專利名稱：一種扁座殼孢菌半合成培養基的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種扁座殼孢培養基，特別涉及一種扁座殼孢半合成培養基。
背景技術：
扁座殼抱\_Aschersonia placenta Berk.]隸屬于真菌界(Kingdom Fungi)、子囊菌門(Ascomycota)、幾菌綱{Sordariomycetes)、肉座菌目 iffypocreales)、麥角菌科(67avi_ci]pi_taceae)、座殼抱屬(Aschersonia)，是粉風( Jileyrodidae)和介殼蟲{Coccidae)的重要病原真菌,廣泛分布于熱帶和亞熱帶地區。早期國內外研究表明，扁座殼孢能有效控制粉虱和介殼蟲這兩類刺吸式口器害蟲，在害蟲生物防治、環保農藥開發等方面有較好的應用前景。但是，近年來國內外許多單位進行了扁座殼孢菌的人工培養研究，有的進入了工業化生產，但發酵培養基均采用天然培養基(如用動物、植物、微生物或其他天然有機成分配制而成的培養基)。因為天然培養基成分復雜，各批次原料營養成分含量不穩定，發酵過程和產品質量不易控制。此外，天然培養基各營養成分不明確，不適于扁座殼孢菌生理生化的研究。

發明內容
為了解決上述問題，本發明提供了一種扁座殼孢菌半合成培養基，其組成成分明確，發酵產品質量可控，適于該菌工業化發酵生產。本發明的一種扁座殼孢菌半合成培養基，由碳源、氮源、磷酸二氫鉀、硫酸鎂和水組成，其中碳(按分子量計算的碳元素含量)5. 0 20. 0克，氮(氮元素含量)0. 5 2. 5克，磷酸二氫鉀0. 5 I. 5克，硫酸鎂0. 5 I. 0克，用水定容至I升；所述碳源為蔗糖、可溶性淀粉或甘露醇，氮源為酵母浸粉、胰蛋白胨或牛肉浸膏。在所述扁座殼孢菌半合成培養基中加入質量百分含量為I. 5 2. 0%的瓊脂得到固體培養基。優選地，所述扁座殼孢菌半合成培養基為蔗糖25. 0 45. 0克，酵母浸粉5. 0
10.0克，磷酸二氫鉀0.5 I. 5克，硫酸鎂0.5 1.0克，用水定容至I升。在所述扁座殼孢菌半合成培養基中加入質量百分含量為I. 5 2. 0%的瓊脂得到固體培養基。更優選地，所述扁座殼孢菌半合成培養基為蔗糖45. 0克，酵母浸粉10. 0克，磷酸二氫鉀0. 5克，硫酸鎂0. 5克，用水定容至I升。在所述扁座殼孢菌半合成培養基中加入質量百分含量為I. 5 2. 0%的瓊脂得到固體培養基。上述扁座殼孢菌半合成培養基都可按常規方法配制，如秤取上述質量配比的原料放入容器，加熱溶解，混合均勻，滅菌即可。本發明的扁座殼孢菌半合成培養基，其組成成分明確，發酵的原料均一，發酵產品質量可以控制，利用這一培養基發酵生產扁座殼孢具有工藝簡單、不存在重金屬污染，菌體生長速度快，菌絲產率高(可達28 g/L以上)，產品質量穩定等優點，既適于扁座殼孢菌生理生化特性的研究，也適于該菌工業化發酵生產。
具體實施例方式實施例I、利用扁座殼孢菌半合成培養基生產扁座殼孢菌絲
將從自然侵染扁座殼孢菌的粉虱蟲尸上分離純化，并借助形態特征和分子生物學證據鑒定為真正扁座殼孢的菌株接種至扁座殼孢菌半合成培養基和對照培養基中，分別按照常規方法發酵生產菌絲。結果表明扁座殼孢菌半合成培養基的菌絲產率達(23 g/L) 28 g/L,對照培養基的菌絲產率僅為5. I g/L。其中，扁座殼孢菌半合成培養基的配方為蔗糖(35.0克)45. 0克，酵母浸粉(7. 5克)10. 0克，磷酸二氫鉀0. 5克，硫酸鎂0. 5克，蒸餾水I升。上述括號中表示不同配方得到的菌絲產率。對照培養基配方為硫酸銨2g、氯化鉀0. 5g、硫酸鎂0. 5g、磷酸二氫鉀0. 5g、磷酸氫二鈉0. 65g、蒸餾水I升。實施例2、利用扁座殼孢菌半合成培養基生產扁座殼孢菌絲
