本發明屬于中藥制劑領域，具體涉及一種從艾葉中提取制備中藥抗菌制劑的方法。

背景技術：

艾（artemisiaargyil.）是菊科蒿屬的一種多年生草本植物,是一種常用的藥用植物。臨床應用的艾葉，即艾的葉。我國應用艾葉有著非常悠久的歷史,最早出現在公元前的《詩經》中。中醫典籍《黃帝內經》中對于艾葉也有記載。《中國藥典》2015年版收載，艾葉溫經止血，散寒止痛。外用祛濕止癢；用于吐血，衄血，崩漏，月經過多，胎漏下血，少腹冷痛，經寒不調，宮冷不孕；外治皮膚瘙癢。醋艾炭溫經止血，用于虛寒性出血。艾葉的化學成分主要有揮發油、黃酮類、桉葉烷類、三萜類等?，F代藥理研究證明，艾葉具有平喘、鎮咳、祛痰、止血抗凝、抗炎、抗過敏和鎮痛等作用，其揮發油和水提物都有抑菌活性。目前可搜索到的相關文獻與專利，均存在各種不足，如大量使用有機溶劑，除了有易燃易爆風險外，也可能有溶劑殘留，給產品安全性帶來隱患；或者只提取其中揮發油成分，水溶性的有效成分被棄置，造成藥材資源的浪費。專利cn101549001b《艾葉有效組分及其制備方法》，其中記錄艾葉提取方法為：使用乙酸乙酯和乙醇為提取溶劑，提取液再經色譜柱層析洗脫。其中乙酸乙酯就是一種易揮發、易燃、有可能造成刺激性的有機溶劑，會造成安全隱患。且色譜柱層析比較耗時，操作繁雜。cn104337853a《一種艾葉提取物及制備工藝》，這篇專利提出的技術方案是：用乙酸乙酯作為溶劑浸泡提取。同樣有使用大量有機溶劑的問題。并且浸泡法提取通常需要很大的溶劑量和較長的時間。低極性溶劑提取所得的為低極性揮發油成分，而水溶性成分被棄置，提取物不能綜合反映藥材的效果。

技術實現要素：

本發明的目的是提供一種從艾葉中提取制備中藥抗菌制劑的方法，該方法步驟簡單，成本低廉，操作方便，安全、高效地得到同時含有揮發油、黃酮等有效成分的產品；液體制劑用途廣泛；質量可控并且穩定；可用于規模化生產。

本發明所采用的技術方案是：一種從艾葉中提取制備中藥抗菌制劑的方法，包括以下步驟：

步驟一、取艾葉原材料，置于粉碎機中進行粗粉碎，得到艾葉粉末，向艾葉粉末中通入蒸汽，提取揮發油2~5小時，收集揮發油，同時得到艾葉底物，備用；

步驟二、向艾葉底物中加入質量濃度為20%的乙醇溶液，回流提取2~4次，每次加入乙醇溶劑的量為艾葉底物重量的8~12倍，提取時間為1~2小時；

步驟三、提取完成后進行過濾，并對濾液進行減壓濃縮，至相對密度至1以上，得到濃縮液，備用；

步驟四、調節濃縮液的ph至4~5，在0~4℃溫度下冷藏2~4天，過濾，得到艾葉提取儲備液，備用；

步驟五、采用高效液相色譜法分別對揮發油和艾葉提取儲備液中的桉油精和黃酮類化合物進行檢測，然后向艾葉提取儲備液中加水稀釋，并用有機溶劑溶入步驟一收集得到的揮發油，得到混合液，再采用高效液相色譜法對混合液中桉油精和黃酮類化合物進行檢測，使桉油精不少于0.001mg/ml，黃酮類化合物棕矢車菊素與異澤蘭黃素之和不少于0.009mg/ml，即完成中藥抗菌制劑的制備。

