本發明屬于現代化農業，具體涉及一株生防解淀粉芽孢桿菌ba200及其應用。

背景技術：

1、大豆是全球重要的糧油作物，其富含的植物蛋白和油脂為人類提供了重要的營養來源，隨著大豆種植面積的增加和大豆連作范圍的擴大，由鐮刀菌和大豆疫霉引起的大豆根腐病已成為危害大豆生產的毀滅性病害，嚴重損害了大豆的經濟效益。這種土傳病害的防控困境在豆科作物中具有普遍性，其中同為重要經濟作物的豇豆面臨著更為嚴峻的挑戰。豇豆作為六大食用豆類作物之一，具有很高的經濟價值。在豇豆種植中，豇豆土傳病害一旦發生，會造成豇豆植株大面積枯萎，嚴重時甚至顆粒無收。其中，豇豆枯萎病是豇豆種植過程中發生最普遍，危害最嚴重、防治最困難的病害。豇豆枯萎病的病原菌主要有尖孢鐮刀菌和豇豆疫霉等，與大豆根腐病相似，這些土傳病原菌在適宜條件下，從植物的根部或者莖基部侵染植物，導致莖基部壞死病變、葉片枯萎，最終導致整株枯萎，甚至死亡。由于豇豆生長過程中病害發生猖獗，過度依賴化學藥劑防治豇豆枯萎病容易導致化學農藥使用過量，農殘超標，因此，研發出可替代化學殺菌劑的生物源殺菌劑用于豇豆枯萎病的防治刻不容緩。

2、生物防治已成為控制土傳病害最有前途的策略之一，因為它能夠保護農田生態環境，提高人類和動物的安全，并延緩病原菌抗藥性的發生和發展。豇豆病害防控中選擇生物防治可以有效減少化學農藥的使用，在防治病害的同時還可以促進植物生長、增加作物產量、顯著提高生態效益和社會效益，是保證豇豆優質高產的重要舉措之一。

3、植物根際促生細菌是生防菌劑的主要來源，目前被應用在生產上的生防細菌主要有假單胞菌、鏈霉菌和芽孢桿菌等，其抗病作用機制包括溶菌作用、競爭作用、拮抗作用和誘導植物抗性作用等，除了抗病作用外，生防菌還具有顯著促進植物生長的能力，如固氮、提高植物對營養物質的利用、釋放植物激素等。其中，芽孢桿菌屬是一種重要的生防細菌，易于從土壤和植物中分離出來，并表現出良好的病害控制效果。這種細菌具有抗逆性強、繁殖迅速、營養需求簡單、易于在植物表面定植等特點，有利于生物防治劑的生產和儲存。在土壤生態恢復中，芽孢桿菌還具有溶磷、解鉀、提高土壤肥力等作用。目前，針對豇豆病害的高效生防菌仍有待開發。

技術實現思路

1、本發明第一方面的目的，在于提供一株解淀粉芽孢桿菌。

2、本發明第二方面的目的，在于提供一種培養物。

3、本發明第三方面的目的，在于提供本發明第二方面的培養物的制備方法。

4、本發明第四方面的目的，在于提供一種菌劑。

5、本發明第五方面的目的，在于提供本發明第四方面的菌劑的制備方法。

6、本發明第六方面的目的，在于提供本發明第一方面的生防菌、第二方面的培養物、第四方面的菌劑的應用。

7、本發明第七方面的目的，在于提供一種產品。

8、本發明第八方面的目的，在于提供一種方法。

9、為了實現本發明上述的目的，本發明采取的技術方案是：

10、本發明的第一個方面，提供一種解淀粉芽孢桿菌ba200，該解淀粉芽孢桿菌ba200的分類命名為解淀粉芽孢桿菌 bacillus?amyloliquefaciens，已于2025年2月24日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心（北京市朝陽區北辰西路1號院3號，中國科學院微生物研究所），保藏編號為cgmcc?no：33636。

11、解淀粉芽孢桿菌ba200的菌落表面粗糙，菌落呈圓形白色，邊緣不整齊，菌落隆起；液體培養靜止時，有菌膜形成；顯微鏡下，菌體呈桿狀，革蘭氏染色結果顯陽性，具有蛋白酶、纖維素酶、β-1,3-葡聚糖抑菌胞外酶活性以及解磷、解鉀、固氮、產生鐵載體和iaa的能力

12、本發明的第二個方面，提供一種培養物，通過培養本發明第一個方面的解淀粉芽孢桿菌ba200得到。

13、在本發明的一些實施方式中，所述培養物是將活化解淀粉芽孢桿菌ba200的單菌落接種到lb液體培養基中，37℃，180?r/min培養24?h得到種子液，取1%比例種子液加入lb液體培養基中繼續擴培至od600=0.6（濃度為1×107cfu/ml）得到的發酵產物。

14、本發明的第三個方面，提供本發明第二個方面的培養物的制備方法，將本發明第一個方面的生防菌ba200接種于培養基，培養，得到；優選地，所述培養基包括lb培養基。

15、在本發明的一些實施方式中，所述培養的溫度為16-42℃；優選地，所述培養的溫度為30~37℃。

16、在本發明的一些實施方式中，所述培養的時間為12~96h；優選地，所述培養的時間為18~36h。

17、在本發明的一些實施方式中，其制備方法是將活化的解淀粉芽孢桿菌ba200的單菌落接種到lb液體培養基中，37℃，180?r/min培養24?h得到種子液，取10%比例種子液加入lb液體培養基中繼續至od600=1.0的菌液作為解淀粉芽孢桿菌ba200的培養物。