將從自然侵染扁座殼孢菌的粉虱蟲尸上分離純化，并借助形態特征和分子生物學證據鑒定為真正扁座殼孢的菌株接種至扁座殼孢菌半合成培養基和對照培養基中，分別按照常規方法發酵生產菌絲。結果表明扁座殼孢菌半合成培養基的菌絲產率達(22 g/L) 26 g/L，對照培養基的菌絲產率僅為5. I g/L。其中，扁座殼孢菌半合成培養基的配方為甘露醇(35. 0克)45. 0克，酵母浸粉(7. 5克)10. 0克，磷酸二氫鉀0. 5克，硫酸鎂0. 5克，蒸餾水I升。對照培養基配方為硫酸銨2g、氯化鉀0. 5g、硫酸鎂0. 5g、磷酸二氫鉀0. 5g、磷酸氫二鈉0. 65g、蒸懼水I升。實施例3、利用扁座殼孢菌半合成培養基生產扁座殼孢菌絲
將從自然侵染扁座殼孢菌的粉虱蟲尸上分離純化，并借助形態特征和分子生物學證據鑒定為真正扁座殼孢的菌株接種至扁座殼孢菌半合成培養基和對照培養基中，分別按照常規方法發酵生產菌絲。結果表明扁座殼孢菌半合成培養基的菌絲產率達(12 g/L) 15 g/L，對照培養基的菌絲產率僅為5. I g/L。其中，扁座殼孢菌半合成培養基的配方為甘露醇(35. 0克)45. 0克，牛肉浸膏(7. 5克)10. 0克，磷酸二氫鉀0. 5克，硫酸鎂0. 5克，蒸餾水I升。對照培養基配方為硫酸銨2g、氯化鉀0. 5g、硫酸鎂0. 5g、磷酸二氫鉀0. 5g、磷酸氫二鈉0. 65g、蒸懼水I升。實施例4、利用扁座殼孢菌半合成培養基生產扁座殼孢菌絲
將從自然侵染扁座殼孢菌的粉虱蟲尸上分離純化，并借助形態特征和分子生物學證據鑒定為真正扁座殼孢的菌株接種至扁座殼孢菌半合成培養基和對照培養基中，分別按照常規方法發酵生產菌絲。結果表明扁座殼孢菌半合成培養基的菌絲產率達(20 g/L) 24 g/L,對照培養基的菌絲產率僅為5. I g/L。其中，扁座殼孢菌半合成培養基的配方為蔗糖(35.0克)45. 0克，胰蛋白胨(7. 5克)10. 0克，磷酸二氫鉀0. 5克，硫酸鎂0. 5克，蒸餾水I升。對照培養基配方為硫酸銨2g、氯化鉀0. 5g、硫酸鎂0. 5g、磷酸二氫鉀0. 5g、磷酸氫二鈉0. 65g、蒸餾水I升。實施例5、利用扁座殼孢菌半合成培養基生產扁座殼孢菌絲
將從自然侵染扁座殼孢菌的粉虱蟲尸上分離純化，并借助形態特征和分子生物學證據鑒定為真正扁座殼孢的菌株接種至扁座殼孢菌半合成培養基和對照培養基中，分別按照常規方法發酵生產菌絲。結果表明扁座殼孢菌半合成培養基的菌絲產率達(15 g/L) 18 g/L,對照培養基的菌絲產率僅為5. I g/L。其中，扁座殼孢菌半合成培養基的配方為蔗糖(35.0克)45. 0克，牛肉浸膏(7. 5克)10. 0克，磷酸二氫鉀0. 5克，硫酸鎂0. 5克，蒸餾水I升。對照培養基配方為硫酸銨2g、氯化鉀0. 5g、硫酸鎂0. 5g、磷酸二氫鉀0. 5g、磷酸氫二鈉0. 65g、蒸餾水I升。實施例6、利用扁座殼孢菌半合成培養基生產扁座殼孢菌絲
將從自然侵染扁座殼孢菌的粉虱蟲尸上分離純化，并借助形態特征和分子生物學證據鑒定為真正扁座殼孢的菌株接種至扁座殼孢菌半合成培養基和對照培養基中，分別按照常規方法發酵生產菌絲。結果表明扁座殼孢菌半合成培養基的菌絲產率達(19 g/L) 23 g/L,對照培養基的菌絲產率僅為5. I g/L。其中，扁座殼孢菌半合成培養基的配方為可溶淀粉(35. 0克)45. 0克，酵母浸粉(7. 5克)10. 0克，磷酸二氫鉀0. 5克，硫酸鎂0. 5克，蒸餾水I升。對照培養基配方為硫酸銨2g、氯化鉀0. 5g、硫酸鎂0. 5g、磷酸二氫鉀0. 5g、磷酸氫二鈉0. 65g、蒸懼水I升。實施例7、利用扁座殼孢菌半合成培養基生產扁座殼孢菌絲
將從自然侵染扁座殼孢菌的粉虱蟲尸上分離純化，并借助形態特征和分子生物學證據鑒定為真正扁座殼孢的菌株接種至扁座殼孢菌半合成培養基和對照培養基中，分別按照常規方法發酵生產菌絲。結果表明扁座殼孢菌半合成培養基的菌絲產率達(12 g/L) 17 g/L,對照培養基的菌絲產率僅為5. I g/L。其中，扁座殼孢菌半合成培養基的配方為可溶淀粉(35. 0克)45. 0克，胰蛋白胨(7. 5克)10. 0克，磷酸二氫鉀0. 5克，硫酸鎂0. 5克，蒸餾水I升。對照培養基配方為硫酸銨2g、氯化鉀0. 5g、硫酸鎂0. 5g、磷酸二氫鉀0. 5g、磷酸氫二鈉0. 65g、蒸懼水I升。實施例8、利用扁座殼孢菌半合成培養基生產扁座殼孢菌絲
