氯-3-吲哚-辛酯、5-溴_4_氯_3_吲哚鄰_D_半乳糖苷、5-溴-4-氯-3-吲哚-N-乙酰-P -D-氨基葡萄糖苷和新生霉素均購(gòu)自Sigma公司。實(shí)施例I
一種用于檢測(cè)沙門(mén)氏菌的顯色培養(yǎng)基，每IOOOmL培養(yǎng)基含有瓊脂15g、蛋白胨12g、牛肉浸粉5g、氯化鈉5g、吐溫-20 5g、5-溴-6-氯-3-吲哚-辛酯0. 35g、5_溴-4-氯-3-吲哚-P -D-半乳糖苷0. 4g、IPTG 0. 15g、5-溴-4-氯-3-吲哚-N-乙酰-P -D-氨基葡萄糖苷0. 4g、豬膽鹽6g、新生霉素12mg。
實(shí)施例2
一種用于檢測(cè)沙門(mén)氏菌的顯色培養(yǎng)基，每IOOOmL培養(yǎng)基含有瓊脂llg、蛋白胨15g、牛肉浸粉3g、氯化鈉7g、吐溫-20 2g、5-溴-6-氯-3-吲哚-辛酯0. lg、5-溴-4-氯-3-吲哚-P -D-半乳糖苷0. 4g、IPTG 0. 05g、5-溴-4-氯-3-吲哚-N-乙酰-P -D-氨基葡萄糖苷0. 3g、豬膽鹽2g、新生霉素15mg。實(shí)施例3
一種用于檢測(cè)沙門(mén)氏菌的顯色培養(yǎng)基，每IOOOmL培養(yǎng)基含有瓊脂18g、蛋白胨10g、牛肉浸粉7g、氯化鈉6g、吐溫-20 7g、5-溴-6-氯-3-吲哚-辛酯0. 4g、5_溴-4-氯-3-吲哚-P -D-半乳糖苷0. 3g、IPTG 0. 3g、5-溴-4-氯-3-吲哚-N-乙酰-P -D-氨基葡萄糖苷
0.5g、豬膽鹽8g、新生霉素10mg。實(shí)施例4
一種用于檢測(cè)沙門(mén)氏菌的顯色培養(yǎng)基，每IOOOmL培養(yǎng)基含有瓊脂16g、蛋白胨Sg、牛肉浸粉6g、氯化鈉4g、吐溫-20 6g、5-溴-6-氯-3-吲哚-辛酯0. 7g、5_溴-4-氯-3-吲哚-3 -D-半乳糖苷0. lg、IPTG 0. 10g、5-溴-4-氯-3-吲哚-N-乙酰-3 -D-氨基葡萄糖苷0. 2g、豬膽鹽6g、新生霉素llmg。特異性試驗(yàn)
將 Saltnone I Iatyphitnur i UtnQMCC、S typhitnur iutn ATCC 14028、
S. ^Ai-CMCC (B) 50071, S. eAteri tidisCMCC (B) 50335, S. arizo/ aCMCC (B) 47001、thompsonCmC (B) 50023, S. paratyphi A CMCC (B) 50093, S. paratyphi BCMCC(B) 50004> Streptococci faecal is ATCC29212> Staphylococci aureusATCC6538> CitrobacterfreundiiklCC^S^^^ Enterobacter aero gen CMCC (B) 45103、E. . cloacae CMCC(B) 45301 > Klebsiella pneumoniae ATCC13048> Escherichia coliATCC25922、Proteus vulgaris CMCC(B) 49027、5^i>e77afIexneriCMCC(B) 51572、E. sakazakiiATCC29544^Pseudomonas aeruginosa ATCC9027>Candidaalbicans ATCC1023120種標(biāo)準(zhǔn)菌株分別制成適當(dāng)濃度的標(biāo)準(zhǔn)菌懸液(濃度為IO6 108CfU/ml)，分別劃線接種到實(shí)施例I顯色培養(yǎng)基(簡(jiǎn)稱HKM)及對(duì)照廠家的顯色培養(yǎng)基和傳統(tǒng)培養(yǎng)基XLD (購(gòu)自BD公司)制成的平板上，37°C培養(yǎng)24小時(shí)，觀察顯色效果。