本發(fā)明涉及家禽育種，具體涉及circacaca的新應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、脂肪肝綜合征（fatty?liver?syndrome，fls）是家禽中最常見的脂類代謝性疾病，普遍發(fā)生于產(chǎn)蛋高峰期體況良好的蛋雞。患病雞產(chǎn)蛋高峰期明顯縮短，產(chǎn)蛋率顯著下降，常伴隨體重的增加，嚴(yán)重時死亡率高達(dá)5%-20%，可對家禽養(yǎng)殖業(yè)造成巨大經(jīng)濟(jì)損失。該病是由遺傳、環(huán)境和代謝應(yīng)激等多種因素共同所致的一類復(fù)雜病理綜合征，目前國內(nèi)外學(xué)者多通過控制能量水平和蛋白質(zhì)攝入及調(diào)控外界環(huán)境來緩解fls的發(fā)病率，然而，至今仍缺乏有效的預(yù)防手段來徹底防止該病的發(fā)生。有研究表明，circrna在脂肪代謝調(diào)控中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。然而，目前尚未見報道circacaca是否及如何通過生物過程調(diào)控fls的病理機(jī)制，此外仍有許多功能性circrna及其具體作用機(jī)制尚未被充分探索，需進(jìn)行深入研究和驗證。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明旨在深入探索circacaca在雞肝臟脂肪性病變中的潛在作用及其分子調(diào)控機(jī)制，以提供新的解決雞fls的思路和方法，因此提出circacaca的新應(yīng)用。

2、為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案為：

3、第一方面，本發(fā)明提供circrna標(biāo)志物在制備fls診斷產(chǎn)品上的應(yīng)用，其特征在于，所述circrna標(biāo)志物選自circacaca、circkmt2e、circahctf1、circmap4k5、circusp45、circrheb、circplxnc1、circqprt中的至少一種。

4、fls診斷產(chǎn)品包括但不限于試劑、試劑盒、芯片等。

5、優(yōu)選地，所述circrna標(biāo)志物為circacaca，或者所述circrna標(biāo)志物為circacaca與circkmt2e、circahctf1、circmap4k5、circusp45、circrheb、circplxnc1、circqprt中的至少一種組合。

6、第二方面，本發(fā)明提供降低或抑制circacaca基因表達(dá)的試劑在制備促進(jìn)雞的肝臟內(nèi)脂質(zhì)代謝平衡和/或增強(qiáng)肝臟細(xì)胞抗氧化應(yīng)激能力和/或減弱肝臟細(xì)胞自噬的產(chǎn)品上的應(yīng)用，所述試劑具有如seq?id?no.?1~?seq?id?no.2所示的序列或者如seq?id?no.?3~seq?id?no.4所示的序列。

7、優(yōu)選地，所述circacaca基因的靶標(biāo)mirna包括mir-132b-5p和mir-101-2-5p，所述mir-132b-5p和所述mir-101-2-5p的共同靶基因為cbfb。

8、第三方面，本發(fā)明提供mir-132b-5p和/或mir-101-2-5p在制備促進(jìn)雞的肝臟內(nèi)脂質(zhì)代謝平衡和/或增強(qiáng)肝臟細(xì)胞抗氧化應(yīng)激能力和/或減弱肝臟細(xì)胞自噬的產(chǎn)品上的應(yīng)用。

9、第四方面，本發(fā)明提供提升或促進(jìn)mir-132b-5p表達(dá)的試劑或者降低mir-132b-5p吸附的試劑在制備促進(jìn)雞的肝臟內(nèi)脂質(zhì)代謝平衡和/或增強(qiáng)肝臟細(xì)胞抗氧化應(yīng)激能力和/或減弱肝臟細(xì)胞自噬的產(chǎn)品上的應(yīng)用，所述試劑具有如seq?id?no.?76所示的序列。

10、第五方面，本發(fā)明提供提升或促進(jìn)mir-101-2-5p表達(dá)的試劑或者降低mir-101-2-5p吸附的試劑在制備促進(jìn)雞的肝臟內(nèi)脂質(zhì)代謝平衡和/或增強(qiáng)肝臟細(xì)胞抗氧化應(yīng)激能力和/或減弱肝臟細(xì)胞自噬的產(chǎn)品上的應(yīng)用，所述試劑具有如seq?id?no.?78所示的序列。

