專利名稱：太子參提取物及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于中藥領(lǐng)域，涉及太子參提取物的制備方法及其應(yīng)用，特別是涉及太子參的こ醇提取物、こ酸こ酯提取物的制備方法及こ醇提取物、こ酸こ酯提取物和多糖三種提取物在制備肺氣虛癥相關(guān)疾病治療藥物中應(yīng)用。
背景技術(shù)：
肺氣虛，出自《素問(wèn) 方盛衰論篇》，又稱肺氣不足。多由寒溫不適，久咳傷氣，悲傷不已，勞逸不當(dāng)所致。癥見(jiàn)咳嗽氣短，甚則喘促或呼吸困難，痰多清稀，疲倦，自汗，脈虛 或弱。肺氣虛是肺系疾病的基礎(chǔ)病機(jī)，指肺臟正氣的虛弱，肺的機(jī)能活動(dòng)減退。肺氣虛癥是臨床常見(jiàn)證候，引起呼吸功能的不同程度損害，肺、氣管和支氣管病理形態(tài)的改變，以及機(jī)體免疫功能的改變等；可見(jiàn)于反復(fù)呼吸道感染、慢性支氣管炎、支氣管哮喘得不到有效控制，部分病例終將演變成肺氣腫、肺源性心臟病、肺間質(zhì)疾病等多種慢性肺系疾患；近年來(lái)，隨著人口的老年化、環(huán)境污染、吸煙等多種因素的影響，慢性阻塞性肺疾病簡(jiǎn)稱慢阻肺(C0PD)，隨著其發(fā)病率和死亡率不斷増加已成為全球關(guān)注的健康問(wèn)題。COPD是ー種破壞性的肺部疾病，是以不完全可逆的氣流受限為特征的疾病，氣流受限通常呈進(jìn)行性發(fā)展并與肺對(duì)有害顆粒或氣體的異常炎癥反應(yīng)有夫。至今，尚無(wú)ー種藥物能有效的控制CCffD病情的發(fā)展，不少國(guó)家將其作為慢性疾病中重點(diǎn)防治項(xiàng)目。中醫(yī)肺病學(xué)專家李澤庚等研究發(fā)現(xiàn)，COTO肺氣虛基本都處于中重度，肺氣虛證為慢性阻塞性肺疾病的基本病機(jī)。因此，肺氣虛的改善對(duì)于多發(fā)、難治、具有反復(fù)發(fā)作特點(diǎn)的肺系疾病防治具有重要意義。在肺系疾病發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中，日久由實(shí)轉(zhuǎn)虛，最終累及他臟。早在《內(nèi)徑》中就有“五臟六腑皆令人咳，非獨(dú)肺也”的論述，明確提出肺是咳、喘的主要病位，同時(shí)也常與其它臟腑功能失常有關(guān)，中醫(yī)認(rèn)為肺系疾病辨證重在肺、脾、腎三臟。肺為氣之主，為貯痰之器，肺失治節(jié)，在肺則以咳嗽為主；脾為生痰之源，在脾則為咯痰為主；腎為氣之根，生痰之本，在腎以氣喘為主。肺不傷不咳，脾不傷不久咳，腎不傷不喘促。本病標(biāo)在肺，本在脾腎。太子參，別名孩兒參、童參、四葉參或米參，系石竹科太子參屬多年生草本宿根性植物異葉假繁縷heterophylla (Miq. )Pax ex Pax et Hoffm.的干燥塊根。太子參味甘、微苦，性平。歸脾、肺經(jīng)。太子參中富含氨基酸、多糖、苷類、磷脂類、環(huán)肽類、脂肪酸類、油脂類、揮發(fā)油類、留醇類、微量元素等多種化學(xué)成分，以太子參益氣、健脾為主，配合其潤(rùn)肺止咳功效，多糖具有提高免疫力功能，多組分發(fā)揮作用相得益彰，起到益氣生津、增強(qiáng)抵抗力，使免疫平衡得到恢復(fù)、改善肺功能，消除及緩解乏力、心悸、氣短等肺氣虛癥狀。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供太子參提取物及其在制備肺氣虛證相關(guān)疾病治療藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明提供的三種太子參提取物能抑制肺部炎癥反應(yīng)，益氣生津、增強(qiáng)抵抗力，使免疫平衡得到恢復(fù)、改善肺功能，消除及緩解乏力、心悸、氣短等肺氣虛癥狀。