專利名稱：一種毛霉發酵培養增效劑及培養基的制作方法
技術領域：
本發明涉及毛霉培養技術領域，尤其是一種毛霉發酵培養增效劑及培養基。
背景技術：
毛霉又叫黑霉、長毛霉，以孢囊孢子和接合孢子繁殖，菌絲無隔、多核、分枝狀，在基物內外能廣泛蔓延，無假根或匍匐菌絲，其在土壤、糞便、禾草及空氣等環境中存在，在高溫、高濕度以及通風不良的條件下生長均很好。毛霉的用途很廣，能產生多種代謝產物，被廣泛應用在工業生產中，如利用其淀粉酶制曲、釀酒，利用其蛋白酶以釀制腐乳、豆豉等。毛霉活化后，在培養基內接種，培養一端時間后，將發酵液提純可獲得多種代謝產 物及其他抗生素，整個培養過程具有原料簡單、價格低廉、生產工藝簡單的優點。但是毛霉發酵過程中穩定性差、代謝率低、發酵時間長、所得產物不穩定等缺點限制了毛霉的進一步應用。
發明內容
本發明的目的在于克服現有技術的不足，提供一種增加產量、提高酶活的一種毛霉發酵培養增效劑。本發明采取的技術方案是一種毛霉發酵培養增效劑，其特征在于其原料包括按重量份數混合的以下組分
吡效議0.05 ().33份
賴氨酸0.10 0.20份
半酸駿酸0.丨U 0.25份
色過酸0.15 0. 25份
維生桌》12(},5() 1.50份
維I.:桌 [ 0.50 I. 20 粉
漢化膽堿0. 30 0. 80份
L-蘇氨酸 0. 80 I. 50份 。本發明的另一個目的是提供一種含有毛霉發酵培養增效劑的培養基，其特征在于所述增效劑的添加量為培養基總重量的0. 25 1%。而且，包括麩皮、乳糖、蛋白胨、KH2PO4, NaH2PO4和水，麩皮與水的重量比為I 1.0 2.0，每升水中的乳糖添加量為0. 15 0.2g，每升水中的蛋白胨添加量為0.25 0. 5g，KH2P04添加量為固態培養基總重量的0. 05 0. 10%, NaH2P04添加量為固態培養基總重量的0. 10 0. 2%。
本發明的另一個目的是提供一種毛霉的發酵方法，其特征在于包括以下步驟(I)分別配制培養基和增效劑，培養基將麩皮、乳糖、蛋白胨、KH2PO4和NaH2PO4混合后，再與水混勻即可；增效劑將吡效隆、賴氨酸、半酰胺酸、色氨酸、維生素B12、維生素B6、氯化膽堿和L-蘇氨酸混合均勻即可；將增效劑加入培養基中，混合均勻即可。
(2)活化后的菌種接種后進行培養,培養溫度為30 50攝氏度,培養時間為24 48小時，即完成發酵。而且，步驟⑵所述的培養中，每4 6小時翻曲一次。本發明的優點和積極效果是本發明中，在培養基內按一定比例加入由吡效隆、賴氨酸、半酰胺酸、色氨酸、維生素B12、維生素B6、氯化膽堿、L-蘇氨酸和水混合后的增效劑，使毛霉發酵時的菌絲含量相對于傳統培養基有大量地增加，而且發酵產物的酶活性明顯高于傳統培養基，可見，采用含有增效劑的培養基后，毛霉的菌絲含量、代謝產物的活性均優于傳統培養基，具有良好的經濟、生態及社會效益。
具體實施例方式下面結合實施例，對本發明進一步說明，下述實施例是說明性的，不是限定性的，不能以下述實施例來限定本發明的保護范圍。一種毛霉發酵培養增效劑，其特征在于其原料包括按重量份數混合的以下組分
0.05 0. 33份吡效隆、0. 10 0. 20份賴氨酸、0. 10 0. 25份半酰胺酸、0. 15 0. 25份色氨酸、0. 50 I. 50份維生素B12、0. 50 I. 20份維生素B6、0. 30 0. 80份氯化膽堿和
0.80 I. 50份L-蘇氨酸。上述增效劑在使用時，其添加量為培養基總重量的0. 25 1%。其中培養基包括麩皮、乳糖、蛋白胨、KH2P04、NaH2P04和水，麩皮與水的重量比為I : I. 0 2. 0，每升水中的乳糖添加量為0. 15 0. 2g，每升水中的蛋白胨添加量為0. 25 0. 5g，KH2P04添加量為固態培養基總重量的0. 05 0. 10%, NaH2P04添加量為固態培養基總重量的0. 10 0. 2%。制備培養基將麩皮、乳糖、蛋白胨、KH2PO4和NaH2PO4混合后，再與水混勻即可。制備增效劑將吡效隆、賴氨酸、半酰胺酸、色氨酸、維生素B12、維生素B6、氯化膽堿和L-蘇氨酸混合均勻即可。將增效劑加入培養基中，混合均勻即可。培養基配制好后，毛霉的發酵方法是將活化后的菌種接種后進行培養，培養溫度為30 50攝氏度,培養時間為24 48小時,每4 6小時翻曲一次，即完成發酵。實施例I
