本發明屬于植物基因工程，具體涉及一種應用ofnac2基因增加桂花花瓣天然香氣物質芳樟醇含量的方法。

背景技術：

1、芳樟醇(linalool)是從植物中提取到的一種鏈狀萜烯醇類化合物，常溫下為無色的易流動液體，具有鈴蘭香氣、木青香氣和果香。它是芳樟葉油、芳樟油、伽羅木油、玫瑰木油、芫荽子油、白蘭葉油、薰衣草油、玳玳葉油、香檸檬油、香紫蘇油及眾多的花(茉莉花、玫瑰花、玳玳花、橙花、依蘭依蘭花等)等香精油的主要成分之一，也是綠茶香氣的主要成分之一。芳樟醇常用于合成香精、香料，同時芳樟醇入藥用于鎮靜、抗菌和殺蟲，除此之外可作為除臭劑，具有很強的掩蓋不良氣味的能力。

2、桂花(osmanthus?fragrans?lour.)是重要的香花植物，經濟和保健價值極高。桂花中單萜類芳樟醇含量豐富，在各品種中分布廣泛，是桂花中關鍵香氣活性物質。nac轉錄因子家族是植物特有的一類轉錄因子家族，其家族龐大，成員數超過100個，它由兩個結構域組成：一個高度保守的n端nac結合結構域，其參與順式作用元件的特異性結合；另一個是可變的c端結構域，負責轉錄激活的調節。nac轉錄因子主要參與植物生長發育、抗衰、抗逆等生物學過程。因此，研究發掘桂花基因組中促進桂花芳樟醇及其氧化物和各類紫羅酮合成的相關基因具有重要意義，本發明利用生物信息學的技術篩選出桂花中促進桂花芳樟醇合成的基因，并在桂花花瓣中進行功能驗證。

技術實現思路

1、針對現有技術存在的上述問題，本發明提供一種與桂花芳樟醇合成相關的ofnac2基因，過表達所述基因可促進桂花芳樟醇的合成，可用于桂花基因工程中提高桂花天然香氣品質及優良品種選育等工作。

2、為了解決上述技術問題，本發明所采用的技術方案如下：

3、與桂花芳樟醇合成相關的ofnac2基因，所述ofnac2基因的cds序列如seq?id?no.1所示，其編碼蛋白的氨基酸序列如seq?id?no.2所示。

4、含有ofnac2基因的生物材料，包括表達盒、表達載體、重組菌。

5、ofnac2基因的應用，包括：

6、(1)在桂花育種中的應用；

7、(2)在促進桂花天然提取物中關鍵香氣物質芳樟醇含量中的應用。

8、一種促進桂花芳樟醇合成的方法，包括以下步驟：

9、(1)構建含有如seq?id?no.1所示ofnac2基因的超表達載體；

10、(2)將所述的表達載體轉化農桿菌，得到重組表達農桿菌；

11、(3)用所述的重組農桿菌轉化桂花，在桂花中超表達ofnac2基因；

12、優選地，所述步驟(3)中用重組菌轉化桂花花瓣，所述的農桿菌為農桿菌gv3101。

13、相比于現有技術，本發明的有益效果為：

14、本發明提供的一種促進桂花芳樟醇合成相關ofnac2基因是一種nac轉錄因子基因，將含有基因ofnac2的超表達載體轉化到桂花花瓣進行瞬時表達，結果發現，瞬時轉化的桂花花瓣中ofnac2基因表達量顯著增加，花瓣中芳樟醇含量相較于對照組顯著上升，表明ofnac2基因在促進桂花芳樟醇合成方面發揮了重要作用，可用于桂花基因工程中提高觀賞性狀及遺傳品質等繁育工作。

技術特征：

1.與桂花芳樟醇合成相關的ofnac2基因，其特征在于，所述ofnac2基因的cds序列如seq?id?no?.1所示。

2.權利要求1所述ofnac2基因的編碼蛋白，其特征在于，所述蛋白的氨基酸序列如seqid?no.2所示。

3.含有權利要求1所述ofnac2基因的生物材料，其特征在于，所述生物材料包括表達盒、表達載體、重組菌。

4.權利要求1所述的ofnac2基因或權利要求2所述的編碼蛋白或權利要求3所述的生物材料在促進桂花芳樟醇合成中的應用。

5.權利要求1所述的ofnac2基因或權利要求2所述的編碼蛋白或權利要求3所述的生物材料在桂花育種中的應用。

6.一種促進桂花芳樟醇合成的方法，其特征在于，在桂花中超表達權利要求1所述的ofnac2基因。

7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，包括以下步驟：

8.根據權利要求7所述的方法，其特征在于，所述步驟（3）中用重組菌轉化桂花花瓣。

9.根據權利要求7所述的方法，其特征在于，所述的農桿菌為農桿菌gv3101。

技術總結
本發明公開了一種應用OfNAC2基因增加桂花花瓣天然香氣物質芳樟醇含量的方法，所述的OfNAC2基因是一種NAC轉錄因子基因，將含有基因OfNAC2的超表達載體轉化到桂花花瓣進行瞬時表達，結果發現，瞬時轉化的桂花花瓣中OfNAC2基因表達量顯著增加，花瓣中芳樟醇的含量相較于對照組顯著上升，表明OfNAC2在促進桂花芳樟醇合成方面發揮了重要作用，可用于桂花基因工程中提高桂花天然香氣品質及優良品種選育等工作。

技術研發人員：鄭日如,張婷鈺,張若馨,姜夢雨,尤詩玲,楊沁連
受保護的技術使用者：華中農業大學
技術研發日：
技術公布日：2025/4/24