專(zhuān)利名稱(chēng)：培育富硒北冬蟲(chóng)夏草的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種培育富硒冬蟲(chóng)夏草的方法，屬于功能保健品生產(chǎn)技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
硒是人體必需的微量元素，與人體健康息息相關(guān)，硒具有抗癌、保護(hù)心臟、抗肝壞死、防治近視和白內(nèi)障、解毒、提高免疫力、延緩衰老和增強(qiáng)生殖功能等多種藥理作用。具不完全統(tǒng)計(jì)，世界上有40多個(gè)國(guó)家和地區(qū)缺硒，而我國(guó)有72%的地區(qū)屬于缺硒地區(qū)，因此，尋找和開(kāi)發(fā)富硒產(chǎn)品，以保證人體攝入充足的硒，正被各國(guó)科學(xué)工作者關(guān)注。北冬蟲(chóng)夏草又名蛹蟲(chóng)草，在生物分類(lèi)學(xué)上與中華冬蟲(chóng)夏草同屬真菌的子囊菌綱、
蟲(chóng)草屬。蟲(chóng)草素是在1950年從北蟲(chóng)草的培養(yǎng)基中分離出來(lái)的一種3’-脫氧腺嘌呤核苷，它具有顯著的藥理作用，如抑菌作用、抗腫瘤作用、抑制病毒作用，以及增起免疫功能、防治心腦血管疾病等。現(xiàn)代科學(xué)研究表明，蟲(chóng)草素是北冬蟲(chóng)草的重要的活性成分，北冬蟲(chóng)草中蟲(chóng)草素含量為冬蟲(chóng)夏草的數(shù)十倍，是獲得蟲(chóng)草素的主要來(lái)源。目前北冬蟲(chóng)夏草的人工栽培已取得成功，大量的藥理和化學(xué)分析證實(shí)，北冬蟲(chóng)夏草與天然的冬蟲(chóng)夏草成分、藥理基本相同，其功能成分蟲(chóng)草素甚至高于冬蟲(chóng)夏草。北冬蟲(chóng)夏草作為野生蟲(chóng)草的替代品，市場(chǎng)空間大。北冬蟲(chóng)夏草可將硒通過(guò)蟲(chóng)草菌絲細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)的代謝，結(jié)合到大分子活性上，轉(zhuǎn)化為有機(jī)硒多糖和硒蛋白，從而發(fā)揮硒和北冬蟲(chóng)夏草固有的以及協(xié)同的生理作用。目前已有部分專(zhuān)利開(kāi)展人工富硒北冬蟲(chóng)草的培育與生產(chǎn)，“富硒蛹蟲(chóng)草培養(yǎng)方法(專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)?01010252973. 6)”、“一種富硒北冬蟲(chóng)夏草的培育方法(專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)?00710010750. 7)”、“富硒蛹蟲(chóng)草的人工培養(yǎng)方法及子實(shí)體的應(yīng)用(專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)?00610046673. 6)”、“富硒北冬蟲(chóng)夏草人工栽培方法”(專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)?3117344. 2)等技術(shù)方案都是進(jìn)行北冬蟲(chóng)夏草的富硒強(qiáng)化，但上述技術(shù)方案采用的都是在培養(yǎng)基中添加無(wú)機(jī)亞硒酸鹽或噴施含亞硒酸鹽的硒肥營(yíng)養(yǎng)液，采用亞硒酸鹽為硒元素的來(lái)源蟲(chóng)草難以吸收，利用率不高，所以采用上述方法培養(yǎng)的蟲(chóng)草，硒的富集系數(shù)不高，這些技術(shù)方案中培養(yǎng)的北冬蟲(chóng)夏草的子實(shí)體硒含量最高為
