本發明屬于煙草產品加工領域，尤其涉及一種煙葉中綠原酸的提取方法。

背景技術：

綠原酸(Chlorogenic acid)是一種十分重要的藥用活性物質，不僅具有抗菌和抵抗病毒的功能，還具有防止白血球的增加、保護肝臟和膽囊、抗腫瘤、降血壓、清除自由基和興奮中樞神經系統等功能，對消化系統、血液系統和生殖系統疾病均有顯著療效，對金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌、痢疾桿菌、傷寒桿菌有顯著的抑制作用，高純度的綠原酸價格昂貴，是目前國際公認的“植物黃金”。

煙草(Nicotiana tabacum L.)為茄科煙屬一年生草本植物，是一種重要的經濟作物，其在植物學、生命科學、物理化學以及生物技術方面都有廣泛的研究。但每年有大量廢棄煙葉不能用于卷煙生產，既浪費資源，又對環境造成污染。綠原酸在煙葉中的含量高達3％，目前國內主要從金銀花、杜仲、葵花籽中提取綠原酸，其價高量少的原料和產品的巨大需求反差迫使人們尋求更加廣泛的原料，因此，利用廢次煙葉生產綠原酸不僅拓寬綠原酸的原料來源，還可以提高煙草種植戶的附加值，對科學利用煙草具有重要現實意義。此外，我國作為煙草生產大國，每年有30％的低次煙葉、煙末等下腳料被廢棄，這不僅對植物資源是一種浪費，也嚴重污染了環境。如何發揮這些廢棄物的潛在價值和作用，更好地利用煙草資源，提高其經濟價值，已成為近年來的熱點話題，尤其受到醫藥、化工、食品等行業的極大關注。

現有技術中，提取綠原酸的方法主要有：微波提取法、超聲波提取法、酶提取法以及加熱回流法等。其中，微波提取法、超聲波提取法和酶提取法雖然提取效率高，但其成本過高，只適用于實驗室等小規模的提取，在工業化生產過程中具有局限性。因此，現有技術中，煙葉中綠原酸的提取方法具有成本高，不適合于工業化提取的技術缺陷。

因此，研發出一種煙葉中綠原酸的提取方法，用于解決現有技術中，煙葉中綠原酸的提取方法具有成本高，不適合于工業化提取的技術缺陷，成為了本領域技術人員亟待解決的問題。

技術實現要素：

有鑒于此，本發明提供了一種煙葉中綠原酸的提取方法，用于解決現有技術中，煙葉中綠原酸的提取方法具有成本高，不適合于工業化提取的技術缺陷。本發明提供的提取方法，簡單、便捷，成本低廉，適合于大規模的工業化推廣。

本發明提供了一種煙葉中綠原酸的提取方法，所述提取方法為：

步驟一、提取：煙葉與提取劑混合后，回流加熱，得浸提液；

步驟二、濃縮：所述浸提液濃縮后，得濃縮液；

步驟三：提純：所述濃縮液提純，得綠原酸。

優選地，所述提取方法還包括：預處理，所述預處理在所述提取前進行；

所述預處理的方法為：煙葉烘干后，依次經粉碎和過篩，得預處理產品。

優選地，所述烘干的溫度為50～60℃，所述烘干的時間為48～72h，所述預處理產品的粒徑為40目。

優選地，所述提取劑為質量分數為95％的乙醇水溶液，所述提取劑的pH為4～6。

優選地，所述提取方法還包括：抽濾：

所述抽濾在所述步驟一和步驟二之間進行。

優選地，所述回流加熱的溫度為60～80℃，所述回流加熱的時間為75～105min。

優選地，所述濃縮的方法為減壓濃縮，所述減壓濃縮的溫度為40～45℃。

優選地，所述提純的方法為：所述濃縮液靜置后，離心收集上清液，所述上清液依次經冷凍干燥和重結晶，得綠原酸。

優選地，所述靜置的溫度為4℃，所述靜置的時間為12～24h；

所述離心的轉速為12000r/min，所述離心的時間為20～30min；

所述重結晶的溶劑為甲醇。

優選地，所述冷凍干燥的方法為：所述上清液于-40℃～-60℃冷凍0.5～1h后，在-0.05～-0.09MPa和40～60℃條件下干燥。

綜上所述，本發明提供了一種煙葉中綠原酸的提取方法，所述提取方法為：步驟一、提取：煙葉與提取劑混合后，回流加熱，得浸提液；步驟二、濃縮：所述浸提液濃縮后，得濃縮液；步驟三：提純：所述濃縮液提純，得綠原酸。經實驗測定可得，本發明提供的技術方案，提取得到的綠原酸純度可達到87.4％，綠原酸的收率可得1.762％。本發明提供的技術方案中，原料為廢次煙葉，原料成本低，滿足了當今綠色社會廢物利用的宗旨；同時，本發明提供的技術方案，簡單便捷，適合工業化大規模推廣。解決了現有技術中，煙葉中綠原酸的提取方法具有成本高，不適合于工業化提取的技術缺陷。本發明提供的提取方法，簡單、便捷，成本低廉，適合于大規模的工業化推廣。

