本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種提高含對(duì)乙酰氨基酚藥物穩(wěn)定性的方法。

背景技術(shù)：

撲熱息痛是常見的解熱鎮(zhèn)痛藥物，其藥效成分是對(duì)乙酰氨基酚(4-羥基乙酰苯胺)。白加黑、帕爾克、泰諾感冒片、感冒靈、去痛片等均含撲熱息痛，常用飲用水與藥物一并吞服。對(duì)乙酰氨基酚在水溶液中不穩(wěn)定，易分解為對(duì)氨基酚，藥用活性大大下降。兒茶素是在自然界中普遍存在的多酚類物質(zhì)。漆酶(EC 1.10.3.2)存在于蘑菇、細(xì)菌及植物中，屬于氧化還原酶，可利用氧氣將底物氧化。對(duì)乙酰氨基酚和兒茶素均是漆酶的底物。陸雋鶴等人闡釋了漆酶催化對(duì)乙酰氨基酚氧化的機(jī)理，對(duì)乙酰氨基酚被漆酶氧化形成自由基，自由基相互聚合形成多聚物(陸雋鶴等,利用漆酶去除水中痕量對(duì)乙酰氨基酚，第六屆全國(guó)環(huán)境化學(xué)大會(huì)暨環(huán)境科學(xué)儀器與分析儀器展覽會(huì)摘要集，2011)。兒茶素在弱酸性(pH 5.0-6.0)和25℃條件下可被漆酶催化氧化(羅耀紅等，漆酶對(duì)酚類化合物生物催化氧化動(dòng)力學(xué)研究--以兒茶酚和表兒茶素為模式底物，林產(chǎn)化學(xué)與工業(yè)，2008)。目前還沒有使用兒茶素保護(hù)對(duì)乙酰氨基酚不被漆酶催化氧化的報(bào)道。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供一種提高含對(duì)乙酰氨基酚藥物穩(wěn)定性的方法。

實(shí)現(xiàn)本發(fā)明目的的技術(shù)方案如下：

一種提高含對(duì)乙酰氨基酚藥物穩(wěn)定性的方法，在含對(duì)乙酰氨基酚藥物中加入含有兒茶素衍生物的水溶液。

所述的兒茶素衍生物選自兒茶素(EC)、沒食子兒茶素(EGC)、兒茶素沒食子酸酯(ECG)、沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)或茶多酚中的一種或多種。

所述的含有兒茶素衍生物的水溶液可以是茶水。

現(xiàn)有的含對(duì)乙酰氨基酚藥物服用時(shí)，常用飲用水與藥物一并吞服。但是對(duì)乙酰氨基酚在水溶液中不穩(wěn)定，易分解為對(duì)氨基酚，藥用活性大大下降。對(duì)乙酰氨基酚和兒茶素衍生物均可被漆酶催化氧化，形成的高聚物可抑制漆酶活力。在對(duì)乙酰氨基酚水溶液中加入兒茶素衍生物時(shí)，漆酶優(yōu)先催化氧化兒茶素衍生物，從而保護(hù)對(duì)乙酰氨基酚不被漆酶氧化。本發(fā)明的含對(duì)乙酰氨基酚藥物穩(wěn)定性的方法，提高含對(duì)乙酰氨基酚藥物的穩(wěn)定性，減少藥物的服用次數(shù)。

附圖說明

圖1為實(shí)施例1中反應(yīng)初始反應(yīng)液(a)和反應(yīng)96小時(shí)反應(yīng)液(b)的紫外觀察TLC對(duì)比圖。

圖2為實(shí)施例1中反應(yīng)初始反應(yīng)液(a)和反應(yīng)96小時(shí)反應(yīng)液(b)的普魯士藍(lán)染色對(duì)比圖。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合實(shí)施例和附圖對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳述。

實(shí)施例1

相同條件的反應(yīng)體系下，設(shè)置三組實(shí)驗(yàn)：第一組以兒茶素為底物，第二組以對(duì)乙酰氨基酚為底物，第三組以兒茶素和對(duì)乙酰氨基酚混合物為底物。以上三組都以不加酶作為空白對(duì)照，反應(yīng)96小時(shí)后取樣，使用硅膠薄層層析技術(shù)(TLC)檢測(cè)底物被氧化的效果，具體設(shè)置如下：

(1)在1000mL pH 5.0的0.05mol/L磷酸二氫鈉-檸檬酸緩沖液中加入0.05mol兒茶素和10U漆酶。對(duì)照為1000mL pH 5.0的0.05mol/L磷酸二氫鈉-檸檬酸緩沖液中加入0.05mol兒茶素。

(2)在1000mL pH 5.0的0.05mol/L磷酸二氫鈉-檸檬酸緩沖液中加入0.05mol對(duì)乙酰氨基酚和10U漆酶。對(duì)照為1000mL pH 5.0的0.05mol/L磷酸二氫鈉-檸檬酸緩沖液中加入0.05mol對(duì)乙酰氨基酚。

(3)在1000mL pH 5.0的0.05mol/L磷酸二氫鈉-檸檬酸緩沖液中加入0.05mol兒茶素、0.05mol對(duì)乙酰氨基酚和10U漆酶。對(duì)照為在1000mL pH 5.0的0.05mol/L磷酸二氫鈉-檸檬酸緩沖液中加入0.05mol兒茶素、0.05mol對(duì)乙酰氨基酚。

(4)將上述實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組置于30℃水浴反應(yīng)96小時(shí)。

