專利名稱：一種制備南大戟內酯b的方法
技術領域：
本發明屬于天然藥物化學領域，特別是涉及一種采用超臨界CO2萃取和高速逆流色譜分離技術制備南大戟內酯B的方法。
背景技術：
南大戟內酯B為二萜類化合物，mp. 212V (分解)，呈白色針晶狀，分子式C2tlH26O4,分子量330. 42。南大戟內酯B在天然植物中廣泛存在，主要從大戟科植物中分離得到。藥理研究表明，南大戟內酯B具有促進神經生長因子形成的作用，可用于治療脊柱損傷、末梢神經損傷、糖尿病性神經病和肌萎縮外側變硬。另外，還具有抗癌活性，動物體內抗癌活性試驗表明，南大戟內酯B有明顯的抑制S180、艾氏腹水癌、肝癌腹水等細胞生長的活性。其抑制血管細胞粘附分子-I的形成，IC50為O. 2 μ g/mL，可用作轉移抑制劑，用于治療動脈硬化、移植排異、慢性風濕性關節炎和結節病等。目前尚未見大量制備南大戟內酯B的方法報道。

發明內容
本發明的目的在于提供一種制備南大戟內酯B的方法。為了實現上述目的，本發明的技術方案如下
一種制備南大戟內酯B的方法，其特征在于包括以下步驟取南大戟根粉碎過40-60目篩，加入萃取釜中，以體積百分比為75%的乙醇水溶液為夾帶劑，采用超臨界CO2萃取，收集萃取液，回收乙醇后用庚烷脫脂，再以庚烷-乙酸乙酯-乙腈-水為溶劑系統，采用高速逆流色譜分離，流分減壓干燥即得南大戟內酯B。所述超臨界CO2萃取條件為萃取溫度為43-56°C，萃取壓力為25_34MPa，分離釜I溫度為35-45°C，壓力為8-10MPa，分離釜II溫度為25-38°C，壓力為4_7MPa，夾帶劑用量為原料的1-2倍量。所述庚烷-乙酸乙酯-乙腈-水溶劑系統比例為(4-7) :(2-5) :(3-4) :(1-2)。本發明中超臨界CO2萃取時間控制在2-4小時，CO2流量控制在15_22L/h。本發明在高速逆流色譜分離萃取物時，是以溶劑上相為固定相，下相為流動相，乙酸乙酯溶解萃取物，設備轉速控制在700-900 rpm，流動相流速為I. 5-3. Oml/min。本發明優勢在于工藝采用超臨界CO2萃取和高速逆流色譜分離南大戟內酯B，分離過程無產品損失，制備周期短，試劑可以重復利用，制備量大，無廢棄物產生，克服了傳統硅膠柱分離過程中樣品死吸附、工藝繁瑣、重現性差的技術缺陷。
具體實施例方式 下面將結合具體實施方式
進一步說明本發明，但本發明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。實施例I :
取南大戟根粉碎過60目，取3kg原料加入超臨界CO2萃取釜中，開啟設備，調整設備參數萃取溫度為56°C，萃取壓カ為33. 6MPa，分離釜I溫度為45°C，壓カ為9MPa，分離釜II溫度為37°C，壓カ為7MPa。通入CO2流體，達到上述參數后，以CO2液體20L/h流速萃取，并夾帶75%こ醇水溶液6L，動態萃取4h，收集萃取液，回收こ醇，加庚烷脫脂，得到萃取物。取庚烷、こ酸こ酷、こ腈、水，按比例為4:5:3:1混合，取上相泵入分離柱，直至分離柱被固定相灌滿，轉速為850rpm，同時將下相以6ml/min的流速泵入，待流動相從出液端流出且兩相建立動態平衡后，流動相流速調節為2. Oml/min，注入流動相溶解的萃取物，紫外檢測器監測，收集南大戟內酯B流分，連續分離，合并流分減壓干燥得南大戟內酯B，高效液相檢測，含量94. 2%。