3.83 81. 95 u g/g，其對(duì)應(yīng)的栽培料硒濃度為I 32 mg/L，且得到的蟲(chóng)草子實(shí)體其硒形態(tài)中無(wú)機(jī)硒所占的比例較大，難以提高蟲(chóng)草的營(yíng)養(yǎng)和藥用價(jià)值。“一種富硒北冬蟲(chóng)夏草的培育方法”(專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)?01010621575. 7)、“富硒北冬蟲(chóng)夏草母種培育方法”(專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)?01110279521. I)等技術(shù)方案則將硒源進(jìn)行了改進(jìn)，采用有機(jī)硒酵母作為栽培料的硒源，但是有機(jī)硒酵母由于細(xì)胞壁太厚，蟲(chóng)草無(wú)法有效的吸收利用硒，導(dǎo)致硒利用率較低,硒的富集系數(shù)很低，上述技術(shù)方案中采用硒酵母使得培養(yǎng)基硒濃度為50 mg/L，培育的富硒北冬蟲(chóng)夏草硒含量?jī)H為35 50 mg/L。而且有機(jī)硒酵母成本較高，若破壁處理也較為復(fù)雜,且成本也較高，不適合作為硒源培養(yǎng)富硒蟲(chóng)草。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是要提供一種富硒北冬蟲(chóng)夏草的培養(yǎng)方法，用該培養(yǎng)方法相對(duì)于現(xiàn)有技術(shù)培養(yǎng)的北冬蟲(chóng)夏草能大幅度提高北冬蟲(chóng)夏草的子實(shí)體的硒含量，而且，北冬蟲(chóng)夏草子實(shí)體中硒形態(tài)絕大部分為有機(jī)硒，硒形態(tài)安全。上述發(fā)明的目的是通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的，包括如下流程步驟
(1)在PDA固體培養(yǎng)基進(jìn)行菌種活化，冰箱中保存的優(yōu)良菌種，每?jī)蓚€(gè)月在PDA固體
培養(yǎng)基上活化一次；
(2)北冬蟲(chóng)夏草菌種的硒馴化利用一系列的含硒濃度為I 50mg/kg的液體培養(yǎng)基對(duì)北蟲(chóng)草菌種進(jìn)行硒馴化，最后得到耐受濃度下的北冬蟲(chóng)夏草菌種，然后在硒濃度為20mg/kg的液體培養(yǎng)基中擴(kuò)大培養(yǎng)作為栽培料原種。其中液體培養(yǎng)基的配方為粉狀葡萄糖20 g、黃豆粉10 g、維生素BI 50 mg、硫酸鎂2 g、磷酸二氫鉀3 g、食用味精lg、食鹽2 g、水1000 ml。然后根據(jù)設(shè)計(jì)的液體培養(yǎng)基的硒濃度加入2. 19 109. 5 mg的含硒物質(zhì)形成硒濃度為I 50 mg/kg的液體培養(yǎng)基。上述的含硒物質(zhì)可以是亞硒酸鹽、硒酸鹽、高硒植物或微生物中的一種或幾種； (3)富硒北冬蟲(chóng)夏草的栽培料添加劑的制備采用無(wú)機(jī)硒經(jīng)過(guò)二次生物轉(zhuǎn)化的植物性含硒材料作為原料，經(jīng)過(guò)粉碎、篩選、干燥作為栽培過(guò)程中的硒源，在此基礎(chǔ)上設(shè)計(jì)出栽培富硒北冬蟲(chóng)夏草所需的栽培料添加劑。上述的富硒植物材料可以是天然或經(jīng)人工強(qiáng)化的高硒小麥粉、高硒玉米粉、高硒黃豆粉、高硒西蘭花粉、高硒紫云英粉或高硒苜蓿花粉中的一種或幾種混合；