11、第六方面，本發(fā)明提供降低或抑制cbfb基因表達(dá)的試劑在制備促進(jìn)雞的肝臟內(nèi)脂質(zhì)代謝平衡和/或增強(qiáng)肝臟細(xì)胞抗氧化應(yīng)激能力和/或減弱肝臟細(xì)胞自噬的產(chǎn)品上的應(yīng)用，所述試劑具有如seq?id?no.?84~?seq?id?no.85所示的序列。

12、第七方面，本發(fā)明提供一種促進(jìn)雞的肝臟內(nèi)脂質(zhì)代謝平衡和/或增強(qiáng)肝臟細(xì)胞抗氧化應(yīng)激能力和/或減弱肝臟細(xì)胞自噬的產(chǎn)品，其特征在于，包括第二方面、第四方面、第五方面、第六方面所述的試劑或者第三方面所述的mir-132b-5p和/或mir-101-2-5p。

13、第八方面，本發(fā)明提供一種非治療和非診斷目的地促進(jìn)雞的肝臟內(nèi)脂質(zhì)代謝平衡和/或增強(qiáng)肝臟細(xì)胞抗氧化應(yīng)激能力和/或減弱肝臟細(xì)胞自噬的方法，其特征在于，包括：在雞原代肝臟細(xì)胞中轉(zhuǎn)染如seq?id?no.?1~?seq?id?no.2所示的序列，或者轉(zhuǎn)染如seq?idno.?3~seq?id?no.4所示的序列，或者轉(zhuǎn)染如seq?id?no.?76所示的序列，或者轉(zhuǎn)染如seqid?no.?78所示的序列，或者轉(zhuǎn)染如seq?id?no.?84~?seq?id?no.85所示的序列，或者轉(zhuǎn)染mir-132b-5p和/或mir-101-2-5p。

14、和現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果為：

15、1）本發(fā)明獲取了八個差異表達(dá)的circrna：circacaca、circkmt2e、circahctf1、circmap4k5、circusp45、circrheb、circplxnc1、circqprt，均有望作為標(biāo)志物用于fls診斷。

16、2）本發(fā)明通過構(gòu)建circacaca的分子調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，發(fā)現(xiàn)circacaca在雞肝臟內(nèi)顯著高表達(dá)，且主要定位于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)，并且circacaca作為mir-132b-5p和mir-101-2-5p的分子海綿發(fā)揮生物學(xué)功能。mir-132b-5p和mir-101-2-5p可促進(jìn)肝臟內(nèi)脂質(zhì)代謝的平衡，增強(qiáng)肝臟細(xì)胞的抗氧化應(yīng)激能力，同時減弱細(xì)胞自噬的活性。cbfb是mir-132b-5p和mir-101-2-5p的共同靶標(biāo)下游基因。cbfb相似于circacaca，能夠促進(jìn)肝臟細(xì)胞內(nèi)脂滴的累積，減弱細(xì)胞抗氧化應(yīng)激能力，并誘導(dǎo)細(xì)胞自噬的發(fā)生。circacaca通過cerna機(jī)制介導(dǎo)cbfb/pim1復(fù)合體，從而調(diào)控akt/mtor和ppar-γ信號通路，參與家禽肝臟內(nèi)脂肪代謝的調(diào)節(jié)和健康的維持。

17、總之，本發(fā)明為進(jìn)一步深入探索circrna在疾病中的潛在功能提供了新的研究思路和方向。

技術(shù)特征：

1.降低或抑制circacaca基因表達(dá)的試劑在制備促進(jìn)雞的肝臟內(nèi)脂質(zhì)代謝平衡和/或增強(qiáng)肝臟細(xì)胞抗氧化應(yīng)激能力和/或減弱肝臟細(xì)胞自噬的產(chǎn)品上的應(yīng)用，所述試劑具有如seq?id?no.?1~?seq?id?no.2所示的序列或者如seq?id?no.?3~?seq?id?no.4所示的序列。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述circacaca基因的靶標(biāo)mirna包括mir-132b-5p和mir-101-2-5p，所述mir-132b-5p和所述mir-101-2-5p的共同靶基因為cbfb。

