本發明涉及中藥領域，具體為鐵皮石斛定性定量中藥飲片的質量標準、操作規程與制造工藝。
背景技術：
鐵皮石斛(學名：Dendrobii officinalis caulis)，又名：黑節草、云南鐵皮，屬微子目，蘭科多年生附生草本植物，其莖入藥，屬補益藥中的補陰藥。主要分布于中國安徽、浙江、福建等地。我國第一部藥學專著《神農本草經》對鐵皮石斛描述：“味甘，平。主傷中，除痹，下氣，補五臟虛勞贏弱，強陰，久服厚腸胃?！甭櫳倨健⒉毯Ｌm在《鐵皮石斛活性成分及其功能研究進展》中表明經現代科學研究證明，鐵皮石斛中含有的主要活性成分為石斛多糖、石斛堿、氨基酸、芪類及其衍生物以及多種揮發成分，近來從鐵皮石斛中發現了18個新化合物。李宏楊、劉國民、楊志娟、陳冠銘在《鐵皮石斛研究開發綜述與展望》一文中通過對鐵皮石斛的功效、化學成分、產品開發等方面進行綜合分析后認為鐵皮石斛為滋陰效果極佳的名貴中藥材，具有廣闊的發展應用前景。
我國最著名的中醫書籍《本草綱目》詳細的描述了鐵皮石斛的功效：“石斛除痹下氣，補五臟虛勞贏瘦，強陰益精，久服，厚腸胃，補內絕不足，平胃氣，長肌肉，逐皮膚邪熱痱氣，腳膝疼冷痹弱，定志除驚，輕身延年，益氣除熱，治男子腰膝軟弱，健陽，逐皮膚風痹，骨中久冷，補腎益力，壯筋骨，暖水休，益智清氣，治發熱自汗，癰疽排膿內塞。”。據現行版《中國藥典》中記載，其功能與主治為益胃生津，滋陰清熱。用于熱病津傷，口干煩渴，胃陰不足，食少干嘔，病后虛熱不退，陰虛火旺，骨蒸勞熱，目暗不明，筋骨痿軟。呂圭源、顏美秋、陳素紅在《鐵皮石斛功效相關藥理作用研究進展》一文中通過CNKI數據庫檢索，結合鐵皮石斛現代藥理學研究和臨床應用的文獻，總結出鐵皮石斛主要有增強免疫、抗疲勞、抗氧化、促消化、促進唾液分泌、降血糖、降血壓、抗肝損傷、抗腫瘤等方面藥理作用。
從吳韻琴、斯金平的《鐵皮石斛產業現狀及可持續發展的探討》中我們可以知道為實現可持續發展，目前鐵皮石斛多采用人工種植，但人工種植不可避免的存在重金屬超標、農藥殘留超標等質量問題。楊青在《擬除蟲菊酯類農藥在鐵皮石斛中的殘留量研究》中也建議應該完善鐵皮石斛的質量標準，制定與國際接軌的農藥殘留限量標準，以保障用藥安全。本發明就是要解決目前市場上的普遍存在中藥飲片療效不明顯與中藥材因環境污染而重金屬超標、農藥殘留超標等質量問題。
附圖說明
附圖1是鐵皮石斛定性定量中藥飲片生產工藝流程圖。
技術實現要素：
為了解決上述問題，本發明提供的鐵皮石斛定性定量中藥飲片的質量標準與制造工藝，增加對藥屑雜質、重金屬及有害元素、有機氯農藥殘留量、黃曲霉毒素B1、二氧化硫 殘留量的檢測，并將含量測定中的多糖的標準限度從0.90％提高至0.99％，三萜及甾醇的標準限度從0.50％提高至0.55％。并通過特定的工序生產出片厚0.3～1mm的鐵皮石斛中藥飲片，確保中藥飲片符合高標準高品質的要求。
本發明提供的鐵皮石斛定性定量中藥飲片的制造工藝，包括以下步驟：
A10、凈制：清除混在鐵皮石斛中的雜質及霉變品等，或將鐵皮石斛按大小進行分檔，以便達到潔凈或進一步加工處理。注意：鐵皮石斛經凈選后不得直接接觸地面。
A20、潤藥：凈制后的鐵皮石斛放入洗潤池中，噴水堆潤6-8h，至鐵皮石斛徹底潤透，折斷面無干心。注意：鐵皮石斛需潤透，折斷面無干心，鐵皮石斛內外軟硬適宜。
A30、切制：片厚0.3～1mm，按全自動高速切片機操作規程操作，調好刀距，將鐵皮石斛進行試切，用游標卡尺檢測，調整好切制厚度，符合要求后再正式切藥。