(4)子實(shí)體富硒培養(yǎng)a、子實(shí)體富硒培養(yǎng)基的配方如下它由大米、硒酸鹽、谷蛋白水解液組成；谷蛋白水解液系是富含蛋氨酸、胱氨酸和半胱氨酸的麥類(lèi)或稻米谷蛋白的酶解水溶液；按重量分?jǐn)?shù)比大米重量分?jǐn)?shù)20 25份，谷蛋白水解液30 35份，富硒植物材料粉I 10份，其形成的培養(yǎng)基硒濃度為I 20 mg/kg ;b、子實(shí)體富硒培養(yǎng)方法在上述配方的子實(shí)體富硒培養(yǎng)基內(nèi)接入上述經(jīng)過(guò)硒馴化的原種，培養(yǎng)時(shí)間40 50天，其中的發(fā)菌期管理菌絲培養(yǎng)溫度控制在10 25°C，空氣濕度60% 70%，完全黑暗條件培養(yǎng)；轉(zhuǎn)色期管理培養(yǎng)溫度在18 26°C，每天光照時(shí)間10小時(shí)以上，同時(shí)進(jìn)行連續(xù)變溫刺激，晝夜溫差在10 20之間；子實(shí)體生長(zhǎng)階段管理料面上出現(xiàn)菌蕾后，溫度適當(dāng)降低，控制在19 230C，空氣濕度80% 90%，光照刺激，促進(jìn)子實(shí)體形成，且生長(zhǎng)強(qiáng)壯、色澤鮮艷；采收當(dāng)子實(shí)體高度達(dá)到5— 8 Cm，約50%子實(shí)體頂端膨大即可采收烘干。其中，上述的富硒植物材料可以是天然或經(jīng)人工強(qiáng)化的高硒小麥粉、高硒玉米粉、高硒黃豆粉、高硒西蘭花粉、高硒紫云英粉或高硒苜蓿花粉中的一種或幾種混合。上述的富硒北冬蟲(chóng)夏草培養(yǎng)方法，其方法之一是PDA固體培養(yǎng)基配方如下它是由土豆、葡萄糖、KH2P04、瓊脂、水組成，按重量份數(shù)比土豆150 250份，葡萄糖15 25份，KH2P04 I. 7 2. 3份，瓊脂13 20份，水950 980份。本發(fā)明有益效果表現(xiàn)在
首先在北冬蟲(chóng)夏草的母種培養(yǎng)上就進(jìn)行硒馴化，使其能夠適應(yīng)高濃度的硒環(huán)境，進(jìn)行硒的積累和吸收，這種環(huán)境下得到的富硒菌種其吸收利用硒的效率高，更利于蟲(chóng)草從培養(yǎng)基中累積砸；
其次，采用天然或經(jīng)人工強(qiáng)化的植物材料作為硒源，其中的硒絕大部分都為有機(jī)硒，其對(duì)北冬蟲(chóng)夏草的毒害作用更小，且更利于蟲(chóng)草的吸收利用，相對(duì)于其他無(wú)機(jī)硒或酵母硒，可以達(dá)到更加的累積效果，相對(duì)于現(xiàn)有技術(shù)中的富硒栽培中富集系數(shù)一般小于1，本發(fā)明中硒的富集系數(shù)可達(dá)4. 85倍，且子實(shí)體硒濃度和栽培料硒濃度兩者之間呈線性關(guān)系，線性方程為y=4.86x (R2=0. 98)，栽培得到的子實(shí)體總硒含量可達(dá)4 100 mg/kg，且硒形態(tài)中有機(jī)硒比例高達(dá)90%以上，在富集倍數(shù)和吸收轉(zhuǎn)化效率上均有較大的提高。
具體實(shí)施例方式以下實(shí)施例用于說(shuō)明本發(fā)明，但不能用來(lái)限制本發(fā)明的范圍。實(shí)施例中采用的實(shí)施條件可以根據(jù)具體廠家的條件作進(jìn)一步調(diào)整，未說(shuō)明的實(shí)施條件通常為常規(guī)實(shí)驗(yàn)中的條件。實(shí)施例I :硒濃度為I 10 mg/kg下北冬蟲(chóng)夏草的硒馴化