另外，肺氣虛的改善對(duì)于多發(fā)、難治、具有反復(fù)發(fā)作特點(diǎn)的肺系疾病防治具有重要意義。本發(fā)明首先提供了ー種太子參こ醇提取物，所述太子參こ醇提取物的制備方法如下取太子參干燥藥材,按質(zhì)量體積比計(jì),加入8 10倍量的70 95% (質(zhì)量分?jǐn)?shù))こ醇浸泡，置于加壓連續(xù)回流提取罐中，回流提取3次，毎次2小時(shí)；合并提取液，再將提取液置于濃縮罐中，濃縮至提取液體積的1/20 1/25，得こ醇提取物浸膏。所述提取罐的油液溫度為90 130°C，提取液溫度為70 90°C，灌內(nèi)壓力0. 03 0.06Mpa。所述濃縮罐的濃縮油溫度為85 95 °C，濃縮液溫度為30 70°C，壓カ為-0. 02 -0. 05 Mpa0本發(fā)明還提供了ー種太子參多糖提取物，所述太子參多糖提取物的制備方法的如下
a、太子參干燥藥材，加入8 10倍量的70 95%(質(zhì)量分?jǐn)?shù))こ醇浸泡,置于加壓連續(xù)回流提取罐中，提取罐油液溫度90 130°C，提取液溫度70 90°C，灌內(nèi)壓力0. 03
0.06MPa，回流提取3次，每次2小時(shí);
b、上述こ醇提取后，藥材殘?jiān)鼡]干こ醇，再用7 10倍量(質(zhì)量體積比)蒸餾水提取3次，毎次2小時(shí)，合并提取液，濃縮至原體積的1/5 1/10，得到太子參粗多糖提取物；根據(jù)Sevag法將太子參粗多糖提取物用適量的蒸餾水稀釋溶解，加入こ醇沉淀粗多糖，使こ醇濃度在65 85%范圍內(nèi)，靜置過(guò)夜，離心，得到粗多糖沉淀物，將沉淀物用蒸餾水溶解，加入1/4 1/6蒸餾水體積的氯仿、與氯仿等體積的正丁醇，充分振搖5 10 min，靜置，離心除去中間蛋白沉淀物，重復(fù)操作4 6次至無(wú)白色沉淀物，分離合并上層溶液，加入こ醇使其濃度在65 85%范圍內(nèi)，4°C靜置過(guò)夜，離心，得到太子參多糖提取物初產(chǎn)品，將多糖提取物冷凍干燥，得到太子參多糖提取物。本發(fā)明另外還提供了ー種太子參こ酸こ酯提取物，所述太子參こ酸こ酯提取物的制備方法如下由權(quán)利要求1所述的制備方法制得的こ醇提取物浸膏，加入蒸餾水溶解稀釋2 10倍成混懸液，用石油醚按1:1的比例萃取4 6次至上層有機(jī)相澄清無(wú)色，除去上層石油醚萃取液；下層水層用こ酸こ酯按1:1的比例萃取3 5次至上層有機(jī)相澄清無(wú)色，こ酸こ酯有機(jī)相用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮，回收溶劑，得到こ酸こ酯濃縮浸膏，于真空干燥箱中干燥，溫度30 70°C，壓カ-0. 02 -0. 05 MPa，得到太子參こ酸こ酯提取物。本發(fā)明還提供了上述三種提取物在制備肺氣虛證相關(guān)疾病治療藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明的顯著優(yōu)點(diǎn)本發(fā)明提供的三種太子參提取物能抑制肺部炎癥反應(yīng)，益氣生津、增強(qiáng)抵抗力，使免疫平衡得到恢復(fù)、改善肺功能，消除及緩解乏力、心悸、氣短等肺氣虛癥狀。另外，肺氣虛的改善對(duì)于多發(fā)、難治、具有反復(fù)發(fā)作特點(diǎn)的肺系疾病防治具有重要意義。


圖1為大鼠氣道流速測(cè)試波形；
圖2為大鼠潮氣量測(cè)試波形；
圖3為大鼠跨肺壓測(cè)試波形。
具體實(shí)施方式