18、本發明的第四個方面，提供一種菌劑，包含本發明第一個方面的生防菌ba200和/或本發明第二個方面的培養物。

19、在本發明的一些實施方式中，所述菌劑為固態菌劑或液態菌劑。

20、在本發明的一些實施方式中，所述固態菌劑包含載體。

21、在本發明的一些實施方式中，所述載體包含礦物材料、植物材料中的至少一種。

22、在本發明的一些實施方式中，所述礦物材料包含活性炭、粘土、草炭土、蛭石、滑石、高嶺土、蒙脫石、白碳、沸石、硅石、硅藻土中的至少一種。

23、在本發明的一些實施方式中，所述植物材料包含玉米粉、豆粉和麥麩中的至少一種。

24、在本發明的一些實施方式中，所述液態菌劑包括保護劑。

25、在本發明的一些實施方式中，所述保護劑包括甘油、苯甲酸鹽、山梨酸鹽、聚二醇、吐溫中的一種或多種。

26、在本發明的一些實施方式中，所述菌劑的劑型為液劑、粉劑或顆粒劑中的至少一種。

27、本發明的第五個方面，提供本發明第四個方面的菌劑的制備方法，將本發明第一個方面的解淀粉芽孢桿菌ba200和/或第二個方面的培養物作為活性成分，得到所述菌劑。

28、本發明的第六個方面，提供本發明第一個方面的解淀粉芽孢桿菌ba200、本發明第二個方面的培養物、和/或本發明第三個方面的菌劑在制備防治植物病原菌的產品中的應用。

29、在本發明的一些實施方式中，所述植物病原菌包括大豆疫霉（ phytophthora? sojae）、尖孢鐮刀菌（ fusarium?oxysporum）、豇豆疫霉菌（ phytophthora?vignae）、茄腐鐮刀菌（ fusarium?solani）、立枯絲核菌（ rhizoctonia?solani）、平頭炭疽菌（ colletotrichum?truncatum）、膠孢炭疽菌（ colletotrichum?gloeosporioides）、鏈格孢屬病菌（ alternaria?eichhorniae）、多結孢屬菌（ nodulisporiumsp.）、泛生漆斑菌（ myrothecium?inundatum）和棕櫚疫霉（ phytophthora?palmivora）。

30、上述植物病原菌涉及的疾病包括但不限于：

31、大豆疫霉導致大豆疫霉根腐病、大豆疫病。

32、尖孢鐮刀菌導致枯萎病，寄主范圍廣泛，包括但不限于番茄、香蕉、西瓜、豇豆等。

33、豇豆疫霉菌導致豇豆枯萎病。

34、茄腐鐮刀菌導致根腐病，宿主包括但不限于大豆、豌豆、豇豆等。

35、立枯絲核菌導致立枯病和紋枯病。

36、平頭炭疽菌導致炭疽病。

37、膠孢炭疽菌導致炭疽病。

38、鏈格孢屬病菌導致黑斑病或葉斑病。

39、多結孢屬菌導致賽多孢子菌病。

40、泛生漆斑菌導致葉斑病或莖腐病。

41、棕櫚疫霉導致棕櫚疫霉病。

42、本發明的第七個方面，提供一種產品，包括本發明第一個方面的生防菌ba200、本發明第二個方面的培養物、和/或本發明第三個方面的菌劑。

43、在本發明的一些實施方式中，所述產品包括輔料；所述輔料包括溶劑、著色劑、穩定劑、防腐劑、ph值調節劑、緩沖劑、表面活性劑、發泡劑、消泡劑、增稠劑、載體中的至少一種。

44、在本發明的一些實施方式中，所述產品還可以包括其他抗菌活性成分，包括但不限于抗菌肽、抗生素、或其他生物防治菌。

45、本發明的第八個方面，提供一種防治植物病原菌的方法，包括使用本發明第一個方面的解淀粉芽孢桿菌ba200、本發明第二個方面的培養物、和/或本發明第三個方面的菌劑的步驟。

46、在本發明的一些實施方式中，該方法包括將解淀粉芽孢桿菌ba200的發酵液采取灌根的方式接種到豇豆上，進行豇豆枯萎病的生物防治的步驟。

47、本發明的有益效果是：

48、本發明分離鑒定出一株新的生物防治菌，命名為解淀粉芽孢桿菌（ bacillus? amyloliquefaciens）ba200，該生防菌解淀粉芽孢桿菌ba200已于2024年?月?日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號為cgmcc?no33636。該菌株對引起豇豆枯萎病的兩種主要病原菌尖孢鐮刀菌和豇豆疫霉菌均具有顯著的抑菌能力，生防菌ba200對尖孢鐮刀菌的平均抑制率達到60%以上，對豇豆疫霉的平均抑菌率達到75%以上；此外，生防菌ba200具有廣譜的生物防治作用，對多種植物病原菌如茄腐鐮刀菌、立枯絲核菌、平頭炭疽菌、膠孢炭疽菌、鏈格孢屬菌、多結孢屬菌、大豆疫霉、泛生漆斑菌和棕櫚疫霉等的菌絲生長均有明顯的抑菌效果，并且生防菌ba200具有蛋白酶、纖維素酶、β-1,3-葡聚糖酶抑菌胞外酶活性以及解磷、解鉀、固氮、產生iaa和鐵載體的促生性狀。利用生防菌ba200所制得的發酵液對豇豆植株進行灌根處理可以顯著降低幼苗發病率和病情指數，為制備生防菌劑提供了寶貴資源。