成份吡效降FiEclpFliZlTE^ii維 11 IS 7R I miM l
__(K/i.) ig/l) (tf/I.) Sk IJ B12(g/I.) B6 (g/1.) (g/1.) (g/1.)
用!|i 0. 05 0. 20 0. 25 0. 25I. o1. 20. 80I. 5進行毛霉的發酵培養I.配制增效劑和培養基，然后將二者混合，增效劑的添加量為培養基總重量的1%。2.毛霉選用亮色毛霉，活化后接種至培養基內，培養溫度為30攝氏度，培養時間為36小時,每4小時翻曲一次。3.將步驟2的發酵液進行提純，分離出的產物進行酶活測試。在步驟I 3進行的同時，選用相同的毛霉在傳統培養基中培養相同的時間，分離出的產物同樣進行酶活測試。實施例2
權利要求
1.ー種毛霉發酵培養增效劑，其特征在于其原料包括按重量份數混合的以下組分 吡效隆O. 05 O. 33份 賴氣酸0.10 O. 20份 半酰胺酸O. IO O. 25份 色氣酸0.15 O. 25份 維生素B12O. 50 I. 50份 維生素B6O. 50 L 20份 氣化膽堿O. 30 O. 80份 L-蘇氣酸 O. 80 I. 50份 α
2.ー種含有權利要求I所述的毛霉發酵培養增效劑的培養基，其特征在于所述增效劑的添加量為培養基總重量的O. 25 1%。
3.根據權利要求2所述的培養基，其特征在于包括麩皮、乳糖、蛋白胨、KH2P04、NaH2P04和水，麩皮與水的重量比為I : I. O 2. O,姆升水中的乳糖添加量為O. 15 O. 2g,姆升水中的蛋白胨添加量為O. 25 O. 5g，KH2P04添加量為固態培養基總重量的O. 05 O. 10%，NaH2P04添加量為固態培養基總重量的O. 10 O. 2%。
4.ー種使用如權利要求2或3所述的培養基的發酵方法，其特征在于包括以下步驟 (1)分別配制培養基和增效劑， 培養基將麩皮、乳糖、蛋白胨、KH2PO4和NaH2PO4混合后，再與水混勻即可； 增效劑將吡效隆、賴氨酸、半酰胺酸、色氨酸、維生素B12、維生素B6、氯化膽堿和L-蘇氨酸混合均勻即可； 將增效劑加入培養基中，混合均勻即可； (2)活化后的菌種接種后進行培養，培養溫度為30 50攝氏度，培養時間為24 48小時，即完成發酵。
5.根據權利要求4所述的發酵方法，其特征在干步驟(2)所述的培養中，每4 6小時翻曲一次。
全文摘要
本發明涉及一種毛霉發酵培養增效劑，其原料包括按重量份數混合的以下組分0.05～0.33份吡效隆、0.10～0.20份賴氨酸、0.10～0.25份半酰胺酸、0.15～0.25份色氨酸、0.50～1.50份維生素B12、0.50～1.20份維生素B6、0.30～0.80份氯化膽堿和0.80～1.50份L-蘇氨酸。本發明中，在培養基內按一定比例加入由吡效隆、賴氨酸、半酰胺酸、色氨酸、維生素B12、維生素B6、氯化膽堿、L-蘇氨酸和水混合后的增效劑，使毛霉發酵時的菌絲含量相對于傳統培養基有大量地增加，而且發酵產物的酶活性明顯高于傳統培養基，可見，采用含有增效劑的培養基后，毛霉的菌絲含量、代謝產物的活性均優于傳統培養基，具有良好的經濟、生態及社會效益。
文檔編號C12R1/785GK102676443SQ20121016770
公開日2012年9月19日 申請日期2012年5月25日 優先權日2012年5月25日
發明者劉鼎闊, 張俊霞, 張鳳洪, 張勇, 王立紅, 董惠峰 申請人:鼎正動物藥業(天津)有限公司