本發明涉及海產品加工技術領域，特別涉及一種海參提取物的制備方法。
背景技術：
海參屬棘皮動物門海參綱動物，具有較高的食用及藥用價值，是一種名貴的海洋滋補品。全世界約有1100多種，可食用海參約40種。海參中含有多種活性成分，如多糖、蛋白、皂苷等。海參體壁是海參主要食(藥)用部位，其主要構成為上皮組織和真皮結締組織。海參真皮結締組織的細胞間充填著膠原等纖維成分和蛋白聚糖，以及其他糖蛋白等無定形間質，即細胞外基質。因此，蛋白質是海參最主要成分。海參體內含有18種氨基酸，有8種是人體自身不能合成的必需氨基酸。海參多糖主要存在于海參體壁中，少量存在于內臟及性腺中，是海參的重要組成部分，具有治療動脈血栓、降血脂、防治動脈粥樣硬化疾病、調節機體免疫力、保護腸黏膜、抗胃潰瘍作用。
新鮮海參易發生自溶現象，不宜運輸和貯藏，因此促使了海參加工產業的發展。目前，市場上流通最多的是干海參制品。因此，以干海參為原料高效提取其中蛋白、多糖，已經成為海參深度開發利用的重要方向。我國共有約140多種海參，約20種可食用海參，海參資源豐富，常見的有：仿刺參、花刺參、糙海參、海地瓜等。北方仿刺參價格昂貴，食用品質上乘，但不適合作為工業上提取海參蛋白、多糖的原料。我國南方熱帶海域海參資源豐富，以花刺參產量最大，食用價值相對較高，是海參精深加工優良資源。
目前，一般以冷水長時間泡發后的海參提取海參蛋白或多糖。單獨采用冷水泡發的缺點是時間過長，一般2天-3天，汁液流失嚴重，且在夏季泡發容易腐敗變質，不適合工業化生產；而以干海參粉碎后直接提取蛋白或多糖得率較低，原料利用率低，且產品鹽含量較高，不適合做為功能性食品配料。因此，需要一種以干花刺參為原料，提取活性成分的方法。
技術實現要素：
有鑒于此，本發明提供了一種海參提取物的制備方法。該制備方法可顯著提高蛋白和多糖的提取率。
為了實現上述發明目的，本發明提供以下技術方案：
本發明提供了一種海參提取物的制備方法，以干海參為原料，其制備方法包括預處理、酶解處理和加熱提取，預處理包括冷水泡發、煮制、剪切、均質的步驟。
作為優選，煮制為：將經冷水泡發后的濕海參浸入相當于濕海參15～20倍重量的90～95℃水中，以90～95℃的溫度煮制40～60分鐘，停止加熱后繼續泡發8～12小時。
優選地，煮制為：將經冷水泡發后的濕海參浸入相當于濕海參20倍重量的95℃水中，以95℃的溫度煮制45分鐘，停止加熱后繼續泡發10小時。
作為優選，剪切為：將經煮制的海參制成肉糜，加入相當于肉糜3～5倍重量的水，以8000～10000rpm的速率剪切5～10分鐘，調節pH值至7.5～8.0。
優選地，剪切為：將經煮制的海參制成肉糜，加入相當于肉糜5倍重量的水，以8000rpm的速率剪切5分鐘，調節pH值至7.5。
在本發明提供的實施例中，調節pH值采用的試劑為0.2％Na2CO3溶液。
在本發明中，采用高壓均質機對物料進行均質。
作為優選，均質的溫度為55℃，壓力為25MPa，均質的次數為2～3次。
優選地，均質的次數為2次。
作為優選，冷水泡發的用水量為干海參重量的20～30倍，泡發溫度為10～15℃，泡發時間為20～24小時。
優選地，冷水泡發的用水量為干海參重量的25倍，泡發溫度為12℃，泡發時間為24小時。
作為優選，酶解處理為：采用水解蛋白酶對均質后的肉糜進行酶解。
作為優選，水解蛋白酶的用量為肉糜重量的0.8％～1％。
優選地，水解蛋白酶的用量為肉糜重量的0.8％。
作為優選，水解蛋白酶為NS37071蛋白酶與木瓜蛋白酶的混合物。
作為優選，NS37071蛋白酶與木瓜蛋白酶的重量比為3:2～4:1。
優選地，NS37071蛋白酶與木瓜蛋白酶的重量比為4:1。
作為優選，酶解的溫度為55℃，酶解時間為3～5小時。
優選地，酶解的溫度為55℃，酶解時間為4小時。
作為優選，加熱提取為：在100～105℃條件下加熱40～60分鐘，離心，得到上清液。
優選地，加熱提取為：在100℃條件下加熱55分鐘，離心，得到上清液。