實(shí)施例1 :太子參干燥藥材100克，加入8倍量的70%こ醇浸泡，置于加壓連續(xù)回流提取罐中，提取罐油液溫度90°C，提取液溫度70°C，灌內(nèi)壓カ0. 03 MPa,回流提取3次，每次2小時(shí)；合并提取液，于濃縮罐中，濃縮油溫度85°C，濃縮液溫度30°C，壓カ-0. 02 MPa,濃縮至原體積的1/20，得こ醇提取物浸膏。實(shí)施例2 :取太子參干燥藥材200克，加入10倍量的95%こ醇浸泡，置于加壓連續(xù)回流提取罐中，提取罐的油液溫度為130°C，提取液溫度為90°C，灌內(nèi)壓力0. 06Mpa。回流提取3次，毎次2小時(shí)；合并提取液，再將提取液置于濃縮罐中，濃縮罐的濃縮油溫度為95°C，濃縮液溫度為70°C，壓カ為-0. 05 Mpa0濃縮至提取液體積的1/25，得こ醇提取物浸膏。實(shí)施例3 :太子參干燥藥材300克，加入9倍量的80%こ醇浸泡，置于加壓連續(xù)回流提取罐中，提取罐油液溫度110°c，提取液溫度80°C，灌內(nèi)壓力0. 04MPa回流提取3次，每 次2小時(shí)；合并提取液，于濃縮罐中，濃縮油溫度90°C，濃縮液溫度50°C，壓カ-0. 04 MPa,濃縮至原體積的1/23，得こ醇提取物浸膏。實(shí)施例4 :太子參干燥藥材100克，加入8倍量的70%こ醇浸泡，置于加壓連續(xù)回流提取罐中，提取罐油液溫度90°C，提取液溫度70°C，灌內(nèi)壓カ0. 03 MPa,回流提取3次，每次2小時(shí)；上述こ醇提取后，藥材殘?jiān)鼡]干こ醇，再用7倍量蒸餾水提取3次，毎次2小吋，合并提取液，濃縮至原體積的1/5，得到太子參粗多糖提取物；根據(jù)Sevag法將太子參粗多糖提取物用適量的蒸餾水稀釋溶解，加入こ醇沉淀粗多糖，使こ醇濃度在65%范圍內(nèi)，靜置過(guò)夜，離心，得到粗多糖沉淀物，將沉淀物用蒸餾水溶解，加入1/4蒸餾水體積的氯仿、與氯仿等體積的正丁醇，充分振搖5 min，靜置，離心除去中間蛋白沉淀物，重復(fù)操作4次至無(wú)白色沉淀物，分離合并上層溶液，加入こ醇使其濃度在65%范圍內(nèi)，4°C靜置過(guò)夜，離心，得到太子參多糖提取物，將多糖提取物冷凍干燥，得到太子參多糖提取物。實(shí)施例5 :取太子參干燥藥材200克，加入10倍量的95%こ醇浸泡，置于加壓連續(xù)回流提取罐中，提取罐的油液溫度為130°C，提取液溫度為90°C，灌內(nèi)壓力0.06Mpa。回流提取3次，毎次2小時(shí)；上述こ醇提取后，藥材殘?jiān)鼡]干こ醇，再用10倍量蒸餾水提取3次，毎次2小時(shí)，合并提取液，濃縮至原體積的1/10，得到太子參粗多糖提取物；根據(jù)Sevag法將太子參粗多糖提取物用適量的蒸餾水稀釋溶解，加入こ醇沉淀粗多糖，使こ醇濃度在85%范圍內(nèi)，靜置過(guò)夜，離心，得到粗多糖沉淀物，將沉淀物用蒸餾水溶解，加入1/6蒸餾水體積的氯仿、與氯仿等體積的正丁醇，充分振搖10 min，靜置，離心除去中間蛋白沉淀物，重復(fù)操作6次至無(wú)白色沉淀物，分離合并上層溶液，加入こ醇使其濃度在85%范圍內(nèi)，4°C靜置過(guò)夜，離心，得到太子參多糖提取物，將多糖提取物冷凍干燥，得到太子參多糖提取物。實(shí)施例6 :由實(shí)施例1制得的こ醇提取物浸膏，加入蒸餾水溶解稀釋2倍成混懸液，用石油醚按1:1的比例萃取4次至上層有機(jī)相澄清無(wú)色，除去上層石油醚萃取液；下層水層用こ酸こ酯按1:1的比例萃取3次至上層有機(jī)相澄清無(wú)色，こ酸こ酯有機(jī)相用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮，回收溶劑，得到こ酸こ酯濃縮浸膏，于真空干燥箱中干燥，溫度30°C，壓カ-0. 02MPa，得到太子參こ酸こ酯提取物。實(shí)施例7 :由實(shí)施例2制得的こ醇提取物浸膏，加入蒸餾水溶解稀釋10倍成混懸液，用石油醚按1:1的比例萃取6次至上層有機(jī)相澄清無(wú)色，除去上層石油醚萃取液；下層水層用こ酸こ酯按1:1的比例萃取5次至上層有機(jī)相澄清無(wú)色，こ酸こ酯有機(jī)相用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮，回收溶劑，得到こ酸こ酯濃縮浸膏，于真空干燥箱中干燥，溫度70°C，壓カ-0. 