本發(fā)明涉及一種蟾毒靈衍生物及其制備方法與應(yīng)用，屬于醫(yī)藥。

背景技術(shù)：

1、腫瘤是引起人類死亡的主要原因之一，其發(fā)病率和致死率總體呈上升趨勢，惡性腫瘤己成為城鄉(xiāng)居民死亡的首要原因。可見腫瘤的預(yù)防和治療十分迫切。藥物治療是腫瘤治療的主要手段之一。雖然目前已經(jīng)開發(fā)出眾多抗腫瘤藥物，能夠有效延長患者的生命或提高患者的生存質(zhì)量，但腫瘤的藥物研究和開發(fā)還面臨巨大挑戰(zhàn)，如抗腫瘤藥物多為細(xì)胞毒藥物，其副作用明顯，限制了這些藥物的臨床應(yīng)用。近年來，腫瘤的靶向治療得到了飛速的發(fā)展，諸如伊馬替尼、曲妥珠單抗等靶向腫瘤信號蛋白的藥物在臨床研究中展現(xiàn)出極具前景的治療效果以及較低的毒副作用。然而，獲得性耐藥的出現(xiàn)及腫瘤基因組的多變性，使得靶向治療同樣面臨著巨大的挑戰(zhàn)。

2、蟾酥為蟾蜍科動物中華大蟾蜍(bofo?bufo?andrewsi?schmidt)或黑眶蟾蜍(bufomelanostitus?schneider)的干燥分泌物，是名貴中藥，性辛、溫，有毒，具有解毒、消腫、醒神、開竅、強(qiáng)心和止痛等作用。蟾酥中主要的強(qiáng)心活性成分為蟾毒配基類化合物，蟾毒配基類化合物屬于強(qiáng)心甾體類化合物，目前已經(jīng)有大量的蟾毒配基類化合物被發(fā)現(xiàn)和報道，例如蟾毒靈、脂蟾毒配基、華蟾毒它靈、華蟾毒精等。其中，蟾毒靈，屬強(qiáng)心甙類物質(zhì)，分子式為c24h34o4，結(jié)構(gòu)式如下，是中藥蟾酥中提取的一種活性最強(qiáng)的毒性配基。

3、

4、中國專利文獻(xiàn)cn118845798a（申請?zhí)?02410911116.4）公開了化合物蟾毒靈或其藥學(xué)上可接受的鹽在制備防治結(jié)急性胰腺炎的藥物中的應(yīng)用。中國專利文獻(xiàn)cn118078840a（申請?zhí)?02410315551.0）公開了蟾毒靈在抗腫瘤藥物中的應(yīng)用，蟾毒靈能夠抑制癌癥相關(guān)成纖維細(xì)胞的增殖，ic50濃度為800～1000nm，所述癌癥為結(jié)直腸癌。

5、這些天然的甾體類化合物雖然具有很好地強(qiáng)心活性，但大多也具有較強(qiáng)的心臟毒性和細(xì)胞毒性，嚴(yán)重影響其臨床應(yīng)用。因此，有必要開發(fā)出高效低毒的甾體類化合物。中國專利文獻(xiàn)cn112209985a（申請?zhí)?02010644392.0）公開了一種乙酰蟾毒靈在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用，該乙酰蟾毒靈可以提高抗腫瘤療效，尤其是對于肺癌細(xì)胞具有較好的抑制作用。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供了一種蟾毒靈衍生物及其制備方法與應(yīng)用。

2、本發(fā)明的技術(shù)方案如下：

3、一種蟾毒靈衍生物，其結(jié)構(gòu)式如式ⅰ所示：

4、式ⅰ。

5、上述蟾毒靈衍生物的制備方法，以19-oh蟾毒靈為反應(yīng)底物，經(jīng)氧化反應(yīng)得到19-cho蟾毒靈，即得蟾毒靈衍生物。

6、根據(jù)本發(fā)明優(yōu)選的，所述蟾毒靈衍生物的制備方法，具體包括如下步驟：

7、將19-oh蟾毒靈、tempo（四甲基哌啶氧化物）、tbacl（四丁基氯化銨）依次加入到由二氯甲烷和nahco3-k2co3緩沖水溶液組成的溶劑中，然后加入ncs（n-氯代丁二酰亞胺），攪拌反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后，分離有機(jī)層，用二氯甲烷萃取水相后收集有機(jī)相，經(jīng)洗滌、干燥、純化得到目標(biāo)化合物蟾毒靈衍生物。