在本發明提供的實施例中，加熱提取之后還包括：在55℃條件下濃縮至固形物濃度為30％～35％，加入相當于固形物含量10％的麥芽糊精，經噴霧干燥，得到海參提取物。
作為優選，在冷水泡發與煮制之間還包括清洗的步驟。
作為優選，清洗為：冷水泡發結束后，用濕海參重量15～20倍的去離子水清洗濕海參3～4次。
優選地，清洗為：冷水泡發結束后，用濕海參重量20倍的去離子水清洗濕海參4次。
在本發明提供的實施例中，以干花刺參為原料進行提取。
本發明提供了一種海參提取物的制備方法。以干海參為原料，其制備方法包括預處理、酶解處理和加熱提取，預處理包括冷水泡發、煮制、剪切、均質的步驟。本發明具有的技術效果為：本發明通過冷水泡發、高溫煮制、高速剪切、高壓均質的預處理方法，酶解處理方法，高溫提取方法聯合處理，制備得到高蛋白、高多糖含量、低鹽的海參提取物，大大提高了其蛋白質、多糖提取率，所得海參提取物中蛋白質含量>74％，多糖含量>18％，鹽含量<4％，水分含量<3％；海參提取物得率>55％，蛋白質提取率>88％，多糖提取率>90％。
具體實施方式
本發明公開了一種海參提取物的制備方法，本領域技術人員可以借鑒本文內容，適當改進工藝參數實現。特別需要指出的是，所有類似的替換和改動對本領域技術人員來說是顯而易見的，它們都被視為包括在本發明。本發明的方法及應用已經通過較佳實施例進行了描述，相關人員明顯能在不脫離本發明內容、精神和范圍內對本文所述的方法和應用進行改動或適當變更與組合，來實現和應用本發明技術。
本發明提供了一種海參提取物的制備方法，具體包括：
(1)冷水泡發：采用干海參重量20～30倍的去離子水低溫浸泡花刺參；低溫浸泡時，保持泡發溫度10～15℃，泡發20～24小時。
(2)清洗：低溫浸泡結束后，用濕海參重量15～20倍的去離子水清洗濕海參3～4次。
(3)高溫煮制：將花刺參投入濕海參重量15～20倍的溫度為90～95℃的去離子水中，高溫煮制40～60分鐘。
(4)高溫泡發：停止加熱，用余熱繼續泡發8～12小時，收集發好的海參。
(5)物理預處理：用絞肉機將發好的海參絞成肉糜，加入肉糜重量3～5倍的去離子水，高速剪切5～10分鐘，剪切速率為8000～10000rpm，用0.2％Na2CO3溶液調節pH值至7.5～8.0，于55℃、25MPa均質2～3次。
(6)酶解：按肉糜重量0.8％～1％的加酶量，加入復配比例為3:2～4:1的NS37071蛋白酶與木瓜蛋白酶，55℃酶解3～5小時。
(7)加熱后處理：酶解處理后，酶解液帶渣于100～105℃加熱40～60分鐘，離心去渣，得上清液。
(8)濃縮與噴霧干燥：55℃減壓濃縮至固形物濃度為30～35％，加入固形物含量10％的麥芽糊精，噴霧干燥而得花刺參提取物。
采用本發明提供的制備方法，所得海參提取物中蛋白質含量>74％，多糖含量>18％，鹽含量<4％，水分含量<3％。海參提取物得率>55％，蛋白質提取率>88％，多糖提取率>90％。
本發明提供的海參提取物的制備方法中所用試劑和儀器均可由市場購得。
下面結合實施例，進一步闡述本發明：
實施例1
本實施例提取工藝如下：
(1)冷水泡發：采用干海參重量25倍的去離子水低溫浸泡花刺參；低溫浸泡時，保持泡發溫度12℃，泡發24小時。
(2)清洗：低溫浸泡結束后，用濕海參重量20倍的去離子水清洗濕海參4次。
(3)高溫煮制：將花刺參投入濕海參重量20倍的溫度為95℃的去離子水中，高溫煮制45分鐘。
(4)高溫泡發：停止加熱，用余熱繼續泡發10小時，收集發好的海參。
(5)物理預處理：用絞肉機將發好的海參絞成肉糜，加入肉糜重量5倍的去離子水，高速剪切5分鐘，剪切速率為8000rpm，用0.2％Na2CO3溶液調節pH值至7.5，于55℃、25MPa均質2次。
(6)酶解：按肉糜重量0.8％的加酶量，加入復配比例為4:1的NS37071蛋白酶與木瓜蛋白酶，55℃酶解4小時。
(7)加熱后處理：酶解處理后，酶解液帶渣于100℃加熱55分鐘，離心去渣，得上清液。
(8)濃縮與噴霧干燥：55℃減壓濃縮至固形物濃度為30-35％，加入固形物含量10％的麥芽糊精，噴霧干燥而得花刺參提取物。