將從自然侵染扁座殼孢菌的粉虱蟲尸上分離純化，并借助形態特征和分子生物學證據鑒定為真正扁座殼孢的菌株接種至扁座殼孢菌半合成培養基和對照培養基中，分別按照常規方法發酵生產菌絲。結果表明扁座殼孢菌半合成培養基的菌絲產率達(9 g/L) 12 g/L,對照培養基的菌絲產率僅為5. I g/L。其中，扁座殼孢菌半合成培養基的配方為可溶淀粉(35. 0克)45. 0克，牛肉浸膏(7. 5克)10. 0克，磷酸二氫鉀0. 5克，硫酸鎂0. 5克，蒸餾水I升。對照培養基配方為硫酸銨2g、氯化鉀0. 5g、硫酸鎂0. 5g、磷酸二氫鉀0. 5g、磷酸氫二鈉0. 65g、蒸懼水I升。實施例9、利用扁座殼孢菌半合成培養基生產扁座殼孢菌絲
將從自然侵染扁座殼孢菌的粉虱蟲尸上分離純化，并借助形態特征和分子生物學證據鑒定為真正扁座殼孢的菌株接種至扁座殼孢菌半合成培養基和對照培養基中，分別按照常規方法發酵生產菌絲。結果表明扁座殼孢菌半合成培養基的菌絲產率達(16 g/L) 20 g/L，對照培養基的菌絲產率僅為5. I g/L。其中，扁座殼孢菌半合成培養基的配方為甘露醇(35. 0克)45. 0克，胰蛋白胨(7. 5克)10. 0克，磷酸二氫鉀0. 5克，硫酸鎂0. 5克，蒸餾水I升。對照培養基配方為硫酸銨2g、氯化鉀0. 5g、硫酸鎂0. 5g、磷酸二氫鉀0. 5g、磷酸氫二鈉0. 65g、蒸懼水I升。
權利要求
1.一種扁座殼孢菌半合成培養基，由碳源、氮源、磷酸二氫鉀、硫酸鎂和水組成，其中碳5. O 20. O克，氮0. 5 2. 5克，磷酸二氫鉀0. 5 I. 5克，硫酸鎂0. 5 I. 0克，用水定容至I升；所述碳源為蔗糖、可溶性淀粉或甘露醇，氮源為酵母浸粉、胰蛋白胨或牛肉浸膏。
2.根據權利要求I所述的扁座殼孢菌半合成培養基，其特征在于在所述扁座殼孢菌半合成培養基中加入質量百分含量為I. 5 2. 0%的瓊脂得到固體培養基。
3.根據權利要求I所述的扁座殼孢菌半合成培養基，其特征在于所述扁座殼孢菌半合成培養基為蔗糖25. 0 45. 0克，酵母浸粉5. 0 10. 0克，磷酸二氫鉀0. 5 I. 5克，硫酸鎂0. 5 I. 0克，用水定容至I升。
4.根據權利要求3所述的扁座殼孢菌半合成培養基，其特征在于在所述扁座殼孢菌半合成培養基中加入質量百分含量為I. 5 2. 0%的瓊脂得到 固體培養基。
5.根據權利要求3所述的扁座殼孢菌半合成培養基，其特征在于所述扁座殼孢菌半合成培養基為蔗糖45. 0克，酵母浸粉10. 0克，磷酸二氫鉀0. 5克，硫酸鎂0. 5克，用水定容至I升。
6.根據權利要求5所述的扁座殼孢菌半合成培養基,其特征在于在所述扁座殼孢菌半合成培養基中加入質量百分含量為I. 5 2. 0%的瓊脂得到固體培養基。
全文摘要
本發明涉及一種扁座殼孢培養基，特別涉及一種扁座殼孢半合成培養基。本發明所提供的扁座殼孢菌半合成培養基，包括5.0～20.0克碳，0.5～2.5克氮，0.5～1.5克磷酸二氫鉀和0.5～1.0克硫酸鎂，用水定容至1升。所述碳源為蔗糖或可溶性淀粉或甘露醇，氮源為酵母浸粉或胰蛋白胨或牛肉浸膏。本發明的扁座殼孢菌半合成培養基，其組成成分明確，采用該培養基發酵生產扁座殼孢菌絲體具有工藝簡單、不存在重金屬污染，菌體生長速度快，菌絲產率高(可達28g/L以上)，產品質量穩定等優點，既適合于扁座殼孢菌生理生化的研究，也適合其工業化發酵生產。
文檔編號C12N1/14GK102676402SQ20121016622
公開日2012年9月19日 申請日期2012年5月26日 優先權日2012年5月26日
發明者關雄, 宋飛飛, 蘇玉斌, 謝小聰, 邱云鋒, 邱君志 申請人:福建農林大學