A40、干燥：采用熱風循環烘箱進行干燥，將鐵皮石斛鋪于烘箱架子上，攤鋪厚度均勻，厚度在3cm以下。打開開關，開啟加熱開關、風機，在溫度55±2℃進行干燥，在溫度達到設定溫度后干燥6-8h，干燥完畢，關閉加熱開關，繼續吹風，待箱內溫度降下至35～40℃，關閉風機。干燥后崗位人員需填寫中間產品請檢單，交質量部由QA取樣進行水分檢查。
A50、包裝：根據本品包裝規格要求進行包裝。包裝前需對包裝間進行檢查，確認包裝生產線的清場已經完成，并核對包裝材料是否符合要求。內包裝：在設備上調整好需要印制的生產日期、批號，QA監控，稱取規定重量的鐵皮石斛放入料斗中，用封口機封口，要求做到封口嚴密、平整、美觀。外包裝：在設備上調整好需印制的生產日期及批號，QA監控，在外包裝盒子上打印批號、生產日期，打印過程中需注意批號及生產日期是否清晰。將內包裝完成后的飲片及檢驗報告書放入外包盒中，4袋/盒。將每10盒飲片，套入1個熱縮膜中，進行熱收縮；熱收縮后裝入大紙箱中，240盒/箱。操作過程中，QA隨時抽檢。包裝后崗位人員需填寫成品請檢單，交質量部由QA取樣進行產品檢查。
A60、成品：包裝后崗位人員需填寫成品請檢單，交質量部由QA取樣進行產品檢查。
增加藥屑雜質、重金屬及有害元素、有機氯農藥殘留量、黃曲霉毒素B1、二氧化硫殘留量，并將含量測定中的鐵皮石斛多糖的標準限度從25.0％提高至27.5％，甘露糖的標準限度范圍從13.0％～38.0％提高至14.3％～41.8％。修訂后的鐵皮石斛定性定量中藥飲片的質量標準如下所示：
鐵皮石斛飲片
拼音名稱：Tiepishihu Yinpian
包裝：純鋁復合膜包裝。
【性狀】取本品適量，在日光下觀察，本品為不規則薄片，質堅實，易折斷，嗅之，氣微，嘗之，味淡，嚼之有黏性。
鑒別
顯微鑒別
儀器及用具：中藥粉碎機、藥典篩、顯微鏡、酒精燈
試劑及試液：水合氯醛試液、甘油醋酸試液、甘油乙醇試液、稀甘油(試劑均使用分析純，實驗用水為純化水)
測定及結果判定
取本品適量，切片置載玻片上，滴加甘油醋酸試液、水合氯醛試液或其他試液1～2滴，蓋上蓋玻片。必要時滴加水合氯醛試液后，在酒精燈上加熱透化，并滴加甘油乙醇試液或稀甘油，蓋上蓋玻片，于顯微鏡下觀察：
本品橫切面：表皮細胞1列，扁平，外壁及側壁稍增厚、微木化，外被黃色角質層，有的外層可見無色的薄壁細胞組成的葉鞘層?；颈”诮M織細胞多角形，大小相似，其間散在多數維管束，略排成5圈，維管率外韌型，外圍排列有厚壁的纖維束，有的外側小型薄壁細胞中含有硅度塊。含草酸鈣針晶束的黏液細胞多見于近表皮處。
薄層鑒別
儀器及用具：中藥粉碎機、分析天平、藥典篩、超聲波清洗機、點樣器、展開缸、薄層板、電熱恒溫鼓風干燥箱、三用紫外儀
試劑及試液：三氯甲烷、甲醇、甲苯、甲酸乙酯、甲酸、10％硫酸乙醇(試劑均使用分析純，實驗用水為純化水)
對照藥材：鐵皮石斛對照藥材
測定及結果判定
取本品粉末1g，加三氯甲烷-甲醇(9∶1)混合溶液15ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。另取鐵皮石斛對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液，照薄層色譜法(通則0502)試驗，吸取上述兩種溶液各2～5μl，分別點于同硅膠G薄層板上，以甲苯-甲酸乙酯-甲酸(6∶3∶1)為展開劑，展開，取出，烘干，噴以10％硫酸乙醇溶液，在95℃加熱約3分鐘，置紫外光燈(365nm)下檢視。