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實施例2:
取南大戟根粉碎過40目，取5kg原料加入超臨界CO2萃取釜中，開啟設備，調整設備參數萃取溫度為49°C，萃取壓カ為28MPa，分離釜I溫度為40°C，壓カ為lOMPa，分離釜II溫度為32°C，壓カ為7MPa。通入CO2流體，達到上述參數后，以CO2液體16L/h流速萃取，并夾帶75%こ醇水溶液8L，動態萃取3h，收集萃取液回收こ醇，加庚烷脫脂，得到萃取物。取庚烷、こ酸こ酷、こ腈、水，按比例為7:3:4:2混合，取上相泵入分離柱，直至分離柱被固定相灌滿，轉速為700rpm，同時將下相以4ml/min的流速泵入，待流動相從出液端流出且兩相建立動態平衡后，流動相流速調節為3. Oml/min，注入流動相溶解的萃取物，紫外檢測器監測，收集南大戟內酯B流分，連續分離，合并流分減壓干燥得南大戟內酯B，高效液相檢測，含量92. Tl。實施例3
取南大戟根粉碎過60目，取IOkg原料加入超臨界CO2萃取釜中，開啟設備，調整設備參數萃取溫度為43°C，萃取壓カ為25MPa，分離釜I溫度為35°C，壓カ為8MPa，分離釜II溫度為25°C，壓カ為4MPa。通入CO2流體，達到上述參數后，以CO2液體15L/h流速萃取，并夾帶75%こ醇水溶液10L，動態萃取2h，收集萃取液，回收75%こ醇水溶液，加庚烷脫脂，得到萃取物。取庚烷、こ酸こ酷、こ腈、水，按比例為5:2:3:2混合，取上相泵入分離柱，直至分離柱被固定相灌滿，轉速為900rpm,同時將下相以5ml/min的流速泵入,待流動相從出液端流出且兩相建立動態平衡后，流動相流速調節為I. 5ml/min，注入流動相溶解的萃取物，紫外檢測器監測，收集南大戟內酯B流分，連續分離，合并流分減壓干燥得南大戟內酯B產品，高效液相檢測，含量93. 6%。
權利要求
1.一種制備南大戟內酯B的方法，其特征在于包括以下步驟取南大戟根粉碎過40-60目篩，加入萃取釜中，以體積百分比為75%的乙醇水溶液為夾帶劑，采用超臨界CO2萃取，收集萃取液，回收乙醇后用庚烷脫脂，再以庚烷-乙酸乙酯-乙腈-水為溶劑系統，采用高速逆流色譜分離，流分減壓干燥即得南大戟內酯B。
2.根據權利要求I所述制備南大戟內酯B的方法，其特征在于所述超臨界CO2萃取條件為萃取溫度為43-56°C，萃取壓力為25-34MPa，分離釜I溫度為35_45°C，壓力為8_10MPa，分離釜II溫度為25-38°C，壓力為4-7MPa，夾帶劑用量為原料的1_2倍量。
3.根據權利要求I所述制備南大戟內酯B的方法，其特征在于所述的庚烷-乙酸乙酯-乙腈-水溶劑系統比例為(4-7) :(2-5) :(3-4) :(1-2)。
全文摘要
本發明屬于天然藥物化學領域，涉及一種制備南大戟內酯B的方法。方法步驟如下取南大戟根粉碎過40-60目篩，加入萃取釜中，以體積百分比為75%的乙醇水溶液為夾帶劑，采用超臨界CO2萃取，收集萃取液，回收乙醇后用庚烷脫脂，再以庚烷-乙酸乙酯-乙腈-水為溶劑系統，采用高速逆流色譜分離，流分減壓干燥即得南大戟內酯B。采用本發明制備南大戟內酯B產品，具有無污染、收率高的優點，適用于南大戟內酯B的工業化制備。
文檔編號C07D493/20GK102850374SQ20121036301
公開日2013年1月2日 申請日期2012年9月26日 優先權日2012年9月26日
發明者蘇劉花 申請人:南京澤朗農業發展有限公司