(1)在PDA培養(yǎng)基上進(jìn)行菌種的活化，冰箱中保存的優(yōu)良菌種，每?jī)蓚€(gè)月在PDA固體培養(yǎng)基上活化一次；PDA培養(yǎng)基配方按重量分?jǐn)?shù)比經(jīng)過(guò)去皮煮汁取濾液的土豆200 g，葡萄糖 20 g, KH2P04 2 g，瓊脂 15 g，水 970 ml ； (2)北冬蟲(chóng)夏草菌種的硒馴化利用含硒濃度為I 10mg/kg的液體培養(yǎng)基對(duì)北蟲(chóng)草菌種進(jìn)行硒馴化，最后得到耐受濃度下的北冬蟲(chóng)夏草菌種，其中液體培養(yǎng)基的配方為粉狀葡萄糖20 g、黃豆粉10 g、維生素BI 50 mg、硫酸鎂2 g、磷酸二氫鉀3 g、食用味精lg、食鹽2 g、水1000 ml。然后根據(jù)設(shè)計(jì)的液體培養(yǎng)基的硒濃度加入2. 19 21. 9 mg的亞硒酸鈉形成硒濃度為I 10 mg/kg的液體培養(yǎng)基。實(shí)施例2 :硒濃度為I 30 mg/kg下北冬蟲(chóng)夏草的硒馴化
(1)在PDA培養(yǎng)基上進(jìn)行菌種的活化，冰箱中保存的優(yōu)良菌種，每?jī)蓚€(gè)月在PDA固體培養(yǎng)基上活化一次；PDA培養(yǎng)基配方按重量分?jǐn)?shù)比經(jīng)過(guò)去皮煮汁取濾液的土豆200 g，葡萄糖 20 g, KH2P04 2 g，瓊脂 15 g，水 970 ml ；
(2)北冬蟲(chóng)夏草菌種的硒馴化利用含硒濃度為I 30mg/kg的液體培養(yǎng)基對(duì)北蟲(chóng)草菌種進(jìn)行硒馴化，最后得到耐受濃度下的北冬蟲(chóng)夏草菌種，其中液體培養(yǎng)基的配方為粉狀葡萄糖20 g、黃豆粉10 g、維生素BI 50 mg、硫酸鎂2 g、磷酸二氫鉀3 g、食用味精lg、食鹽2 g、水1000 ml。然后根據(jù)設(shè)計(jì)的液體培養(yǎng)基的硒濃度加入2. 19 65. 7 mg的硒酸鈉形成硒濃度為I 30 mg/kg的液體培養(yǎng)基。實(shí)施例3 :硒濃度為I 50 mg/kg下北冬蟲(chóng)夏草的硒馴化
(1)在PDA培養(yǎng)基上進(jìn)行菌種的活化，冰箱中保存的優(yōu)良菌種，每?jī)蓚€(gè)月在PDA固體培養(yǎng)基上活化一次；PDA培養(yǎng)基配方按重量分?jǐn)?shù)比經(jīng)過(guò)去皮煮汁取濾液的土豆200 g，葡萄糖 20 g, KH2P04 2 g，瓊脂 15 g，水 970 ml ；
(2)北冬蟲(chóng)夏草菌種的硒馴化利用含硒濃度為I 50mg/kg的液體培養(yǎng)基對(duì)北蟲(chóng)草菌種進(jìn)行硒馴化，最后得到耐受濃度下的北冬蟲(chóng)夏草菌種，其中液體培養(yǎng)基的配方為粉狀葡萄糖20 g、黃豆粉10 g、維生素BI 50 mg、硫酸鎂2 g、磷酸二氫鉀3 g、食用味精lg、食鹽2 g、水1000 ml。然后根據(jù)設(shè)計(jì)的液體培養(yǎng)基的硒濃度加入2. 19 109. 5 mg的酵母硒形成硒濃度為I 50 mg/kg的液體培養(yǎng)基。實(shí)施例4 :北冬蟲(chóng)夏草子實(shí)體的富硒培養(yǎng)
(1)在PDA培養(yǎng)基上進(jìn)行菌種的活化，冰箱中保存的優(yōu)良菌種，每?jī)蓚€(gè)月在PDA固體培養(yǎng)基上活化一次；PDA培養(yǎng)基配方按重量分?jǐn)?shù)比經(jīng)過(guò)去皮煮汁取濾液的土豆200 g，葡萄糖 20 g, KH2P04 2 g，瓊脂 15 g，水 970 ml ；
