技術總結
本發明提供一種利用CRISPR?Cas9基因編輯方法敲除主胚胎中p66shc的方法，具體的操作步驟包括有：（1）設計?Oligo?DNA?序列，（2）進行Oligo的連接，（3）構建好的質粒轉化與擴增，（4）質粒轉染細胞驗證敲除效率，（5）p66shc基因的CRISPR?Cas9系統構建，（6）豬p66shc基因敲除胚胎生產，（7）p66shc基因敲除結果驗證；采用本方案有效降低體外胚胎培養過程中的ROS水平，從而通過減少體外培養過程中的損傷等，提高豬胚胎體外生產的效率，最終構建有效的豬胚胎體外生產體系。

技術研發人員：胡軍和;晏嬌;李甲梅
受保護的技術使用者：湖南人文科技學院
文檔號碼：201611115252
技術研發日：2016.12.07
技術公布日：2017.05.24