結果判定：供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
檢查
藥屑、雜質
儀器及用具：中藥粉碎機、分析天平、藥典篩
測定及結果判定：照雜質檢查法(通則2301)測定。取供試品約100g(精確到0.1g)，攤開，揀出雜質，用6號篩篩出藥屑，合并，稱重，計算其在供試品中的量(％)。
結果判定：本品雜質不得過3％。
甘露糖與葡萄糖峰面積比
儀器及用具：同【含量測定】
試劑及試液：同【含量測定】
對照品：葡萄糖對照品
取葡萄糖對照品適量，精密稱定，加水制成每1ml含50mg的溶液，作為對照品溶液。精密吸取0.4ml，按【含量測定】甘露糖項下方法依法測定。
結果判定：供試品色譜中，甘露糖與葡萄糖的峰面積比應為2.4～8.0。
水分
儀器及用具：中藥粉碎機、分析天平、藥典篩、電熱恒溫鼓風干燥箱、稱量瓶
照水分測定法(通則0832第二法)測定。
取供試品2～5g，平鋪于干燥至恒重的扁形稱量瓶中，厚度不超過5mm，疏松供試品不超過10mm，精密稱定，開啟瓶蓋在100～105℃干燥5小時，將瓶蓋蓋好，移置干燥器中，放冷30分鐘，精密稱定，再在上述溫度干燥1小時，放冷，稱重，至連續兩次稱重的差異不超過5mg為止。根據減失的重量，計算供試品中含水量(％)。
結果判定：本品水分不得過12.0％。
總灰分
儀器及用具：中藥粉碎機、分析天平、藥典篩、馬弗爐、電爐、坩堝
照灰分測定法(通則2302)測定。
取供試品2～3g(如須測定酸不溶性灰分，可取供試品3～5g)，置熾灼至恒重的坩堝中，稱定重量(準確至0.01g)，緩緩熾熱，注意避免燃燒，至完全炭化時，逐漸升高溫度至500～600℃，使完全灰化并至恒重。根據殘渣重量，計算供試品中總灰分的含量(％)。
結果判定：本品總灰分不得過6.0％。
重金屬及有害元素
儀器及用具：中藥粉碎機、分析天平、藥典篩、微波消解儀、原子吸收分光光度計
試劑及試液：硝酸、磷酸二氫銨、硝酸鎂、碘化鉀、抗壞血酸、鹽酸、硼氫化鈉、氫氧化鈉、硫酸、高錳酸鉀、鹽酸羥胺(其中硝酸、磷酸二氫銨、硝酸鎂為優級純，其他試劑均使用分析純，實驗用水為純化水)
標準樣品：鉛單元素標準樣品、鎘單元素標準樣品、砷單元素標準樣品、汞單元素標準樣品、銅單元素標準樣品
方法：照鉛、鎘、砷、汞、銅測定法(通則2321)測定
鉛的測定(石墨爐法)
測定條件參考條件：波長283.3nm，干燥溫度100～120℃，持續20秒；灰化溫度400～750℃，持續20～25秒；原子化溫度1700～～2100℃，持續4～5秒。
鉛標準貯備液的制備精密量取鉛單元素標準溶液適量，用2％硝酸溶液稀釋，制成每1ml含鉛(Pb)1μg的溶液，即得(0～5℃貯存)。
標準曲線的制備分別精密量取鉛標準貯備液適量，用2％硝酸溶液制成每1ml分別含鉛0ng、5ng、20ng、40ng、60ng、80ng的溶液。分別精密量取1ml，精密加含1％磷酸二氫銨和0.2％硝酸鎂的溶液0.5ml，混勻，精密吸取20μl注入石墨爐原子化器，測定吸光度，以吸光度為縱坐標，濃度為橫坐標，繪制標準曲線。