05MPa，得到太子參こ酸こ酯提取物。實(shí)施例8 :由實(shí)施例3制得的こ醇提取物浸膏，加入蒸餾水溶解稀釋5倍成混懸液，用石油醚按1:1的比例萃取5次至上層有機(jī)相澄清無(wú)色，除去上層石油醚萃取液；下層水層用こ酸こ酯按1:1的比例萃取4次至上層有機(jī)相澄清無(wú)色，こ酸こ酯有機(jī)相用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮，回收溶劑，得到こ酸こ酯濃縮浸膏，于真空干燥箱中干燥，溫度50°C，壓カ-0. 03MPa，得到太子參こ酸こ酯提取物。藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)1.動(dòng)物造模給藥
SPF級(jí)Wistar大鼠，雌雄不拘，重量為200 士 25(g)，周齡6_8周齡。實(shí)驗(yàn)前I周將Wistar大鼠置于實(shí)驗(yàn)環(huán)境中飼養(yǎng)，室溫22_26°C。采用《實(shí)用中醫(yī)證侯動(dòng)物模型學(xué)》之“煙熏法肺氣虛證動(dòng)物模型”復(fù)制法；每組10只大 鼠，雌雄各半，分別置于特制的Im3煙室中，用刨花、鋸末、煙葉各30 50g，點(diǎn)燃煙熏，每日I次，每次30分鐘，自由進(jìn)食、飲水，連續(xù)煙熏60天，注意適當(dāng)通風(fēng)，以防大鼠窒息。正常對(duì)照組置于正常無(wú)煙環(huán)境中飼養(yǎng)，不煙熏，自由進(jìn)食、飲水。正常對(duì)照組(正常組)灌服生理鹽水10 ml/kg，模型對(duì)照組(模型組)灌服生理鹽水10 ml/ kg，陽(yáng)性對(duì)照組灌服桂龍咳喘膠囊每天用藥劑量1. 25 ml/100g，太子參こ醇提取物、多糖提取物、こ酸こ酯提取物組分別灌服高中低劑量100-500 mg/kg。各組均于停止煙熏當(dāng)天開(kāi)始姆天灌胃給藥I次/天，連續(xù)給藥15天。.三種太子參提取物對(duì)肺氣虛證的治療作用
肺氣虛證大鼠經(jīng)太子參提取物治療后，通過(guò)測(cè)定肺氣道阻力(lung resistance, RL)和動(dòng)態(tài)肺順應(yīng)(dynamic lung comp liance, Cdyn)等肺功能的改善,評(píng)價(jià)其對(duì)肺氣虛證的治療作用。大鼠灌胃給藥結(jié)束第2天25 %烏拉坦(4 ml/kg相當(dāng)于1000 mg/kg)麻醉后，切開(kāi)頸部皮膚，分離氣管，行氣管插管。將手術(shù)后的大鼠置于透明的有機(jī)玻璃體描記器內(nèi)，接通氣管插管，引伸于體積描記器外。同時(shí)于體積描記器的側(cè)孔接上壓カ換能器和MedLab生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)。將所有待測(cè)的導(dǎo)管接通完畢，蓋上體描記器的蓋子，并使其完全密閉，即可描記隨動(dòng)物呼吸而引起密閉的體描記器內(nèi)容積的變化，即為潮氣量(tidalvolume, Vt ),以定容器定標(biāo)。取Fisher管與氣管插管接通,測(cè)氣流速率(airway flow,V)，連接上壓カ換能器一PCLAB生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)描記，用流量計(jì)定標(biāo)。用ー鈍頭、頭端帶有2 3小孔的金屬管直接插入胸膜腔內(nèi)，連著導(dǎo)管與差壓換能器一MedLab生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)聯(lián)接，差壓換能器的另ー頭與口腔插管連接(測(cè)口腔壓)，即可測(cè)得跨肺壓(trans pulmo- nary pressure, Ptp ),用水檢壓計(jì)定標(biāo)。