復方青蒿素多相脂質體注射液及其制備方法
【專利摘要】本發明屬于獸藥領域，具體為復方青蒿素多相脂質體注射液及其制備方法。該注射液包括藥用成分和注射液輔料成分，其中，藥用成分由青蒿素和三氮脒制成，注射液輔料成分由卵磷脂、膽固醇、吐溫-80、磷酸緩沖液和無水乙醇組成。其中卵磷脂1～30份、膽固醇0.5～10份、吐溫-80：0.1～5份、青蒿素0.5～5份、三氮脒0.5～5份、無水乙醇1～15份、磷酸緩沖液5～90份。根據本發明制成復方青蒿素多相脂質體，運用于獸醫臨床治療畜禽的附紅細胞體病療效顯著，且安全性高、本發明中將幾種方法的有機結合，即采用乙醇注入-超聲-乳勻法，該法制備的產品包封率高、穩定性好，且操作性強，適合于工業大生產。
【專利說明】復方青蒿素多相脂質體注射液及其制備方法
【技術領域】
[0001]本發明屬于獸藥領域，具體為一種包封率高、穩定性好、安全性高、療效顯著的復方青蒿素多相脂質體注射液及其制備方法。
【背景技術】
[0002]青蒿素是于20世紀70年代初首次由中國科學家從黃花蒿中分離得到的一種化合物，是目前世界上公認的最有效治療腦型瘧疾和抗氯喹惡性瘧疾的藥物，已成為世界衛生組織(WHO)推薦的治療瘧疾的首選藥物。
[0003]藥理研究證實，青蒿素除具有抗瘧作用外，還具有抗孕、抗纖維化、抗血吸蟲、抗弓形蟲、抗心律失常和腫瘤細胞毒性等作用。在獸醫臨床上，青蒿素對畜禽附紅細胞體、球蟲、血吸蟲、弓形蟲、肺孢子蟲等具有較強的作用。
[0004]近年來，對青蒿素及其青蒿其他有效成分脂質體的研究主要集中于對青蒿素脂質體、青蒿酯脂質體、青蒿油多相脂質體、青蒿琥酯納米脂質體、二氫青蒿素脂質體的研究。這些研究均為人醫藥領域的研究，而獸醫領域還是空白。并且這些研究也僅限于對青蒿有效成分中的某種單一成分脂質體的研究。其采用的制備方法有乙醇注入法、薄膜-超聲法等，這些制備方法在實驗室雖然能取得較高的包封率，但由于方法自身的缺陷，比如乙醇注入法最終得到脂質體大多為大室脂質體，其粒徑大，不適合靜脈注射，需乳勻若干次，方可得到單室脂質體。
[0005]而薄膜-超聲法:需將容器不斷的旋轉和蒸發，以便將有機溶劑揮發后形成一層薄膜，然后加水攪拌制備脂質體。該法耗能、產量小。
[0006]逆相蒸發法、冷凍干燥法等對設備要求高，設備昂貴。
[0007]總之，以上方法適合實驗室制備，在大生產中應用還存在一定的難度。

【發明內容】

[0008]本發明的目的是提供一種包封率高的，在獸醫臨床治療畜禽的附紅細胞體病療效顯著的復方青蒿素多相脂質體注射液。，且安全性高
[0009]本發明的另一目的是提供一種工藝簡單，操作性強、穩定性高的復方青蒿素多相脂質體注射液的制備方法。
[0010]本發明的具體技術方案為:
[0011]復方青蒿素多相脂質體注射液，該注射液包括藥用成分和注射液輔料成分，其中，藥用成分由青蒿素和三氮脒制成，注射液輔料成分由卵磷脂、膽固醇、吐溫-80、磷酸緩沖液和無水乙醇組成，磷酸緩沖液的PH值為6.5。
[0012]該注射液中各組分的重量份為:卵磷脂I~30份、膽固醇0.5~10份、吐溫-800.1~5份、青蒿素0.5~5份、三氮脒0.5~5份、無水乙醇I~15份、磷酸緩沖液5~90份。
[0013]復方青蒿素多相脂質體注射液，該注射液中各組分的重量份為:卵磷脂10份、膽固醇5份、吐溫-802份、青蒿素2份、三氮脒2份、無水乙醇10份、磷酸緩沖液50份。
[0014]一種復方青蒿素多相脂質體注射液的制備方法，該制備方法包括以下步驟:
[0015]①以重量份計，將卵磷脂I~30份、膽固醇0.5~10份、吐溫-800.1~5份、青蒿素0.5~5份按比例分別溶于10份的無水乙醇中；
[0016]②另將重量份為三氮脒0.5~5份溶于磷酸緩沖液中保溫，在50°C的條件下進行攪拌，將無水乙醇I~15份混合液緩慢注入50°C的磷酸鹽緩沖液中，繼續攪拌，攪拌的速度20~IOOr除去無水乙醇,保溫水合3h,探頭超聲,探頭超聲的時間2~20min,加磷酸緩沖液至全量，通過乳勻機，乳勻I~5次，即得。
[0017]復方青蒿素多相脂質體注射液的規格為IOmL/支，其中組分中卵磷脂與膽固醇的質量比為3~12:1，脂藥的質量比為3~12:1，分別含有青蒿素150mg、三氮脒250mg。
[0018]本發明的積極效果體現在:本發明將青蒿素與三氮脒組合，制成復方青蒿素多相脂質體，運用于獸醫臨床治療畜禽的附紅細胞體病療效顯著，且安全性高。該法制備的復方青蒿素多相脂質體包封率高、穩定性好，且操作性強，適合于工業大生產。
【具體實施方式】
[0019]下面結合實施例對本發明進一步說明，但不限制本發明的范圍。