(2)子實(shí)體富硒培養(yǎng)a、子實(shí)體富硒培養(yǎng)基的配方如下它由大米、由富硒玉米粉配置的添加劑、稻米谷蛋白的酶水解液；按重量分?jǐn)?shù)比大米重量份數(shù)25份、谷蛋白水解液形成的溶液重量份數(shù)35份、富硒玉米粉I份，最終形成硒濃度為I mg/kg的富硒培養(yǎng)基；
b、子實(shí)體富硒培養(yǎng)方法在上述的子實(shí)體富硒培養(yǎng)基內(nèi)接入經(jīng)過(guò)硒馴化的得到的富硒蟲(chóng)草菌種，接入的菌種重量是子實(shí)體富硒培養(yǎng)基的5 %;培養(yǎng)時(shí)間45天。經(jīng)過(guò)發(fā)菌管理、轉(zhuǎn)色管理和子實(shí)體生長(zhǎng)階段管理，最終培養(yǎng)得到北冬蟲(chóng)夏草的子實(shí)體，采收即可；
(3)實(shí)施效果
經(jīng)過(guò)檢測(cè)，北冬蟲(chóng)夏草的生物量與普通對(duì)照組相比，略有提高，但不明顯，子實(shí)體總硒含量為4. 79 mg/kg (DW)，是普通栽培組的10倍，硒形態(tài)主要以各種硒代氨基酸為主，有機(jī)硒所占比例達(dá)90 %以上，子實(shí)體在生長(zhǎng)周期中，含硒量的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差可控制在15%以?xún)?nèi)，可實(shí)現(xiàn)均勻富硒栽培。
實(shí)施例5 :北冬蟲(chóng)夏草子實(shí)體的富硒培養(yǎng)
(1)在PDA培養(yǎng)基上進(jìn)行菌種的活化，冰箱中保存的優(yōu)良菌種，每?jī)蓚€(gè)月在PDA固體培養(yǎng)基上活化一次；PDA培養(yǎng)基配方按重量分?jǐn)?shù)比經(jīng)過(guò)去皮煮汁取濾液的土豆200 g，葡萄糖 20 g, KH2P04 2 g，瓊脂 15 g，水 970 ml ；
(2)子實(shí)體富硒培養(yǎng)
a、子實(shí)體富硒培養(yǎng)基的配方如下它由大米、由富硒小麥粉配置的添加劑、稻米谷蛋白的酶水解液；按重量分?jǐn)?shù)比大米重量份數(shù)25份、谷蛋白水解液形成的溶液重量份數(shù)30份、富硒小麥粉5份，最終形成硒濃度為10 mg/kg的富硒培養(yǎng)基；
b、子實(shí)體富硒培養(yǎng)方法在上述的子實(shí)體富硒培養(yǎng)基內(nèi)接入經(jīng)過(guò)硒馴化的得到的富硒蟲(chóng)草菌種，接入的菌種重量是子實(shí)體富硒培養(yǎng)基的5 %;培養(yǎng)時(shí)間45天。經(jīng)過(guò)發(fā)菌管理、轉(zhuǎn)色管理和子實(shí)體生長(zhǎng)階段管理，最終培養(yǎng)得到北冬蟲(chóng)夏草的子實(shí)體，采收即可；
(3)實(shí)施效果
經(jīng)過(guò)檢測(cè)，北冬蟲(chóng)夏草的生物量與普通對(duì)照組相比，略有提高，但不明顯，子實(shí)體總硒含量為48. 2 mg/kg(DW)，硒形態(tài)主要以各種硒代氨基酸為主，有機(jī)硒所占比例達(dá)90 %以上，子實(shí)體在生長(zhǎng)周期中，含硒量的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差可控制在15%以?xún)?nèi)，可實(shí)現(xiàn)均勻富硒栽培。實(shí)施例6 :北冬蟲(chóng)夏草子實(shí)體的富硒培養(yǎng)
(1)在PDA培養(yǎng)基上進(jìn)行菌種的活化，冰箱中保存的優(yōu)良菌種，每?jī)蓚€(gè)月在PDA固體培養(yǎng)基上活化一次；PDA培養(yǎng)基配方按重量分?jǐn)?shù)比經(jīng)過(guò)去皮煮汁取濾液的土豆200 g，葡萄糖 20 g, KH2P04 2 g，瓊脂 15 g，水 970 ml ；