所得海參提取物中蛋白質含量為74.5％，多糖含量為18.5％，鹽含量為3.5％，水分含量為2.9％。海參提取物得率為55.5％，蛋白質提取率為90％，多糖提取率為95％。
對比例1
與實施例1相比，本對比例冷水泡發的時間長，且缺少高溫煮制、高溫泡發、物理預處理和加熱后處理的步驟，提取工藝如下：
(1)冷水泡發：采用干海參重量25倍的去離子水低溫浸泡花刺參；低溫浸泡時，保持泡發溫度12℃，泡發40小時。
(2)清洗：低溫浸泡結束后，用濕海參重量20倍的去離子水清洗濕海參4次。
(3)酶解：按肉糜重量0.8％的加酶量，加入復配比例為4:1的NS37071蛋白酶與木瓜蛋白酶，55℃酶解4小時。
(4)濃縮與噴霧干燥：55℃減壓濃縮至固形物濃度為30-35％，加入固形物含量10％的麥芽糊精，噴霧干燥而得花刺參提取物。
所得海參提取物中蛋白質含量為72％，多糖含量為16.5％，鹽含量為6.0％，水分含量為3.2％。海參提取物得率為38.2％，蛋白質提取率為68％，多糖提取率為75％。
通過將實施例1與對比例1進行比較，海參提取物得率顯著提高，蛋白質、多糖提取率顯著提高，鹽含量顯著降低，提取效率顯著增加，說明該方法是一種高效提取花刺參蛋白、多糖的方法。
實施例2
本實施例提取工藝如下：
(1)冷水泡發：采用干海參重量20倍的去離子水低溫浸泡花刺參；低溫浸泡時，保持泡發溫度15℃，泡發20小時。
(2)清洗：低溫浸泡結束后，用濕海參重量15倍的去離子水清洗濕海參4次。
(3)高溫煮制：將花刺參投入濕海參重量15倍的溫度為94℃的去離子水中，高溫煮制40分鐘。
(4)高溫泡發：停止加熱，用余熱繼續泡發8小時，收集發好的海參。
(5)物理預處理：用絞肉機將發好的海參絞成肉糜，加入肉糜重量4倍的去離子水，高速剪切8分鐘，剪切速率為10000rpm，用0.2％Na2CO3溶液調節pH值至7.8，于55℃、25MPa均質3次。
(6)酶解：按肉糜重量0.9％的加酶量，加入復配比例為3:2的NS37071蛋白酶與木瓜蛋白酶，55℃酶解3小時。
(7)加熱后處理：酶解處理后，酶解液帶渣于102℃加熱60分鐘，離心去渣，得上清液。
(8)濃縮與噴霧干燥：55℃減壓濃縮至固形物濃度為30-35％，加入固形物含量10％的麥芽糊精，噴霧干燥而得花刺參提取物。
所得海參提取物中蛋白質含量為75％，多糖含量為19％，鹽含量為3％，水分含量為2.8％。海參提取物得率為56％，蛋白質提取率為89％，多糖提取率為98％。
實施例3
本實施例提取工藝如下：
(1)冷水泡發：采用干海參重量30倍的去離子水低溫浸泡花刺參；低溫浸泡時，保持泡發溫度10℃，泡發23小時。
(2)清洗：低溫浸泡結束后，用濕海參重量18倍的去離子水清洗濕海參3次。
(3)高溫煮制：將花刺參投入濕海參重量18倍的溫度為90℃的去離子水中，高溫煮制60分鐘。
(4)高溫泡發：停止加熱，用余熱繼續泡發12小時，收集發好的海參。
(5)物理預處理：用絞肉機將發好的海參絞成肉糜，加入肉糜重量3倍的去離子水，高速剪切10分鐘，剪切速率為9000rpm，用0.2％Na2CO3溶液調節pH值至8.0，于55℃、25MPa均質3次。
(6)酶解：按肉糜重量1％的加酶量，加入復配比例為3:1的NS37071蛋白酶與木瓜蛋白酶，55℃酶解5小時。
(7)加熱后處理：酶解處理后，酶解液帶渣于105℃加熱40分鐘，離心去渣，得上清液。
(8)濃縮與噴霧干燥：55℃減壓濃縮至固形物濃度為30-35％，加入固形物含量10％的麥芽糊精，噴霧干燥而得花刺參提取物。
所得海參提取物中蛋白質含量為75.5％，多糖含量為18.3％，鹽含量為3.0％，水分含量為2.9％。海參提取物得率為56.5％，蛋白質提取率為89.5％，多糖提取率為94％。
以上所述僅是本發明的優選實施方式，應當指出，對于本技術領域的普通技術人員來說，在不脫離本發明原理的前提下，還可以做出若干改進和潤飾，這些改進和潤飾也應視為本發明的保護范圍。