[0020]實施例1:
[0021]復方青蒿素多相脂質體注射液，包括藥用成分和注射液輔料成分，其中，藥用成分由青蒿素和三氮脒制成，注射液輔料成分由卵磷脂、膽固醇、吐溫-80、磷酸緩沖液和無水乙醇組成。
`[0022]其中組分以重量份計為:卵磷脂1份、膽固醇0.5份、吐溫-805份、青蒿素5份、三氮脒5份、無水乙醇10份、磷酸緩沖液50份。
[0023]實施例2:
[0024]復方青蒿素多相脂質體注射液，包括藥用成分和注射液輔料成分，其中，藥用成分由青蒿素和三氮脒制成，注射液輔料成分由卵磷脂、膽固醇、吐溫-80、磷酸緩沖液和無水乙醇組成。
[0025]其中組分以重量份計為:卵磷脂10份、膽固醇5份、吐溫-803份、青蒿素5份、三氮脒4份、無水乙醇8份、磷酸緩沖液45份。
[0026]實施例3:
[0027]復方青蒿素多相脂質體注射液，包括藥用成分和注射液輔料成分，其中，藥用成分由青蒿素和三氮脒制成，注射液輔料成分由卵磷脂、膽固醇、吐溫-80、磷酸緩沖液和無水乙醇組成。
[0028]其中組分以重量份計為:卵磷脂30份、膽固醇10份、吐溫-800.5份、青蒿素1份、三氮脒3份、無水乙醇7份、磷酸緩沖液55份。
[0029]實施例4:
[0030]復方青蒿素多相脂質體的制備
[0031]①將9份卵磷脂、1.2份膽固醇、0.2份吐溫_80、1份青蒿素溶于10份無水乙醇中；
[0032]②另將3份三氮脒溶于80份pH值為6.5滅菌的磷酸緩沖液(PBS)保溫，在恒溫及攪拌下，將無水乙醇混合液緩慢注入50°C PBS液中，繼續攪拌，除去無水乙醇，保溫水合3小時，探頭超聲，加滅菌的磷酸緩沖液至全量，通過乳勻機3次，即得復方青蒿素多相脂質體注射液。
[0033]實施例1-實施例3中的復方青蒿素多相脂質體均可采用實施例4中的方法來制備，只改變原料比例關系即可。
[0034]實驗檢驗:
[0035]包封率的測定
[0036]采用葡聚糖凝膠(Sephadex)柱分離法，精密吸取復方青蒿素多相脂質體0.5mL上柱，以PBS溶液為流動相洗脫，控制流速，根據S印hadex G_50對大分子先被洗脫出來，小分子后出來的順序，收集包封的藥物，檢測包封的青蒿素，
[0037]取適量復方青蒿素多相脂質體注射劑作處理樣品，并檢測青蒿素的含量(C,6)。
[0038]按以下式計算包封率:
[0039]包封率(W包)=C包/C總X100%。
[0040]采用均勻設計法，以脂質體包封率為考察指標，對包封率影響較大的卵磷脂與膽固醇的比(A)、脂藥比(B)、超聲時間(C)、攪拌速度(D)、乳勻次數(E)5因素。各因素水平不完全是11水平，需進行擬合，如下:
[0041]`
【權利要求】
1.復方青蒿素多相脂質體注射液，其特征在于:該注射液包括藥用成分和注射液輔料成分，其中，藥用成分由青蒿素和三氮脒制成，注射液輔料成分由卵磷脂、膽固醇、吐溫-80、磷酸緩沖液和無水乙醇組成。
2.根據權利要求1所述的復方青蒿素多相脂質體注射液，其特征在于該注射液中各組分的重量份為:卵磷脂I~30份、膽固醇0.5~10份、吐溫-80 0.1~5份、青蒿素0.5~5份、三氮脒0.5~5份、無水乙醇I~15份、磷酸緩沖液5~90份。
3.復方青蒿素多相脂質體注射液的制備方法，其特征在于:該制備方法包括以下步驟: ①以重量份計，將卵磷脂I~30份、膽固醇0.5~10份、吐溫-80 0.1~5份、青蒿素0.5~5份按比例分別溶于10份的無水乙醇中； ②另將重量份為三氮脒0.5~5份溶于磷酸緩沖液中保溫，在50°C的條件下進行攪拌，將無水乙醇I~15份混合液緩慢注入50°C的磷酸鹽緩沖液中，繼續攪拌，除去無水乙醇，保溫水合3h，探頭超聲，加磷酸緩沖液至全量，通過乳勻機，即得。
4.根據權利要求1所述的復方青蒿素多相脂質體注射液的制備方法，其特征在于:步驟②中攪拌的速度20~IOOr.mirT1，探頭超聲的時間超聲2~20min，乳勻I~5次。
5.一種根據權利要求3所述的制備方法制得的復方青蒿素多相脂質體注射液的應用，其特征在于:該注射液的規格為IOmL/支，分別含有青蒿素150mg、三氮脒250mg。
6.根據權利要求1或權利要求2中所述的復方青蒿素多相脂質體注射液，其特征在于:所述的磷酸緩沖液的PH值為6`.5。
【文檔編號】A61K9/127GK103550229SQ201310554788
【公開日】2014年2月5日 申請日期:2013年11月8日 優先權日:2013年11月8日
【發明者】張槐, 黃玉偉, 陳強, 黃聲全, 張德萍, 盧朝華 申請人:四川維爾康動物藥業有限公司