(5)用紫外燈觀察或者普魯士藍(lán)染色兩種方法檢測(cè)。

取5μL反應(yīng)液在硅膠GF₂₅₄薄層層析板點(diǎn)樣做薄層層析，展層劑為甲苯:乙酸乙酯:冰醋酸＝5:3:2(v/v/v)，層析結(jié)束后將吹干后的層析板在254nm紫外燈下觀察，結(jié)果如圖1所示。再將層析板使用新制的0.3％氯化鐵和0.3％鐵氰化鉀等體積混合物染色(普魯士藍(lán)染色)，結(jié)果如圖2所示。

圖1是反應(yīng)初始反應(yīng)液紫外觀察TLC(圖a)和反應(yīng)96小時(shí)反應(yīng)液紫外觀察TLC(圖b)對(duì)比圖，其中：1為含兒茶素不含漆酶的反應(yīng)液；2為含兒茶素和漆酶的反應(yīng)液；3為含對(duì)乙酰氨基酚不含漆酶的反應(yīng)液；4為第0小時(shí)含對(duì)乙酰氨基酚不含漆酶的反應(yīng)液；5為含兒茶素、對(duì)乙酰氨基酚不含漆酶的反應(yīng)液；6為兒茶素、對(duì)乙酰氨基酚和漆酶的反應(yīng)液。比較a圖和b圖中的條帶1和條帶2，或a圖和b圖中的條帶3和條帶4，反應(yīng)前后比較，單加一種物質(zhì)(兒茶素或?qū)σ阴０被?，均可被漆酶催化氧化形成高聚物。比較a圖和b圖中的條帶5和條帶6，反應(yīng)前后比較，混有兒茶素的對(duì)乙酰氨基酚殘留量較多，說明對(duì)乙酰氨基酚與兒茶素同時(shí)存在時(shí)，漆酶優(yōu)先催化氧化兒茶素，進(jìn)而保護(hù)對(duì)乙酰氨基酚不被漆酶催化氧化。

圖2是反應(yīng)初始反應(yīng)液普魯士藍(lán)染色(圖a)和反應(yīng)96小時(shí)反應(yīng)液普魯士染色(圖b)對(duì)比圖，其中：1為含兒茶素不含漆酶的反應(yīng)液；2為含兒茶素和漆酶的反應(yīng)液；3為含對(duì)乙酰氨基酚不含漆酶的反應(yīng)液；4為第0小時(shí)含對(duì)乙酰氨基酚不含漆酶的反應(yīng)液；5為含兒茶素、對(duì)乙酰氨基酚不含漆酶的反應(yīng)液；6為兒茶素、對(duì)乙酰氨基酚和漆酶的反應(yīng)液。比較a圖和b圖中的條帶1和條帶2，或a圖和b圖中的條帶3和條帶4，反應(yīng)前后，單加一種物質(zhì)(兒茶素或?qū)σ阴０被?，兒茶素或?qū)σ阴０被泳杀黄崦复呋１容^a圖和b圖中的條帶5和條帶6，兒茶素與對(duì)乙酰氨基酚混合，漆酶優(yōu)先催化氧化兒茶素。

綜上，含對(duì)乙酰氨基酚水溶液中加入兒茶素時(shí)，漆酶優(yōu)先催化氧化兒茶素，保護(hù)對(duì)乙酰氨基酚不被漆酶催化氧化。

實(shí)施例2

在1000mL pH 5.0的0.05mol/L磷酸二氫鈉-檸檬酸緩沖液中加入0.05mol兒茶素、0.05mol對(duì)乙酰氨基酚和10U雙孢菇漆酶，置于30℃反應(yīng)96小時(shí)。反應(yīng)液經(jīng)10000×g離心5分鐘后，取上清。用TLC檢測(cè)上清對(duì)乙酰氨基酚的氧化情況，結(jié)果表明反應(yīng)液中對(duì)乙酰氨基酚未被氧化。

實(shí)施例3

在1000mL pH 7.0的0.05mol/L磷酸二氫鈉-檸檬酸緩沖液中加入0.05mol兒茶素、0.05mol對(duì)乙酰氨基酚和10U香菇漆酶，置于30℃反應(yīng)96小時(shí)。反應(yīng)液經(jīng)10000×g離心5分鐘后，取上清。用TLC檢測(cè)上清對(duì)乙酰氨基酚的氧化情況，結(jié)果表明反應(yīng)液中對(duì)乙酰氨基酚未被氧化。

實(shí)施例4

在1000mL pH 5.0的0.05mol/L磷酸二氫鈉-檸檬酸緩沖液中加入0.05mol兒茶素、0.5mol對(duì)乙酰氨基酚和2000U平菇漆酶，置于30℃反應(yīng)96小時(shí)。反應(yīng)液經(jīng)10000×g離心5分鐘后，取上清。用TLC檢測(cè)上清對(duì)乙酰氨基酚的氧化情況，結(jié)果表明反應(yīng)液中對(duì)乙酰氨基酚未被氧化。

實(shí)施例5

在1000mL pH 7.0的0.05mol/L磷酸二氫鈉-檸檬酸緩沖液中加入0.05mol兒茶素、0.5mol對(duì)乙酰氨基酚和2000U茶樹菇漆酶，置于30℃反應(yīng)96小時(shí)。反應(yīng)液經(jīng)10000×g離心5分鐘后，取上清。用TLC檢測(cè)上清對(duì)乙酰氨基酚的氧化情況，結(jié)果表明反應(yīng)液中對(duì)乙酰氨基酚未被氧化。