3.?mir-132b-5p和/或mir-101-2-5p在制備促進(jìn)雞的肝臟內(nèi)脂質(zhì)代謝平衡和/或增強(qiáng)肝臟細(xì)胞抗氧化應(yīng)激能力和/或減弱肝臟細(xì)胞自噬的產(chǎn)品上的應(yīng)用。

4.?提升或促進(jìn)mir-132b-5p表達(dá)的試劑或者降低mir-132b-5p吸附的試劑在制備促進(jìn)雞的肝臟內(nèi)脂質(zhì)代謝平衡和/或增強(qiáng)肝臟細(xì)胞抗氧化應(yīng)激能力和/或減弱肝臟細(xì)胞自噬的產(chǎn)品上的應(yīng)用，所述試劑具有如seq?id?no.?76所示的序列。

5.?提升或促進(jìn)mir-101-2-5p表達(dá)的試劑或者降低mir-101-2-5p吸附的試劑在制備促進(jìn)雞的肝臟內(nèi)脂質(zhì)代謝平衡和/或增強(qiáng)肝臟細(xì)胞抗氧化應(yīng)激能力和/或減弱肝臟細(xì)胞自噬的產(chǎn)品上的應(yīng)用，所述試劑具有如seq?id?no.?78所示的序列。

6.?降低或抑制cbfb基因表達(dá)的試劑在制備促進(jìn)雞的肝臟內(nèi)脂質(zhì)代謝平衡和/或增強(qiáng)肝臟細(xì)胞抗氧化應(yīng)激能力和/或減弱肝臟細(xì)胞自噬的產(chǎn)品上的應(yīng)用，所述試劑具有如seqid?no.?84~?seq?id?no.85所示的序列。

7.一種促進(jìn)雞的肝臟內(nèi)脂質(zhì)代謝平衡和/或增強(qiáng)肝臟細(xì)胞抗氧化應(yīng)激能力和/或減弱肝臟細(xì)胞自噬的產(chǎn)品，其特征在于，包括權(quán)利要求1、2、4~6任一項所述的試劑或者權(quán)利要求3所述的mir-132b-5p和/或mir-101-2-5p。

8.?一種非治療和非診斷目的地促進(jìn)雞的肝臟內(nèi)脂質(zhì)代謝平衡和/或增強(qiáng)肝臟細(xì)胞抗氧化應(yīng)激能力和/或減弱肝臟細(xì)胞自噬的方法，其特征在于，包括：在雞原代肝臟細(xì)胞中轉(zhuǎn)染如seq?id?no.?1~?seq?id?no.2所示的序列，或者轉(zhuǎn)染如seq?id?no.?3~seq?id?no.4所示的序列，或者轉(zhuǎn)染如seq?id?no.?76所示的序列，或者轉(zhuǎn)染如seq?id?no.?78所示的序列，或者轉(zhuǎn)染如seq?id?no.?84~?seq?id?no.85所示的序列，或者轉(zhuǎn)染mir-132b-5p和/或mir-101-2-5p。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明涉及家禽育種技術(shù)領(lǐng)域，具體提供circACACA的新應(yīng)用。本發(fā)明獲取了八個差異表達(dá)的circRNA，這些circRNA均有望作為標(biāo)志物用于FLS診斷。本發(fā)明還通過構(gòu)建circACACA的分子調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，發(fā)現(xiàn)circACACA在雞肝臟內(nèi)顯著高表達(dá)，且主要定位于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)，并且circACACA作為miR?132b?5p和miR?101?2?5p的分子海綿發(fā)揮生物學(xué)功能。circACACA通過ceRNA機(jī)制介導(dǎo)CBFB/PIM1復(fù)合體，從而調(diào)控AKT/mTOR和PPAR?γ信號通路，參與家禽肝臟內(nèi)脂肪代謝的調(diào)節(jié)和健康的維持。

技術(shù)研發(fā)人員：熊吉,尹華東,趙晶,韓順順,李娟
受保護(hù)的技術(shù)使用者：成都市農(nóng)林科學(xué)院
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/4/28