具體實施方式

本發明提供了一種煙葉中綠原酸的提取方法，用于解決現有技術中，煙葉中綠原酸的提取方法具有成本高，不適合于工業化提取的技術缺陷。本發明提供的提取方法，簡單、便捷，成本低廉，適合于大規模的工業化推廣。

下面將對本發明實施例中的技術方案進行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實施例僅僅是本發明一部分實施例，而不是全部的實施例。基于本發明中的實施例，本領域普通技術人員在沒有做出創造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例，都屬于本發明保護的范圍。

為了更詳細說明本發明，下面結合實施例對本發明提供的一種煙葉中綠原酸的提取方法，進行具體地描述。

實施例1

廢次煙葉于50℃烘箱烘干48h后，置于粉碎機中粉碎，過40目篩，得煙葉粉末1。

10g煙葉粉末1和100mL提取劑1混合，60℃條件下回流加熱75min，得浸提液1。其中，提取劑1為質量濃度為95％的乙醇水溶液，提取劑1的pH為4。

提取劑1抽濾后，所得抽濾液40℃條件下減壓濃縮，得濃縮液1。

濃縮液1在4℃條件下靜置12h后，以12000r/min的轉速離心20min，收集上清液，將離心后的沉淀蒸餾水洗滌后以12000r/min的轉速離心20min，收集上清液；合并兩次所得上清液，得上清液1。

上清液1在-60℃條件下冷凍0.5h后，在-0.09MPa、40℃條件下于真空干燥機中干燥；所得干燥產品用甲醇重結晶，得綠原酸產品1 0.244g。

本實施例中，綠原酸產品1的產率為86.17％，綠原酸產品1的純度為1.726％。

實施例2

廢次煙葉于55℃烘箱烘干60h后，置于粉碎機中粉碎，過40目篩，得煙葉粉末2。

10g煙葉粉末2和120mL提取劑2混合，70℃條件下回流加熱90min，得浸提液2。其中，提取劑2為質量濃度為95％的乙醇水溶液，提取劑2的pH為5。

提取劑2抽濾后，所得抽濾液40℃條件下減壓濃縮，得濃縮液2。

濃縮液2在4℃條件下靜置18h后，以12000r/min的轉速離心25min，收集上清液，將離心后的沉淀蒸餾水洗滌后以12000r/min的轉速離心25min，收集上清液；合并兩次所得上清液，得上清液2。

上清液2在-50℃條件下冷凍0.5h后，在-0.07MPa、50℃條件下于真空干燥機中干燥；所得干燥產品用甲醇重結晶，得綠原酸產品2 0.267g。

本實施例中，綠原酸產品2的產率為91.21％，綠原酸產品2的純度為1.856％。

實施例3

廢次煙葉于60℃烘箱烘干72h后，置于粉碎機中粉碎，過40目篩，得煙葉粉末3。

10g煙葉粉末3和140mL提取劑3混合，80℃條件下回流加熱105min，得浸提液3。其中，提取劑3為質量濃度為95％的乙醇水溶液，提取劑3的pH為6。

提取劑3抽濾后，所得抽濾液45℃條件下減壓濃縮，得濃縮液3。

濃縮液3在4℃條件下靜置24h后，以12000r/min的轉速離心30min，收集上清液，將離心后的沉淀蒸餾水洗滌后以12000r/min的轉速離心30min，收集上清液；合并兩次所得上清液，得上清液3。

上清液3在-40℃條件下冷凍1h后，在-0.05MPa、60℃條件下于真空干燥機中干燥；所得干燥產品用甲醇重結晶，得綠原酸產品3 0.238g。

本實施例中，綠原酸產品3的產率為84.82％，綠原酸產品3的純度為1.703％。

綜上所述，本發明提供了一種煙葉中綠原酸的提取方法，所述提取方法為：步驟一、提取：煙葉與提取劑混合后，回流加熱，得浸提液；步驟二、濃縮：所述浸提液濃縮后，得濃縮液；步驟三：提純：所述濃縮液提純，得綠原酸。經實驗測定可得，本發明提供的技術方案，提取得到的綠原酸純度可達到87.4％，綠原酸的收率可得1.762％。本發明提供的技術方案中，原料為廢次煙葉，原料成本低，滿足了當今綠色社會廢物利用的宗旨；同時，本發明提供的技術方案，簡單便捷，適合工業化大規模推廣。解決了現有技術中，煙葉中綠原酸的提取方法具有成本高，不適合于工業化提取的技術缺陷。本發明提供的提取方法，簡單、便捷，成本低廉，適合于大規模的工業化推廣。

以上所述僅是本發明的優選實施方式，應當指出，對于本技術領域的普通技術人員來說，在不脫離本發明原理的前提下，還可以做出若干改進和潤飾，這些改進和潤飾也應視為本發明的保護范圍。