本發明屬于生物，具體涉及一種提高苜蓿授粉率、結莢率的方法。

背景技術：

1、苜蓿是苜蓿屬（ medicagol.）植物的通稱，一年生或多年生草本植物，具有產量高、富含蛋白質、適口性好、適應性強等特點。中國是苜蓿屬植物主要分布地區之一，常見的有紫花苜蓿（ medicago?satival.）和黃花苜蓿（ medicago?falcatal.），是我國人工草地建植和天然草地改良的優良牧草，對我國畜牧業發展具有重要作用。但苜蓿是典型的異花授粉植物，其自交結實率很低。且苜蓿花有著獨特的開放機制，其授粉是一個復雜的過程，常靠外部機械力量和昆蟲采蜜彈開緊包的龍骨瓣而授粉。因此，由于其自交不親和性以及特殊的龍骨瓣結構，自然授粉率很低，落花現象嚴重，種子繁殖難度大。

2、提高苜蓿花期授粉率和結莢率是提高苜蓿產量的關鍵。目前，用于提高苜蓿授粉率和結莢率的可行方法包括昆蟲授粉技術、環境調控技術、人工授粉技術和育種技術。但昆蟲授粉技術通常是通過養殖苜蓿切葉蜂等昆蟲用于苜蓿授粉，昆蟲的活動和繁殖會受到氣候影響，授粉率不穩定，且飼養和管理需要專業技術和設備，大規模應用存在一定難度。環境調控技術需要投入大量的設施建設和能源消耗，且難以精確調控，若對溫度、濕度、光照、風速等調節不當反而容易引起負面影響。人工授粉需要大量的專業設備和人力成本，且效率極低。育種技術目前尚不成熟，且存在時間周期長，技術要求高，研發成本高昂等問題。因此，亟需研究一種簡單、高效，且可以穩定提高苜蓿授粉率和結莢率的方法，以便于解決苜蓿結實率低、種子產量供不應求等問題。

技術實現思路

1、為了解決現有技術中存在的問題，本發明的目的在于提供一種耐鹽短芽胞桿菌（ brevibacillus?halotolerans）eb3，保藏編號為cgmcc?no.33617，可用于提高苜蓿花期授粉率、結莢率和種子產量。

2、本發明的目的還在于提供一種提高苜蓿授粉率和/或結莢率的菌劑組合物、組合物及方法，可提高花粉萌發率，降低小花脫落率，提高苜蓿結莢率和種子產量。

3、為了實現上述發明目的，本發明提供了以下技術方案：

4、本發明提供了一種耐鹽短芽胞桿菌（ brevibacillus?halotolerans）eb3，保藏編號為cgmcc?no.33617。

5、本發明還提供了一種菌劑組合物，包括海洋酵母菌懸液和上述耐鹽短芽胞桿菌eb3的菌懸液。

6、本發明還提供了上述耐鹽短芽胞桿菌eb3或上述菌劑組合物在苜蓿種植中的應用。

7、本發明還提供了一種提高苜蓿授粉率和/或結莢率的組合物，包括花粉營養液和上述菌劑組合物。

8、優選的，所述花粉營養液包括：8~12g/l蔗糖，40~60mg/l硼酸，60~90mg/l氯化鈣，30~50mg/l硫酸鎂，650~840μg/l萘乙酸，520~865μg/l赤霉素和1000~1200μg/l?2,4-d。

9、優選的，所述菌劑組合物中，耐鹽短芽胞桿菌eb3菌懸液的活菌數≥1×108cfu/ml；海洋酵母菌懸液的活菌數為1×1011~9×1011cells/l。

10、本發明還提供了上述提高苜蓿授粉率和/或結莢率的組合物在苜蓿種植中的應用。

11、本發明還提供了一種提高苜蓿授粉率和/或結莢率的方法，采用上述提高苜蓿授粉率和/或結莢率的組合物噴施苜蓿葉面，噴施步驟為：在苜蓿現蕾期噴施耐鹽短芽胞桿菌eb3菌懸液；在苜蓿初花期噴施花粉營養液；在苜蓿盛花期噴施海洋酵母菌懸液。