供試品溶液的制備A法取供試品粗粉0.5g，精密稱定，置聚四氯乙烯消解罐內，加硝酸3～5ml，混勻，浸泡過夜，蓋好內蓋，旋緊外套，置適宜的微波消解爐內，進行消解(按儀器規定的消解程序操作)。消解完全后，取消解內罐置電熱板上緩緩加熱至紅棕色 蒸氣揮盡，并繼續緩緩濃縮至2～3ml，放冷，用水轉入25ml量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，即得。同法同時制備試劑空白溶液。
測定法精密量取空白溶液與供試品溶液各1ml，精密加含1％磷酸二氫銨和0.2％硝酸鎂的溶液0.5ml，混勻，精密吸取10～20μl，照標準曲線的制備項下方法測定吸光度，從標準曲線上讀出供試品溶液中鉛(Pb)的含量，計算，即得。
鎘的測定(石墨爐法)
測定條件參考條件：波長228.8nm，干燥溫度100～120℃，持續20秒；灰化溫度300～500℃，持續20～25秒；原子化溫度1500～1900℃，持續4～5秒。
鎘標準貯備液的制備精密量取鎘單元素標準溶液適量，用2％硝酸溶液稀釋，制成每1ml含鎘(Cd)1μg的溶液，即得(0～5℃貯存)。
標準曲線的制備分別精密量取鎘標準貯備液適量，用2％硝酸溶液稀釋制成每1ml分別含鎘0ng、0.8ng、2.0ng、4.0ng、6.0ng、8.0ng的溶液。分別精密吸取10μl，注入石墨爐原子化器，測定吸光度，以吸光度為縱坐標，濃度為橫坐標，繪制標準曲線。
供試品溶液的制備同鉛測定項下供試品溶液的制備。
測定法精密吸取空白溶液與供試品溶液各10～20μl，照標準曲線的制備項下方法測定吸光度(若供試品有干擾，可分別精密量取標準溶液、空白溶液和供試品溶液各1ml，精密加含1％磷酸二氫銨和0.2％硝酸鎂的溶液0.5ml，混勻，依法測定)，從標準曲線上讀出供試品溶液中鎘(Cd)的含量，計算，即得。
砷的測定(氫化物法)
測定條件采用適宜的氫化物發生裝置，以含硼氫化鈉和0.3％氫氧化鈉溶液(臨用前配制)作為還原劑，鹽酸溶液(1→100)為載液，氮氣為載氣，檢測波長為193.7nm。
砷標準貯備液的制備精密量取砷單元素標準溶液適量，用2％硝酸溶液稀釋，制成每1ml含砷(As)1μg的溶液，即得(0～5℃貯存)。
標準曲線的制備分別精密量取砷標準貯備液適量，用2％硝酸溶液稀釋制成每1ml分別含砷0ng、5ng、10ng、20ng、30ng、40ng的溶液。分別精密量取10ml，置25ml量瓶中，加25％碘化鉀溶液(臨用前配制)1ml，搖勻，加10％抗壞血酸溶液(臨用前配制)1ml，搖勻，用鹽酸溶液(20→100)稀釋至刻度，搖勻，密塞，置80℃水浴中加熱3分鐘，取出，放冷。取適量，吸入氫化物發生裝置，測定吸收值，以峰面積(或吸光度)為縱坐標，濃度為橫坐標，繪制標準曲線。
供試品溶液的制備同鉛測定項下供試品溶液的制備中的A法制備。
測定法精密吸取空白溶液與供試品溶液各10ml，照標準曲線的制備項下，自“加25％碘化鉀溶液(臨用前配制)1ml”起，依法測定。從標準曲線上讀出供試品溶液中砷(As)的含量，計算，即得。
汞的測定(冷蒸氣吸收法)
測定條件采用適宜的氫化物發生裝置，以含0.5％硼氫化鈉和0.1％氫氧化鈉的溶液(臨用前配制)作為還原劑，鹽酸溶液(1→100)為載液，氮氣為載氣，檢測波長為253.6nm。
汞標準貯備液的制備精密量取汞單元素標準溶液適量，用2％硝酸溶液稀釋，制成每1ml含汞(Hg)1μg的溶液，即得(0～5℃貯存)。