(2)子實(shí)體富硒培養(yǎng)
a、子實(shí)體富硒培養(yǎng)基的配方如下它由大米、由富硒黃豆粉配置的添加劑、稻米谷蛋白的酶水解液；按重量分?jǐn)?shù)比大米重量份數(shù)20份、谷蛋白水解液形成的溶液重量份數(shù)30份、富硒黃豆粉10份，最終形成硒濃度為20 mg/kg的富硒培養(yǎng)基；
b、子實(shí)體富硒培養(yǎng)方法在上述的子實(shí)體富硒培養(yǎng)基內(nèi)接入經(jīng)過(guò)硒馴化的得到的富硒蟲(chóng)草菌種，接入的菌種重量是子實(shí)體富硒培養(yǎng)基的5 %;培養(yǎng)時(shí)間45天。經(jīng)過(guò)發(fā)菌管理、轉(zhuǎn)色管理和子實(shí)體生長(zhǎng)階段管理，最終培養(yǎng)得到北冬蟲(chóng)夏草的子實(shí)體，采收即可；
(3)實(shí)施效果
經(jīng)過(guò)檢測(cè)，北冬蟲(chóng)夏草的生物量與普通對(duì)照組相比，略有提高，但不明顯，子實(shí)體總硒含量為97. 02 mg/kg (DW)，硒形態(tài)主要以各種硒代氨基酸為主，有機(jī)硒所占比例達(dá)90 %以上，子實(shí)體在生長(zhǎng)周期中，含硒量的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差可控制在15%以?xún)?nèi)，可實(shí)現(xiàn)均勻富硒栽培。實(shí)施例7 :北冬蟲(chóng)夏草子實(shí)體的富硒培養(yǎng)
(1)在PDA培養(yǎng)基上進(jìn)行菌種的活化，冰箱中保存的優(yōu)良菌種，每?jī)蓚€(gè)月在PDA固體培養(yǎng)基上活化一次；PDA培養(yǎng)基配方按重量分?jǐn)?shù)比經(jīng)過(guò)去皮煮汁取濾液的土豆200 g，葡萄糖 20 g, KH2P04 2 g，瓊脂 15 g，水 970 ml ；
(2)子實(shí)體富硒培養(yǎng)
a、子實(shí)體富硒培養(yǎng)基的配方如下它由大米、由富硒西蘭花粉配置的添加劑、稻米谷蛋白的酶水解液；按重量分?jǐn)?shù)比大米重量份數(shù)20份、谷蛋白水解液形成的溶液重量份數(shù)30份、富硒西蘭花粉10份，最終形成硒濃度為30 mg/kg的富硒培養(yǎng)基；
b、子實(shí)體富硒培養(yǎng)方法在上述的子實(shí)體富硒培養(yǎng)基內(nèi)接入經(jīng)過(guò)硒馴化的得到的富硒蟲(chóng)草菌種，接入的菌種重量是子實(shí)體富硒培養(yǎng)基的5 %;培養(yǎng)時(shí)間45天。經(jīng)過(guò)發(fā)菌管理、轉(zhuǎn)色管理和子實(shí)體生長(zhǎng)階段管理，最終培養(yǎng)得到北冬蟲(chóng)夏草的子實(shí)體，采收即可；
(3)實(shí)施效果
經(jīng)過(guò)檢測(cè)，北冬蟲(chóng)夏草的生物量與普通對(duì)照組相比，略有提高，但不明顯，子實(shí)體總硒含量為146. 58 mg/kg (DW)，硒形態(tài)主要以各種硒代氨基酸為主，有機(jī)硒所占比例達(dá)90 %以上，子實(shí)體在生長(zhǎng)周期中，含硒量的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差可控制在15%以?xún)?nèi)，可實(shí)現(xiàn)均勻富硒栽培。
權(quán)利要求