8、進(jìn)一步優(yōu)選的，所述19-oh蟾毒靈與溶劑的質(zhì)量體積比為1:(1~2)，mg/ml。

9、進(jìn)一步優(yōu)選的，所述tempo（四甲基哌啶氧化物）與19-oh蟾毒靈的摩爾數(shù)之比為(0.1~0.5):1。

10、進(jìn)一步優(yōu)選的，所述tbacl（四丁基氯化銨）與19-oh蟾毒靈的摩爾數(shù)之比為(0.1~0.5):1。

11、進(jìn)一步優(yōu)選的，所述ncs（n-氯代丁二酰亞胺）與19-oh蟾毒靈的摩爾數(shù)之比為(1.0~1.5):1。

12、進(jìn)一步優(yōu)選的，所述溶劑中二氯甲烷和nahco3-k2co3緩沖水溶液的體積比為1:(0.7~1.2)，所述nahco3-k2co3緩沖水溶液的ph為8.5~9.0。

13、上述蟾毒靈衍生物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。

14、根據(jù)本發(fā)明優(yōu)選的，所述腫瘤包括：胰腺癌、肝癌、腦膠質(zhì)瘤。

15、有益效果：

16、1、本發(fā)明采用tempo氧化反應(yīng)，選擇性地將19-oh蟾毒靈中19位的伯醇氧化為醛，成功合成19-cho蟾毒靈，即得蟾毒靈衍生物。

17、2、本發(fā)明的蟾毒靈衍生物對于胰腺癌bxpc-3細(xì)胞、肝癌hepg2細(xì)胞、腦膠質(zhì)瘤u-87mg細(xì)胞具有顯著的殺傷作用，蟾毒靈衍生物對bxpc-3細(xì)胞的ic50為40.63nm，對hepg2細(xì)胞的ic50為36.74nm，對u-87mg細(xì)胞的ic50為28.73nm，蟾毒靈衍生物對cho-k1細(xì)胞的ic50＞30μm，表明對心臟的毒性較弱，可應(yīng)用于抗胰腺癌、抗肝癌、抗腦膠質(zhì)瘤藥物中的應(yīng)用。

技術(shù)特征：

1.一種蟾毒靈衍生物，其特征在于，其結(jié)構(gòu)式如式ⅰ所示：

2.權(quán)利要求1所述的蟾毒靈衍生物的制備方法，其特征在于，以19-oh蟾毒靈為反應(yīng)底物，經(jīng)氧化反應(yīng)得到19-cho蟾毒靈，即得蟾毒靈衍生物。

3.如權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于，所述蟾毒靈衍生物的制備方法，具體包括如下步驟：

4.如權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述19-oh蟾毒靈與溶劑的質(zhì)量體積比為1:(1~2)，mg/ml。

5.如權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述四甲基哌啶氧化物與19-oh蟾毒靈的摩爾數(shù)之比為(0.1~0.5):1。

6.如權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述四丁基氯化銨與19-oh蟾毒靈的摩爾數(shù)之比為(0.1~0.5):1。

7.如權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述n-氯代丁二酰亞胺與19-oh蟾毒靈的摩爾數(shù)之比為(1.0~1.5):1。

8.如權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述溶劑中二氯甲烷和nahco3-k2co3緩沖水溶液的體積比為1:(0.7~1.2)，所述nahco3-k2co3緩沖水溶液的ph為8.5~9.0。

9.權(quán)利要求1所述的蟾毒靈衍生物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。

10.如權(quán)利要求9所述的應(yīng)用，其特征在于，所述腫瘤包括：胰腺癌、肝癌、腦膠質(zhì)瘤。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明涉及一種蟾毒靈衍生物及其制備方法與應(yīng)用，屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明采用TEMPO氧化反應(yīng)，選擇性地將19?OH蟾毒靈中19位的伯醇氧化為醛，成功合成19?CHO蟾毒靈，即得蟾毒靈衍生物。本發(fā)明的蟾毒靈衍生物對于胰腺癌BxPC?3細(xì)胞、肝癌HepG2細(xì)胞、腦膠質(zhì)瘤U?87MG細(xì)胞具有顯著的殺傷作用，蟾毒靈衍生物對BxPC?3細(xì)胞的IC<subgt;50</subgt;為40.63nM，對HepG2細(xì)胞的IC<subgt;50</subgt;為36.74nM，對U?87MG細(xì)胞的IC<subgt;50</subgt;為28.73nM，蟾毒靈衍生物對CHO?K1細(xì)胞的IC<subgt;50</subgt;＞30μM，表明對心臟的毒性較弱，可應(yīng)用于抗胰腺癌、抗肝癌、抗腦膠質(zhì)瘤藥物中的應(yīng)用。

技術(shù)研發(fā)人員：管玉瑤,鄭磊,宋超,楊靜,靳浩檳
受保護(hù)的技術(shù)使用者：山東省立第三醫(yī)院
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/4/28