標準曲線的制備分別精密量取汞標準貯備液0ml、0.1ml、0.3ml、0.5ml、0.7ml、0.9ml，置50ml量瓶中，加20％硫酸溶液10ml、5％高錳酸鉀溶液0.5ml，搖勻，滴加5％鹽酸羥胺溶液至紫紅色恰消失，用水稀釋至刻度，搖勻。取適量，吸入氫化物發生裝置，測定吸收值，以峰面積(或吸光度)為縱坐標，濃度為橫坐標，繪制標準曲線。
供試品溶液的制備A法取供試品粗粉0.5g，精密稱定，置聚四氟乙烯消解罐內，加硝酸3～5ml，混勻，浸泡過夜，蓋好內蓋，旋緊外套，置適宜的微波消解爐內進行消解(按儀器規定的消解程序操作)。消解完全后，取消解內罐置電熱板上，于120℃緩緩加熱至紅棕色蒸氣揮盡，并繼續濃縮至2～3ml，放冷，加20％硫酸溶液2ml、5％高錳酸鉀溶液0.5ml，搖勻，滴加5％鹽酸羥胺溶液至紫紅色恰消失，轉入10ml量瓶中，用水洗滌容器，洗液合并于量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，必要時離心，取上清液，即得。同法同時制備試劑空白溶液。
測定法精密吸取空白溶液與供試品溶液適量，照標準曲線制備項下的方法測定從標準曲線上讀出供試品溶液中汞(Hg)的含量，計算，即得。
銅的測定(火焰法)
測定條件檢測波長為324.7nm，采用空氣-乙炔火焰，必要時進行背景校正。
銅標準貯備液的制備精密量取銅單元素標準溶液適量，用2％硝酸溶液稀釋，制成每1ml含銅(Cu)10μg的溶液，即得(0～5℃貯存)。
標準曲線的制備分別精密量取銅標準貯備液適量，用2％硝酸溶液制成每1ml分別含銅0μg、0.05μg、0.2μg、0.4μg、0.6μg、0.8μg的溶液。依次噴入火焰，測定吸光度，以吸光度為縱坐標，濃度為橫坐標，繪制標準曲線。
供試品溶液的制備同鉛測定項下供試品溶液的制備。
測定法精密吸取空白溶液與供試品溶液適量，照標準曲線的制備項下的方法測定。從標準曲線上讀出供試品溶液中銅(Cu)的含量，計算，即得。
結果判定：本品含鉛不得過8mg/kg；鎘不得過0.8mg/kg；砷不得過4mg/kg；汞不得過0.8mg/kg；銅不得過20mg/kg。
有機氯類農藥殘留量
儀器及用具：中藥粉碎機、分析天平、藥典篩、旋轉蒸發儀、超聲波清洗機、離心機、氣相色譜儀
試劑及試液：石油醚(60～90℃)、丙酮、氯化鈉、二氯甲烷、無水硫酸鈉(其中石油醚(60～90℃)為色譜純，其他試劑均使用分析純，實驗用水為純化水)
對照品：α-BHC，β-BHC，γ-BHC，δ-BHC、p，p′-DDE，p，p′-DDD，o，p′-DDT，p，p′-DDT、PCNB農藥對照品
方法：照農藥殘留量測定法(通則0512第一法)測定。
色譜條件與系統適用性試驗以(14％-氰丙基-苯基)甲基聚硅氧烷或(5％苯基)甲基聚硅氧烷為固定液的彈性石英毛細管柱(30m×0.32mm×0.25μm)，63Ni-ECD電子捕獲 檢測器。進樣口溫度230℃，檢測器溫度300℃，不分流進樣。程序升溫：初始100℃，每分鐘10℃升至220℃，每分鐘8℃升至250℃，保持10分鐘。理論板數按α-BHC峰計算應不低于1×106，兩個相鄰色譜峰的分離度應大于1.5。
對照品貯備溶液的制備精密稱取六六六(BHC)(α-BHC，β-BHC，γ-BHC，δ-BHC)、滴滴涕(DDT)(p，p′-DDE，p，p′-DDD，o，p′-DDT，p，p′-DDT)及五氯硝基苯(PCNB)農藥對照品適量，用石油醚(60～90℃)分別制成每1ml約含4～5μg的溶液，即得。