1.一種培育富硒北冬蟲(chóng)夏草的方法，其特征在于包括以下步驟(1)冬蟲(chóng)夏草菌種對(duì)硒的耐受性馴化；(2)富硒培養(yǎng)基的配制和接種；(3)對(duì)子實(shí)體的富硒培養(yǎng)。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的培育富硒北冬蟲(chóng)夏草的方法，其特征在于所述進(jìn)行硒的耐受性馴化的培養(yǎng)基除了基礎(chǔ)培養(yǎng)基外，還包括濃度為I 50 mg/kg的含硒物質(zhì)。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的培育富硒北冬蟲(chóng)夏草的方法，其特征在于所述含硒物質(zhì)為亞硒酸鹽、硒酸鹽、高硒植物或微生物中的一種或幾種。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的培育富硒北冬蟲(chóng)夏草的方法，其特征在于所述進(jìn)行硒的耐受性馴化的培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基，其配方為粉狀葡萄糖20 g、黃豆粉10 g、維生素BI 50mg、硫酸鎂2 g、磷酸二氫鉀3 g、食用味精lg、食鹽2 g、水1000 ml，并加入硒濃度為I 50 mg/kg的亞硒酸鈉。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述的培育富硒北冬蟲(chóng)夏草的方法，其特征在于所述富硒培養(yǎng)基中的硒源物質(zhì)是經(jīng)過(guò)二次生物轉(zhuǎn)化的高硒植物材料。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的培育富硒北冬蟲(chóng)夏草的方法，其特征在于所述富硒植物材料可以是天然或經(jīng)人工強(qiáng)化的高硒小麥粉、高硒玉米粉、高硒黃豆粉、高硒西蘭花粉、高硒紫云英粉或高硒苜蓿花粉中的一種或幾種混合。
7.根據(jù)權(quán)利要求I所述的培育富硒北冬蟲(chóng)夏草的方法，其特征在于所述富硒培養(yǎng)基的配方為大米、硒酸鹽、谷蛋白水解液；其中谷蛋白水解液系是富含蛋氨酸、胱氨酸和半胱氨酸的麥類(lèi)或稻米谷蛋白的酶解水溶液；按重量分?jǐn)?shù)比大米重量分?jǐn)?shù)20 25份，谷蛋白水解液30 35份，富硒植物材料粉I 10份，其形成的培養(yǎng)基硒濃度為I 20 mg/kg。
8.根據(jù)權(quán)利要求I所述的培育富硒北冬蟲(chóng)夏草的方法，其特征在于所述對(duì)子實(shí)體富硒培養(yǎng)的方法為在富硒培養(yǎng)基內(nèi)接入經(jīng)過(guò)硒馴化的原種，培養(yǎng)時(shí)間40 50天，其中的發(fā)菌期管理菌絲培養(yǎng)溫度控制在10 25°C，空氣濕度60% 70%，完全黑暗條件培養(yǎng)；轉(zhuǎn)色期管理培養(yǎng)溫度在18 26°C，每天光照時(shí)間10小時(shí)以上，同時(shí)進(jìn)行連續(xù)變溫刺激，晝夜溫差在10 20之間；子實(shí)體生長(zhǎng)階段管理料面上出現(xiàn)菌蕾后，溫度適當(dāng)降低，控制在19 23°C，空氣濕度80% 90%，光照刺激，促進(jìn)子實(shí)體形成，且生長(zhǎng)強(qiáng)壯、色澤鮮艷；采收當(dāng)子實(shí)體高度達(dá)到5— 8 Cm，約50%子實(shí)體頂端膨大即可采收烘干。
9.根據(jù)權(quán)利要求I所述的培育富硒北冬蟲(chóng)夏草的方法，其特征在于進(jìn)行冬蟲(chóng)夏草菌種對(duì)硒的耐受性馴化之前在PDA固體培養(yǎng)基進(jìn)行菌種活化，冰箱中保存的優(yōu)良菌種，每?jī)蓚€(gè)月在PDA固體培養(yǎng)基上活化一次。