對(duì)照廠家的顯色培養(yǎng)基有科瑪嘉CHROMagar SalmonelIaagar顯色培養(yǎng)基(簡(jiǎn)稱科瑪嘉)，OXOID沙門(mén)氏菌顯色培養(yǎng)基(簡(jiǎn)稱0X0ID)，國(guó)內(nèi)廠家I沙門(mén)氏菌顯色培養(yǎng)基(簡(jiǎn)稱廠家I )，國(guó)內(nèi)廠家I I沙門(mén)氏菌顯色培養(yǎng)基(簡(jiǎn)稱廠家I I)。檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表I。上述培養(yǎng)基檢測(cè)的特征性菌為沙門(mén)氏菌，五種顯色培養(yǎng)基檢測(cè)的特征性菌落色澤為紫紅色，XLD檢測(cè)的特征性菌落色澤為紅色。
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由表I可知，沙門(mén)氏菌屬在HKM和XLD平板上均顯示陽(yáng)性的特征性色澤，對(duì)于
S.typhimuriumQkOZ (B) 50115和51.從OffijD1SO/ ,在科瑪嘉的平板上均不能顯示陽(yáng)性的特征性色澤；對(duì)于義typhi和S.paratyphi A,在OXOID和國(guó)內(nèi)廠家I I的平板上,前者受抑制后者不能顯示陽(yáng)性的特征性色澤；而對(duì)于S. arizona,在科瑪嘉、國(guó)內(nèi)廠家I和國(guó)內(nèi)廠家I I的平板上均不能顯示陽(yáng)性的特征性色澤；其它非沙門(mén)氏菌屬的菌，在HKM和OXOID平板上均可以與沙門(mén)氏菌屬相區(qū)分，C . freundii、S. fIexneri和A vulgaris在XLD平板上形態(tài)與沙門(mén)氏菌相似，均不可以與沙門(mén)氏菌屬相區(qū)分\E. sakazakii在國(guó)內(nèi)廠家I和國(guó)內(nèi)廠家I I的平板上均不可以與沙門(mén)氏菌屬相區(qū)分\E. aerogenes在科瑪嘉和國(guó)內(nèi)廠家I的平板上均不可以與沙門(mén)氏菌屬相區(qū)分；51 faecal is ^ S. aureus和P.在各種平板上(除XLD平板)均受抑制。表明本發(fā)明所述的沙門(mén)氏菌顯色培養(yǎng)基與OXOID平板在特異性顯色方面均無(wú)明顯差異，均優(yōu)于科瑪嘉等其它四種平板。靈敏度試驗(yàn)
將上述的4種沙門(mén)氏菌陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)菌株:51 typhimuriumQkOZ (B) 50115> S. typhimuriumATCCS.paratyphi B CMCC (B) 50004 和 5 dteriOWisCMCC (B) 50335 分別制成適當(dāng)
濃度的標(biāo)準(zhǔn)菌懸液(濃度為IO2 103cfu/ml)，用螺旋接種法接種到用實(shí)施例I HKM，科瑪嘉、0X0ID，廠家I和廠家II顯色培養(yǎng)基及胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng)基(簡(jiǎn)稱TSA)等6種培養(yǎng)基制成的平板上，37°C培養(yǎng)24 h，計(jì)算各顯色培養(yǎng)基的生長(zhǎng)率。結(jié)果見(jiàn)表2。
權(quán)利要求