混合對照品貯備溶液的制備精密量取上述各對照品貯備液0.5ml，置10ml量瓶中，用石油醚(60～90℃)稀釋至刻度，搖勻，即得。
混合對照品溶液的制備精密量取上述混合對照品貯備液，用石油醚(60～90℃)制成每1L分別含0μg、1μg、5μg、10μg、50μg、100μg、250μg的溶液，即得。
供試品溶液的制備取供試品，粉碎成粉末(過三號篩)，取約2g，精密稱定，置100ml具塞錐形瓶中，加水20ml浸泡過夜，精密加丙酮40ml，稱定重量，超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用丙酮補足減失的重量，再加氯化鈉約6g，精密加二氯甲烷30ml，稱定重量，超聲15分鐘，再稱定重量，用二氯甲烷補足減失的重量，靜置(使分層)，將有機相迅速移入裝有適量無水硫酸鈉的100ml具塞錐形瓶中，放置4小時。精密量取35ml，于40(℃水浴上減壓濃縮至近干，加少量石油醚(60～90℃)如前反復操作至二氯甲烷及丙酮除凈，用石油醚(60～90℃)溶解并轉移至10ml具塞刻度離心管中，加石油醚(60～90℃)精密稀釋至5ml，小心加入硫酸1ml，振搖1分鐘，離心(3000轉/分鐘)10分鐘，精密量取上清液2ml，置具刻度的濃縮瓶中，連接旋轉蒸發器，40℃下(或用氮氣)將溶液濃縮至適量，精密稀釋至1ml，即得。
測定法分別精密吸取供試品溶液和與之相對應濃度的混合對照品溶液各1μl，注入氣相色譜儀，按外標法計算供試品中9種有機氯農藥殘留量。
結果判定：本品含總六六六(α-BHC、β-BHC、γ-BHC、δ-BHC之和)不得過0.2mg/kg；總滴滴涕(pp′-DDE、pp′-DDD、op′-DDT、pp′-DDT之和)不得過0.2mg/kg；五氯硝基苯不得過0.1mg/kg。
黃曲霉毒素B1
儀器及用具：中藥粉碎機、分析天平、藥典篩、均質瓶、離心機、高效液相色譜儀(配置熒光檢測器及衍生化泵、衍生化保溫箱)
試劑及試液：甲醇、乙腈、碘、氯化鈉、免疫親合柱(其中乙腈為色譜純，其他試劑為分析純，實驗用水為純化水)
對照品：黃曲霉毒素B1對照品
方法：照黃曲霉毒素測定法(通則2351)測定。色譜條件與系統適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-乙腈-水(40∶18∶42)為流動相；采用柱后衍生法檢測，碘衍生法：衍生溶液為0.05％的碘溶液(取碘0.5g，加入甲醇100ml使溶解，用水稀釋至1000ml制成)，衍生化泵流速每分鐘 0.3ml，衍生化溫度70℃以熒光檢測器檢測，激發波長λex＝360nm(或365nm)，發射波長λex＝450nm。兩個相鄰色譜峰的分離度應大于1.5。
混合對照品溶液的制備精密量取黃曲霉毒素B1對照品溶液(標示濃度為1.0μg/ml)0.5ml，置10ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，作為貯備溶液。精密量取貯備溶液1ml，置25ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，即得。