作為本發明一種從艾葉中提取制備中藥抗菌制劑的方法的進一步優化，步驟四所述調節濃縮液的ph采用的是稀鹽酸。

作為本發明一種從艾葉中提取制備中藥抗菌制劑的方法的進一步優化，步驟五所述向艾葉提取儲備液中加水稀釋時，水的加入量為艾葉提取儲備液重量的1~10倍。

作為本發明一種從艾葉中提取制備中藥抗菌制劑的方法的進一步優化，步驟五所述的有機溶劑為乙醇、丙二醇中的一種或兩種。

與現有技術相比，本發明至少具有下述優點及有益效果：

本發明的艾葉提取物制備工藝步驟簡單，成本低廉，操作方便，安全、高效地得到同時含有揮發油、黃酮等有效成分的制劑產品，該制劑具有顯著的平喘、鎮咳、祛痰、止血抗凝、抑菌抗炎等作用，液體制劑用途廣泛，且自身具有抑菌作用，質量可控并且穩定；可用于規?；a。

本發明采用20%乙醇為提取溶劑，可明顯提高黃酮類成分的提取效率，同時安全風險大大降低。濃縮液采用稀鹽酸調節ph，能加快雜質聚集，縮短冷藏時間，且當ph為4.14時，黃酮保留率為94.78%。

附圖說明

圖1為桉油精的高效液相色譜檢測譜圖；

圖2為黃酮類化合物棕矢車菊素與異澤蘭黃素的高效液相色譜檢測譜圖。

具體實施方式

為使本發明的內容更明顯易懂，以下結合具體實施例，對本發明進行詳細描述。

一種從艾葉中提取制備中藥抗菌制劑的方法，包括以下步驟：

步驟一、取艾葉原材料，置于粉碎機中進行粗粉碎，得到艾葉粉末，向艾葉粉末中通入蒸汽，提取揮發油2~5小時，收集揮發油，同時得到艾葉底物，備用；

步驟二、向艾葉底物中加入質量濃度為20%的乙醇溶液，回流提取2~4次，每次加入乙醇溶劑的量為艾葉底物重量的8~12倍，提取時間為1~2小時；

步驟三、提取完成后進行過濾，并對濾液進行減壓濃縮，至相對密度至1以上，得到濃縮液，備用；

步驟四、采用稀鹽酸調節濃縮液的ph至4~5，在0~4℃溫度下冷藏2~4天，過濾，得到艾葉提取儲備液，備用；

步驟五、采用高效液相色譜法分別對揮發油和艾葉提取儲備液中的桉油精和黃酮類化合物進行檢測，然后向艾葉提取儲備液中加水稀釋，水的加入量為艾葉提取儲備液重量的1~10倍，并用有機溶劑溶入步驟一收集得到的揮發油，得到混合液，再采用高效液相色譜法對混合液中桉油精和黃酮類化合物進行檢測，使桉油精不少于0.001mg/ml，黃酮類化合物棕矢車菊素與異澤蘭黃素之和不少于0.009mg/ml，即完成中藥抗菌制劑的制備。