所有這些外科手術(shù)和連接完成后讓大鼠在體描記器內(nèi)平穩(wěn)I min后,觀察描記5 min,由Medlab生物信號(hào)系統(tǒng)導(dǎo)出潮氣量、氣道流速、跨肺壓，計(jì)算得到RL和Cdyn,計(jì)算公式:RL ( CmH2O nT 3 IT 1 ) = Ptp/V,Cdyn (mL cm- 1H2O) =Vt/Ptp。圖1 3分別是氣道流速、潮氣量、跨肺壓等大鼠肺功能測(cè)試波形，肺功能測(cè)試結(jié)果見(jiàn)表I。表I大鼠氣道阻力RL和氣道順應(yīng)性Cdyn的變化(太子參提取物劑量400 mg/kg)
權(quán)利要求
1.一種太子參乙醇提取物，其特征在于所述太子參乙醇提取物的制備方法如下取太子參干燥藥材，按質(zhì)量體積比計(jì)，加入8 10倍量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為70 95%的乙醇浸泡, 置于加壓連續(xù)回流提取罐中，回流提取3次，每次2小時(shí)；合并提取液，再將提取液置于濃縮罐中，濃縮至提取液體積的1/20 1/25，得乙醇提取物浸膏。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種太子參乙醇提取物，其特征在于所述提取罐的油液溫度為90 1301，提取液溫度為70 901，灌內(nèi)壓力0.03 O. 06Mpa。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種太子參乙醇提取物，其特征在于所述濃縮罐的濃縮油溫度為85 95°C，濃縮液溫度為30 70°C，壓力為-O. 02 -O. 05 Mpa0
4.如權(quán)利要求1所述的一種太子參乙醇提取物在制備肺氣虛證相關(guān)疾病治療藥物中的應(yīng)用。
5.一種太子參多糖提取物的應(yīng)用，其特征在于以由太子參中提取到的太子參多糖為有效成分，在制備肺氣虛證相關(guān)疾病治療藥物中的應(yīng)用。
6.一種太子參乙酸乙酯提取物，其特征在于所述太子參乙酸乙酯提取物的制備方法如下由權(quán)利要求1所述的制備方法制得的乙醇提取物浸膏，加入蒸餾水溶解稀釋2 10 倍成混懸液，用石油醚按1:1的比例萃取4 6次至上層有機(jī)相澄清無(wú)色，除去上層石油醚萃取液；下層水層用乙酸乙酯按1:1的比例萃取3 5次至上層有機(jī)相澄清無(wú)色，乙酸乙酯有機(jī)相用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮，回收溶劑，得到乙酸乙酯濃縮浸膏，于真空干燥箱中干燥，溫度 30 70°C，壓力-O. 02 -O. 05 MPa，得到太子參乙酸乙酯提取物。
7.如權(quán)利要求6所述的一種太子參乙酸乙酯提取物在制備肺氣虛證相關(guān)疾病治療藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明提供了三種太子參提取物及它們?cè)谥苽浞螝馓撟C相關(guān)疾病治療藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明提供的三種太子參提取物能抑制肺部炎癥反應(yīng)，益氣生津、增強(qiáng)抵抗力，使免疫平衡得到恢復(fù)、改善肺功能，消除及緩解乏力、心悸、氣短等肺氣虛癥狀。肺氣虛的改善對(duì)于多發(fā)、難治、具有反復(fù)發(fā)作特點(diǎn)的肺系疾病防治具有重要意義。
文檔編號(hào)A61P1/14GK103006746SQ20121058880
公開(kāi)日2013年4月3日 申請(qǐng)日期2012年12月31日 優(yōu)先權(quán)日2012年12月31日
發(fā)明者胡娟, 龐文生, 林泗定, 戴啟文, 張鴻程 申請(qǐng)人:福建中醫(yī)藥大學(xué)