供試品溶液的制備取供試品粉末約15g(過二號篩)，精密稱定，置于均質瓶中，加入氯化鈉3g，精密加入70％甲醇溶液75ml，高速攪拌2分鐘(攪拌速度大于11000轉/分鐘)，離心5分鐘(離心速度2500轉/分鐘)，精密量取上清液15ml，置50ml量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜(0.45μm)濾過，量取續濾液20.0ml，通過免疫親合柱，流速每分鐘3ml，用水20ml洗脫，洗脫液棄去，使空氣進入柱子，將水擠出柱子，再用適量甲醇洗脫，收集洗脫液，置2ml量瓶中，并用甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。
測定法分別精密吸取上述混合對照品溶液5μl、10μl、15μl、20μl、25μl，注入液相色譜儀，測定峰面積，以峰面積為縱坐標，進樣量為橫坐標，繪制標準曲線。另精密吸取上述供試品溶液20～25μl，注入液相色譜儀，測定峰面積，從標準曲線上讀出供試品中相當于黃曲霉毒素B1的量，計算，即得。
結果判定：本品每1000g含黃曲霉毒素B1不得過5μg。
二氧化硫殘留量
儀器及用具：中藥粉碎機、分析天平、藥典篩、電熱套
試劑及試液：過氧化氫、甲基紅乙醇溶液、0.01mol/L氫氧化鈉滴定液、鹽酸溶液(6mol/L)(試劑均使用分析純，實驗用水為純化水)
方法：照二氧化硫殘留量測定法(通則2331)測定。
取藥材或飲片細粉約10g，精密稱定，置兩頸圓底燒瓶中，加水300～400ml。打開回流冷凝管開關給水，將冷凝管的上端E口處連接一橡膠導氣管置于100ml錐形瓶底部。錐形瓶內加入3％過氧化氫溶液50ml作為吸收液(橡膠導氣管的末端應在吸收液液面以下)。使用前，在吸收液中加入3滴甲基紅乙醇溶液指示劑(2.5mg/ml)，并用0.01mol/L氫氧化鈉滴定液滴定至黃色(即終點；如果超過終點，則應舍棄該吸收溶液)。開通氮氣，使用流量計調節氣體流量至約0.2L/min；打開分液漏斗C的活塞，使鹽酸溶液(6mol/L)10ml流入蒸餾瓶，立即加熱兩頸燒瓶內的溶液至沸，并保持微沸；燒瓶內的水沸騰1.5小時后，停止加熱。吸收液放冷后，置于磁力攪拌器上不斷攪拌，用氫氧化鈉滴定液(0.01mol/L)滴定，至黃色持續時間20秒不褪，并將滴定的結果用空白實驗校正。
結果判定：本品二氧化硫殘留量不得過150mg/kg。
浸出物
儀器及用具：中藥粉碎機、分析天平、藥典篩、恒溫水浴鍋、電熱恒溫鼓風干燥箱
試劑及試液：乙醇(試劑使用分析純，實驗用水為純化水)
方法：照醇溶性浸出物測定法(通則2201)項下的熱浸法測定，用乙醇作溶劑。
熱浸法取供試品約2～4g，精密稱定，置100～250ml的錐形瓶中，精密加乙醇50～100ml，密塞，稱定重量，靜置1小時后，連接回流冷凝管，加熱至沸騰，并保持微沸 1小時。放冷后，取下錐形瓶，密塞，再稱定重量，用乙醇補足減失的重量，搖勻，用干燥濾器濾過，精密量取濾液25ml，置已干燥至恒重的蒸發皿中，在水浴上蒸干后，于105℃干燥3小時，置干燥器中冷卻30分鐘，迅速精密稱定重量。除另有規定外，以干燥品計算供試品中醇溶性浸出物的含量(％)。
結果判定：本品醇溶性浸出物不得少于6.5％。
含量測定
多糖
儀器及用具：中藥粉碎機、分析天平、藥典篩、恒溫水浴鍋、紫外可見分光光度計
試劑及試液：苯酚、硫酸(試劑均使用分析純，實驗用水為純化水)
對照品：無水葡萄糖對照品
方法：照紫外-可見分光光度法(通則0401)測定。
