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一種脂肪酶突變體、編碼基因及應(yīng)用

文檔序號:41755527發(fā)布日期:2025-04-29 18:24閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.一種脂肪酶calb突變體,其特征在于,所述突變體由序列如seq?id?no.1所示氨基酸經(jīng)定點突變而來,所述突變的位點為以下一個:(1)第134位天冬氨酸突變?yōu)榻z氨酸。

2.一種核酸分子,其特征在于,所述核酸分子編碼權(quán)利要求1所述的脂肪酶calb突變體。

3.一種重組載體,其特征在于,所述重組載體含有權(quán)利要求1所述的脂肪酶calb突變體的編碼序列。

4.一種重組基因工程菌,其特征在于,所述重組基因工程菌含有權(quán)利要求3所述的重組載體。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種重組基因工程菌,其特征在于,所述重組基因工程菌以大腸桿菌為表達(dá)宿主。

6.如權(quán)利要求1所述的脂肪酶calb突變體在制備(s)-3-環(huán)己烯-1-甲酸中的應(yīng)用。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的應(yīng)用,其特征在于,所述的應(yīng)用為:將磷酸鹽緩沖溶液、3-環(huán)己烯-1-羧酸甲酯、含脂肪酶calb突變體編碼基因的重組基因工程菌經(jīng)發(fā)酵培養(yǎng)獲得的濕菌體或濕菌體經(jīng)超聲破碎后提取的粗酶液混合均勻,進(jìn)行催化反應(yīng),得到(s)-3-環(huán)己烯-1-甲酸。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的應(yīng)用,其特征在于,催化反應(yīng)的反應(yīng)溫度為0~40℃,反應(yīng)時間為2~12h。


技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明屬于生物制藥和生物轉(zhuǎn)化領(lǐng)域,具體涉及一種脂肪酶突變體、編碼基因及應(yīng)用。本發(fā)明的脂肪酶CALB突變體是將如SEQ?ID?NO.1所示氨基酸序列第40位、134位、154位、189位、278位、281位采取單點突變或者組合突變獲得的。該突變體相比于野生型在催化外消旋3?環(huán)己烯?1?甲酸甲酯生產(chǎn)(S)?3?環(huán)己烯?1?甲酸反應(yīng)時的立體選擇性大大提高。相比較于傳統(tǒng)化學(xué)法制備(S)?3?環(huán)己烯?1?甲酸,本發(fā)明提供的脂肪酶CALB突變體立體選擇性高,反應(yīng)條件溫和,對環(huán)境友好,且對設(shè)備要求降低,大大減少了生產(chǎn)成本,在工業(yè)化應(yīng)用中顯示出廣泛的應(yīng)用前景。

技術(shù)研發(fā)人員:柳志強(qiáng),蔡雪,崔杰,鄭裕國
受保護(hù)的技術(shù)使用者:浙江工業(yè)大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日:
技術(shù)公布日:2025/4/28
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