12、優選的，所述花粉營養液的噴施量為50~70?l/hm2。

13、優選的，所述耐鹽短芽胞桿菌eb3菌懸液的噴施量為45~55?l/畝；所述海洋酵母菌懸液的噴施量為45~55?l/畝。

14、與現有技術相比，本發明的技術方案的有益效果如下：

15、本發明首次得到一株耐鹽短芽胞桿菌（ brevibacillus?halotolerans）eb3，并基于該菌株與海洋酵母菌結合，得到菌劑組合物；本發明進一步提供了一種提高苜蓿授粉率和/或結莢率的組合物及方法，有效解決了苜蓿結實率低、小花敗育、落花嚴重等問題，可顯著提高苜蓿花粉數量和花粉萌發率，降低小花脫落率，從而達到顯著提高苜蓿授粉率和結莢率的效果，提高苜蓿的種子產量。本發明所述方法操作簡單，效果穩定，成本低。

16、生物保藏說明

17、耐鹽短芽胞桿菌（ brevibacillus?halotolerans）eb3，分類命名為耐鹽短芽胞桿菌（ brevibacillus?halotolerans），保藏單位：中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏單位地址：北京市朝陽區北辰西路1號院3號，保藏編號：cgmcc?no.33617，保藏日期2025年02月24日。

技術特征：

1.一種耐鹽短芽胞桿菌（brevibacillus?halotolerans）eb3，其特征在于，保藏編號為cgmcc?no.33617。

2.一種菌劑組合物，其特征在于，包括海洋酵母菌懸液和權利要求1所述的耐鹽短芽胞桿菌eb3的菌懸液。

3.權利要求1所述的耐鹽短芽胞桿菌eb3或權利要求2所述的菌劑組合物在苜蓿種植中的應用。

4.一種提高苜蓿授粉率和/或結莢率的組合物，其特征在于，包括花粉營養液和權利要求2所述的菌劑組合物。

5.根據權利要求4所述的提高苜蓿授粉率和/或結莢率的組合物，其特征在于，所述花粉營養液包括：8~12g/l蔗糖，40~60mg/l硼酸，60~90mg/l氯化鈣，30~50mg/l硫酸鎂，650~840μg/l萘乙酸，520~865μg/l赤霉素和1000~1200μg/l?2,4-d。

6.根據權利要求4所述的提高苜蓿授粉率和/或結莢率的組合物，其特征在于，所述菌劑組合物中，耐鹽短芽胞桿菌eb3菌懸液的活菌數≥1×108?cfu/ml；海洋酵母菌懸液的活菌數為1×1011~9×1011?cells/l。

7.權利要求4~6任意一項所述的提高苜蓿授粉率和/或結莢率的組合物在苜蓿種植中的應用。

8.一種提高苜蓿授粉率和/或結莢率的方法，其特征在于，采用權利要求4~6任意一項所述的提高苜蓿授粉率和/或結莢率的組合物噴施苜蓿葉面，噴施步驟為：在苜蓿現蕾期噴施耐鹽短芽胞桿菌eb3菌懸液；在苜蓿初花期噴施花粉營養液；在苜蓿盛花期噴施海洋酵母菌懸液。

9.根據權利要求8所述的方法，其特征在于，所述花粉營養液的噴施量為50~70?l/hm2。

10.根據權利要求8所述的方法，其特征在于，所述耐鹽短芽胞桿菌eb3菌懸液的噴施量為45~55?l/畝；所述海洋酵母菌懸液的噴施量為45~55?l/畝。

技術總結
本發明提供了一種提高苜蓿授粉率、結莢率的方法，屬于生物技術領域。本發明提供了一株耐鹽短芽胞桿菌（Brevibacillus?halotolerans）EB3，保藏編號為CGMCC?No.33617，并進一步提供由該菌和海洋酵母組成的菌劑組合物，以及由菌劑組合物和花粉營養液組成的組合物，以及利用該組合物提高苜蓿授粉率、結莢率的方法，有效解決了苜蓿結實率低、小花敗育、落花嚴重等問題，可顯著提高苜蓿花粉數量和花粉萌發率，降低小花脫落率，從而達到顯著提高苜蓿的種子產量的作用，且方法操作簡單，效果穩定，成本低。

技術研發人員：陳玲玲
受保護的技術使用者：內蒙古大學
技術研發日：
技術公布日：2025/4/28