步驟五所述的有機溶劑為乙醇、丙二醇中的一種或兩種。

步驟五中所述的高效液相色譜檢測條件：

（1）桉油精

色譜柱：agilentinertsilods-3（250mm×4.6mm，5μm）；

流動相：乙腈-水（70∶30，v/v）；

檢測波長：203nm；

流速：1.0ml/min；

柱溫：30℃；

進樣量：5~10μl。

譜圖如圖1所示。

（2）黃酮類

色譜柱：agilentinertsilods-3（250mm×4.6mm，5μm）；

流動相：乙腈-0.2％磷酸溶液（37∶63，v/v）；

檢測波長：330nm；

流速：1.0ml/min；

柱溫：25℃；

進樣量：5~10μl。

譜圖如圖2所示。

本發明得到的抗菌制劑需冷藏保存，無法保證冷藏條件時需加入防腐劑，如質量濃度為1%的苯氧乙醇、1%nikkogoardol等。

實施例1：

一種從艾葉中提取制備中藥抗菌制劑的方法，包括以下步驟：

步驟一、取艾葉原材料，置于粉碎機中進行粗粉碎，得到艾葉粉末，向艾葉粉末中通入蒸汽，提取揮發油2小時，收集揮發油，同時得到艾葉底物，備用；

步驟二、向艾葉底物中加入質量濃度為20%的乙醇溶液，回流提取2次，每次加入乙醇溶劑的量為艾葉底物重量的8倍，提取時間為1小時；

步驟三、提取完成后進行過濾，并對濾液進行減壓濃縮，至相對密度為1.05，得到濃縮液，備用；

步驟四、采用稀鹽酸調節濃縮液的ph至4.15，在0~4℃溫度下冷藏2天，過濾，得到艾葉提取儲備液，備用；

步驟五、采用高效液相色譜法分別對揮發油和艾葉提取儲備液中的桉油精和黃酮類化合物進行檢測，然后向艾葉提取儲備液中加水稀釋，并用有機溶劑乙醇溶入步驟一收集得到的揮發油，得到混合液，再采用高效液相色譜法對混合液中桉油精和黃酮類化合物進行檢測，使桉油精不少于0.001mg/ml，黃酮類化合物棕矢車菊素與異澤蘭黃素之和不少于0.009mg/ml，即完成中藥抗菌制劑的制備。

經檢測，本發明得到的產品中，桉油精不少于0.0012mg/ml，黃酮類化合物棕矢車菊素與異澤蘭黃素之和為0.0168mg/ml。

實施例2：

一種從艾葉中提取制備中藥抗菌制劑的方法，包括以下步驟：

步驟一、取艾葉原材料，置于粉碎機中進行粗粉碎，得到艾葉粉末，向艾葉粉末中通入蒸汽，提取揮發油3小時，收集揮發油，同時得到艾葉底物，備用；

步驟二、向艾葉底物中加入質量濃度為20%的乙醇溶液，回流提取4次，每次加入乙醇溶劑的量為艾葉底物重量的10倍，提取時間為1.5小時；

步驟三、提取完成后進行過濾，并對濾液進行減壓濃縮，至相對密度為1.06，得到濃縮液，備用；

步驟四、采用稀鹽酸調節濃縮液的ph至4.50，在0~4℃溫度下冷藏4天，過濾，得到艾葉提取儲備液，備用；

步驟五、采用高效液相色譜法分別對揮發油和艾葉提取儲備液中的桉油精和黃酮類化合物進行檢測，然后向艾葉提取儲備液中加水稀釋，并用有機溶劑乙醇溶入步驟一收集得到的揮發油，得到混合液，再采用高效液相色譜法對混合液中桉油精和黃酮類化合物進行檢測，使桉油精不少于0.001mg/ml，黃酮類化合物棕矢車菊素與異澤蘭黃素之和不少于0.009mg/ml，即完成中藥抗菌制劑的制備。

經檢測，本發明得到的產品中，桉油精不少于0.0011mg/ml，黃酮類化合物棕矢車菊素與異澤蘭黃素之和為0.0154mg/ml。

實施例3：

一種從艾葉中提取制備中藥抗菌制劑的方法，包括以下步驟：

步驟一、取艾葉原材料，置于粉碎機中進行粗粉碎，得到艾葉粉末，向艾葉粉末中通入蒸汽，提取揮發油5小時，收集揮發油，同時得到艾葉底物，備用；

步驟二、向艾葉底物中加入質量濃度為20%的乙醇溶液，回流提取3次，每次加入乙醇溶劑的量為艾葉底物重量的8倍，提取時間為2小時；

步驟三、提取完成后進行過濾，并對濾液進行減壓濃縮，至相對密度到1以上，得到濃縮液，備用；

步驟四、采用稀鹽酸調節濃縮液的ph至4.88，在0~4℃溫度下冷藏3天，過濾，得到艾葉提取儲備液，備用；

步驟五、采用高效液相色譜法分別對揮發油和艾葉提取儲備液中的桉油精和黃酮類化合物進行檢測，然后向艾葉提取儲備液中加水稀釋，并用有機溶劑丙二醇溶入步驟一收集得到的揮發油，得到混合液，然后采用高效液相色譜法對混合液中桉油精和黃酮類化合物進行檢測，使桉油精不少于0.001mg/ml，黃酮類化合物棕矢車菊素與異澤蘭黃素之和不少于0.009mg/ml，即完成中藥抗菌制劑的制備。

經檢測，本發明得到的產品中，桉油精不少于0.0013mg/ml，黃酮類化合物棕矢車菊素與異澤蘭黃素之和為0.0158mg/ml。