1.一種用于檢測(cè)沙門(mén)氏菌的顯色培養(yǎng)基，每IOOOmL培養(yǎng)基含有瓊脂10 18g、蛋白胨8 20g、牛肉浸粉2 10g、氯化鈉3 10g、表面活性劑I 10g、辛酸酯酶顯色底物0.I 0. 7g、^ -半乳糖苷酶顯色底物0. I 0. 6g、氨基己糖苷酶顯色底物0. I 0. 6g、酶誘導(dǎo)劑0. 05 0. 3g、膽鹽2 10g、新生霉素5 20mg。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的用于檢測(cè)沙門(mén)氏菌的顯色培養(yǎng)基，其特征在于辛酸酯酶顯色底物為5-溴-6-氯-3-卩引哚-辛酯(Magenta- caprylate)。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的用于檢測(cè)沙門(mén)氏菌的顯色培養(yǎng)基，其特征在于半乳糖苷酶顯色底物為5-溴-4-氯-3-吲哚-P - D-半乳糖苷(X-Gal )。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的用于檢測(cè)沙門(mén)氏菌的顯色培養(yǎng)基，其特征在于氨基己糖苷酶顯色底物為5-溴-4-氯-3-吲哚-N-乙酰-P -D-氨基葡萄糖苷(X-Glucosaminide)。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述的用于檢測(cè)沙門(mén)氏菌的顯色培養(yǎng)基，其特征在于表面活性劑為吐溫系列中的任一種。
6.根據(jù)權(quán)利要求I所述的用于檢測(cè)沙門(mén)氏菌的顯色培養(yǎng)基，其特征在于酶誘導(dǎo)劑為IPTG、I-硫代_B -D-乙基半乳糖昔、1-0-甲基-b_D_卩比喃半乳糖昔、甲基_1-硫代- B-D-半乳糖苷、苯基-D-硫代吡喃半乳糖苷中的任一種。
7.根據(jù)權(quán)利要求I所述的用于檢測(cè)沙門(mén)氏菌的顯色培養(yǎng)基，其特征在于膽鹽為牛膽鹽、豬膽鹽、三號(hào)膽鹽、去氧膽酸鈉中的至少一種。
8.根據(jù)權(quán)利要求I所述的用于檢測(cè)沙門(mén)氏菌的顯色培養(yǎng)基，其特征在于膽鹽為豬膽鹽。
9.根據(jù)權(quán)利要求I 8任一項(xiàng)所述的用于檢測(cè)沙門(mén)氏菌的顯色培養(yǎng)基，其特征在于每IOOOmL培養(yǎng)基含有瓊脂15g、蛋白胨12g、牛肉浸粉5g、氯化鈉5g、吐溫-20 5g、5-溴-6-氯-3-吲哚-辛酯 0. 35g、5-溴-4-氯-3-吲哚-^ -D-半乳糖苷 0. 4g、IPTG 0. 15g、氨基己糖苷酶顯色底物為5-溴-4-氯-3-吲哚-N-乙酰-P -D-氨基葡萄糖苷0. 4g、豬膽鹽6g、新生霉素12mg。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種用于檢測(cè)沙門(mén)氏菌的顯色培養(yǎng)基，屬于食品安全及臨床微生物檢測(cè)領(lǐng)域。本發(fā)明的培養(yǎng)基含有瓊脂、蛋白胨、牛肉浸粉、氯化鈉、表面活性劑、膽鹽、酶誘導(dǎo)劑、辛酸酯酶顯色底物、β-半乳糖苷酶顯色底物、氨基己糖苷酶顯色底物、新生霉素。本發(fā)明的顯色培養(yǎng)基用于檢測(cè)沙門(mén)氏菌，檢測(cè)靈敏度高，特異性好，直接根據(jù)菌落顏色就可對(duì)菌株作出初步鑒別；可操作性強(qiáng)，適用于處理大通量的樣本，可對(duì)食品生產(chǎn)、臨床疾病診斷和環(huán)境中沙門(mén)氏菌進(jìn)行全面、系統(tǒng)、準(zhǔn)確的檢測(cè)和初步鑒別，為微生物快速檢測(cè)提供了新的途徑。
文檔編號(hào)C12Q1/34GK102827918SQ20121030730
公開(kāi)日2012年12月19日 申請(qǐng)日期2012年8月27日 優(yōu)先權(quán)日2012年8月27日
發(fā)明者盧勉飛, 蔡芷荷, 邱國(guó)建, 吳清平, 姚華卓, 陳亮亮 申請(qǐng)人:廣東環(huán)凱微生物科技有限公司