專利名稱：一種從莫勒菌中提取雙苯惡庚因-11(6h)酮-1，10-二羥基，3 -甲基-7，8-二甲氧的方法
技術領域：
本發明屬于新物質提取領域，具體涉及一種從莫勒菌中提取雙苯惡庚因-11 (6H)酮-1，10-二羥基，3 -甲基-7，8-二甲氧的方法。
背景技術：
莫勒菌iMoelleriella、是蟲生真菌的重要成員，其無性型為類座殼孢(Aschersonia-1ike),由于它能引起粉風和介殼類昆蟲群體性流行病的發生,這使得它有可能成為有用的生物防治劑。隨著研究的深入，近年來人們發現莫勒菌的代謝產物具有抗菌、抗腫瘤和抗瘧原蟲等生物活性，這預示該菌在生物農藥或醫藥上存在很大應用價值。由于人們在現代社會患癌癥的概率較大，因此，尋找不同來源的抗癌藥物已經越 來越得到人們的關注。蟲生真菌的代謝產物中含有多肽、生物堿、萜類化合物、留醇等多種具有殺蟲、抗腫瘤、抗炎、抗菌等活性物質，因此，充分開發利用蟲生真菌，將有利于人類醫療水平的發展。

發明內容
本發明的目的在于提供一種從莫勒菌中提取雙苯惡庚因-11 (6H)酮-1，10- 二羥基，3 -甲基-7，8-二甲氧的方法，本發明以繁殖快、周期短的真菌為材料，成本低，操作簡單，重復性好，無需昂貴的儀器，通過多次進行硅膠柱層析，得到一種新化合物，通過對人類胃癌細胞株BGC823進行活性測定，得到的數據說明該種新化合物有優異的抗腫瘤活性，促進其藥理學的研究和作為先導化合物的開發和應用。為實現上述目的，本發明采用如下技術方案
一種從莫勒菌中提取雙苯惡庚因-11 (6H)酮-1，10-二羥基，3 -甲基-7，8-二甲氧的方法包括以下步驟
(1)將莫勒菌(邱君志等，赭色小莫勒菌在中國的發現.菌物學報，2009.28(1):148-150)活化后，取菌塊接種PDB培養基中，在160r/min、25°C條件下連續培養7天即初級培養，按10%接種量再次轉接到PDB培養基中，繼續在160r/min、25°C條件下連續培養28天即次級培養；
(2)減壓抽濾得到菌絲體，菌絲體在40°C下恒溫干燥后研磨成粉狀，過篩，用乙酸乙酯浸泡，超聲，重復3次；合并浸泡液，旋蒸得菌絲體浸膏；
(3)將菌絲體浸膏上20(Γ300目硅膠柱，進行粗分；先用石油醚洗脫，之后換石油醚 二氯甲烷體積比=10:1洗脫，收集該部位洗脫液，旋蒸濃縮；
(4)將步驟(3)得到的濃縮物繼續上20(Γ300目硅膠柱，以石油醚丙酮體積比=25:1梯度洗脫，收集石油醚丙酮體積比=20:1部位洗脫液，旋蒸濃縮；
(5)將步驟(4)得到的濃縮物進一步上20(Γ300目硅膠柱，先以石油醚洗脫，之后換石油醚丙酮體積比=20:1梯度洗脫，最后以二氯甲烷丙酮體積比=10:1梯度洗脫，收集二氯甲烷丙酮體積比=1:1部位洗脫液，旋蒸濃縮，氯仿洗出，自然揮干，甲醇重結晶，即得到雙苯惡庚因-11(6H)酮-1，10-二羥基，3 -甲基-7，8-二甲氧，結構式如下
權利要求
1.一種從莫勒菌中提取雙苯惡庚因-1U6H)酮-1，10-二羥基，3 -甲基-7，8-二甲氧的方法，其特征在于所述的方法包括以下步驟(O將莫勒菌活化后，取菌塊接種PDB培養基中，在160r/min、25°C條件下連續培養7 天即初級培養，按10%接種量再次轉接到PDB培養基中，繼續在160r/min、25°C條件下連續培養28天即次級培養；(2)減壓抽濾得到菌絲體，菌絲體在40°C下恒溫干燥后研磨成粉狀，過篩，用乙酸乙酯浸泡，超聲，重復3次；合并浸泡液，旋蒸得菌絲體浸膏；(3)將菌絲體浸膏上20(Γ300目硅膠柱，進行粗分；先用石油醚洗脫，之后換石油醚二氯甲烷體積比=10:1洗脫，收集該部位洗脫液，旋蒸濃縮；(4)將步驟(3)得到的濃縮物繼續上20(Γ300目硅膠柱，以石油醚丙酮體積比=25:1 梯度洗脫，收集石油醚丙酮體積比=20:1部位洗脫液，旋蒸濃縮；(5)將步驟(4)得到的濃縮物進一步上20(Γ300目硅膠柱，先以石油醚洗脫，之后換石油醚丙酮體積比=20:1梯度洗脫，最后以二氯甲烷丙酮體積比=10:1梯度洗脫，收集二氯甲烷丙酮體積比=1:1部位洗脫液，旋蒸濃縮，氯仿洗出，自然揮干，甲醇重結晶，即得到雙苯惡庚因-11(6Η)酮-1，10-二羥基，3 -甲基-7，8-二甲氧，結構式如下
2.根據權利要求1所述的從莫勒菌中提取雙苯惡庚因-1U6H)酮-1，10-二羥基，3 -甲基_7，8- 二甲氧的方法，其特征在于所述步驟(I)中接種菌塊的大小為O. 5X0. 5cm, 接種量為4塊。
3.根據權利要求1所述的從莫勒菌中提取雙苯惡庚因-1U6H)酮-1，10-二羥基，3 -甲基-7，8-二甲氧的方法，其特征在于所述步驟(2)中要用3倍體積乙酸乙酯浸泡24小時，超聲I小時。
全文摘要
本發明公開了一種從莫勒菌中提取雙苯惡庚因-11(6H)酮-1，10-二羥基，3-甲基-7，8-二甲氧的方法，包括1)活化菌株；2)初級培養；3)次級培養；4)減壓抽濾得到菌絲體，菌絲體恒溫干燥；5)研磨，過篩；6)多次進行200~300目硅膠柱層析，得到的流分旋蒸濃縮，氯仿洗出，自然揮干，甲醇重結晶，得產品。本發明以繁殖快、周期短的真菌為材料，成本低，操作簡單，重復性好，無需昂貴的儀器，通過多次進行硅膠柱層析，得到一種新化合物雙苯惡庚因-11(6H)酮-1，10-二羥基，3-甲基-7，8-二甲氧，通過對人類胃癌細胞株BGC823進行活性測定，得到的數據說明該種新化合物有優異的抗腫瘤活性。
文檔編號C12R1/645GK103014090SQ20121054204
公開日2013年4月3日 申請日期2012年12月14日 優先權日2012年12月14日
發明者邱君志, 李小霞, 費姣, 毛麗慧, 郭慶豐, 何肖云, 涂潔, 邱云鋒, 張偉, 謝小聰 申請人:福建農林大學