10.根據(jù)權(quán)利要求I所述的培育富硒北冬蟲(chóng)夏草的方法，其特征在于包含以下步驟(I)在PDA固體培養(yǎng)基進(jìn)行菌種活化；(2)北冬蟲(chóng)夏草菌種的硒馴化利用一系列的含硒濃度為I 50 mg/kg的液體培養(yǎng)基對(duì)北蟲(chóng)草菌種進(jìn)行硒馴化，最后得到耐受濃度下的北冬蟲(chóng)夏草菌種，然后在硒濃度為20 mg/kg的液體培養(yǎng)基中擴(kuò)大培養(yǎng)作為栽培料原種；其中液體培養(yǎng)基的配方為粉狀葡萄糖20 g、黃豆粉10 g、維生素BI 50 mg、硫酸鎂2 g、磷酸二氫鉀·3 g、食用味精lg、食鹽2 g、水1000 ml ;然后根據(jù)設(shè)計(jì)的液體培養(yǎng)基的硒濃度加入2. 19 ·109. 5 mg的亞硒酸鈉形成硒濃度為I 50 mg/kg的液體培養(yǎng)基；(3)富硒北冬蟲(chóng)夏草的栽培料添加劑的制備采用富硒玉米粉作為原料，經(jīng)過(guò)粉碎、篩選、干燥作為栽培過(guò)程中的硒源，在此基礎(chǔ)上設(shè)計(jì)出栽培富硒北冬蟲(chóng)夏草所需的栽培料添加劑；(4)子實(shí)體富硒培養(yǎng)a、子實(shí)體富硒培養(yǎng)基的配方如下它由大米、硒酸鹽、谷蛋白水解液組成；谷蛋白水解液系是富含蛋氨酸、胱氨酸和半胱氨酸的麥類(lèi)或稻米谷蛋白的酶解水溶液；按重量分?jǐn)?shù)比大米重量分?jǐn)?shù)20 25份，谷蛋白水解液30 35份，富硒玉米粉I 10份，其形成的培養(yǎng)基硒濃度為I 20 mg/kg ;b、子實(shí)體富硒培養(yǎng)方法在上述配方的子實(shí)體富硒培養(yǎng)基內(nèi)接入上述經(jīng)過(guò)硒馴化的原種，培養(yǎng)時(shí)間40 50天，其中的發(fā)菌期管理菌絲培養(yǎng)溫度控制在10 250C，空氣濕度 60% 70%，完全黑暗條件培養(yǎng)；轉(zhuǎn)色期管理培養(yǎng)溫度在18 26°C，每天光照時(shí)間10小時(shí)以上，同時(shí)進(jìn)行連續(xù)變溫刺激，晝夜溫差在10 20之間；子實(shí)體生長(zhǎng)階段管理料面上出現(xiàn)菌蕾后，溫度適當(dāng)降低，控制在19 23°C，空氣濕度80% 90%，光照刺激，促進(jìn)子實(shí)體形成，且生長(zhǎng)強(qiáng)壯、色澤鮮艷；采收當(dāng)子實(shí)體高度達(dá)到5— 8 Cm，約50%子實(shí)體頂端膨大即可采收烘干。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種培育富硒北冬蟲(chóng)夏草的方法，包括以下步驟(1)冬蟲(chóng)夏草菌種對(duì)硒的耐受性馴化；(2)富硒培養(yǎng)基的配制和接種；(3)對(duì)子實(shí)體的富硒培養(yǎng)。本發(fā)明可以使富硒冬蟲(chóng)夏草培育效果從現(xiàn)有技術(shù)中的富集系數(shù)小于1提升到4.85以上，栽培得到的子實(shí)體總硒含量可達(dá)4～100mg/kg，且硒形態(tài)中有機(jī)硒比例高達(dá)90%以上，在富集倍數(shù)和吸收轉(zhuǎn)化效率上均有較大的提高。
文檔編號(hào)A01G1/04GK102771314SQ20121029010
公開(kāi)日2012年11月14日 申請(qǐng)日期2012年8月15日 優(yōu)先權(quán)日2012年8月15日
發(fā)明者羅磊 申請(qǐng)人:蘇州硒谷科技有限公司