對照品溶液的制備取無水葡萄糖對照品適量，精密稱定，加水制成每1ml含90ug的溶液，即得。
標準曲線的制備精密量取對照品溶液0.2ml、0.4ml、0.6ml、0.8ml、1.0ml，分別置10ml具塞試管中，各加水補至1.0ml，精密加入5％苯酚溶液1ml(臨用配制)，搖勻，再精密加硫酸5ml，搖勻，置沸水浴中加熱20分鐘，取出，置冰浴中冷卻5分鐘，以相應試劑為空白，照紫外-可見分光光度法(通則0401)，在488nm的波長處測定吸光度，以吸光度為縱坐標，濃度為橫坐標，繪制標準曲線。
測定法精密量取供試品溶液1ml，置10ml具塞試管中，照標準曲線制備項下的方法，自“精密加入5％苯酚溶液1ml”起，依法測定吸光度，從標準曲線上讀出供試品溶液中無水葡萄糖的量，計算，即得。
結果判定：本品按干燥品計算，含鐵皮石斛多糖以無水葡萄糖(C6H12O6)計，不得少于27.5％。
甘露糖
儀器及用具：中藥粉碎機、分析天平、藥典篩、恒溫水浴鍋、電熱恒溫鼓風干燥箱、高效液相色譜儀
試劑及試液：乙腈、乙酸銨、PMP、甲醇、氫氧化鈉、鹽酸、三氯甲烷、無水乙醇(其中乙腈為色譜純，其他試劑均使用分析純，實驗用水為純化水)
對照品：甘露糖對照品
方法：照高效液相色譜法(通則0512)測定。
色譜條件與系統適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-0.02mol/L的乙酸銨溶液(20∶80)為流動相；檢測波長為250nm。理論板數按甘露糖峰計算應不低于4000。
校正因子測定取鹽酸氨基葡萄糖適量，精密稱定，加水制成每1ml含12mg的溶液，作為內標溶液。另取甘露糖對照品約10mg，精密稱定，置100ml量瓶中，精密加入內標溶液1ml，加水適量使溶解并稀釋至刻度，搖勻，吸取400μl，加0.5mol/L的PMP(1-苯基-3-甲基-5-P比唑啉酮)甲醇溶液與0.3mol/L的氫氧化鈉溶液各400μl，混勻，70℃水浴反 應100分鐘。再加0.3mol/L的鹽酸溶液500μl，混勻，用三氯甲烷洗滌3次，每次2ml，棄去三氯甲烷液，水層離心后，取上清液10μl，注人液相色譜儀，測定，計算校正因子。
測定法取本品粉末(過三號篩)約0.12g，精密稱定，置索氏提取器中，加80％乙醇適量，加熱回流提取4小時，棄去乙醇液，藥渣揮干乙醇，濾紙筒拆開置于燒杯中，加水100ml，再精密加入內標溶液2ml，煎煮小時并時時攪拌，放冷，加水補至約100ml，混勻，離心，吸取上清液1ml，置安瓿瓶或頂空瓶中，加3.0mol/L的鹽酸溶液0.5ml，封口，混勻，110℃水解1小時，放冷，用3.0mol/L的氫氧化鈉溶液調節p H值至中性，吸取400μl，照校正因子測定方法，自“加0.5mol/L的PMP甲醇溶液”起，依法操作，取上清液注入液相色譜儀，測定，即得。
結果判定：本品按干燥品計算，含甘露糖(C6H12O6)應為14.3％～41.8％。
微生物限度
沙門菌取本品10g，以無菌接種至適宜體積(經方法適用性實驗確定)的胰酪大豆胨液體培養基中，混勻，按非無菌產品微生物限度檢查：控制菌檢查法檢查。
結果判定：沙門菌不得檢出(10g)。
耐膽鹽革蘭陰性菌取本品，以無菌胰酪大豆胨液體培養基為稀釋劑，制成1∶10的供試液，混勻，按非無菌產品微生物限度檢查：控制菌檢查法檢查。
結果判定：耐膽鹽革蘭陰性菌應小于104cfu(1g)。