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一種黃金甲組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基及方法與流程

文檔序號:12072573閱讀:來源:國知局

技術特征:

1.一種黃金甲組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基,其特征在于,包括初代培養(yǎng)基、第一繼代培養(yǎng)基、第二繼代培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基;

所述初代培養(yǎng)基為:含有0.05~0.2mg/L KT、0.06~0.2mg/L NAA、30g/L蔗糖、7g/L瓊脂、12~18mL/L大蒜汁和8~11mL/L椰汁的WPM培養(yǎng)基,pH值為5.9;

所述第一繼代培養(yǎng)基為:含有0.5~2mg/L KT、0.01~0.1mg/L TDZ、0.02~0.2mg/L NAA、30g/L蔗糖、7g/L瓊脂、50mL~150mL/L番茄汁和15mL~25mL/L香蕉汁的WPM培養(yǎng)基,pH值為5.9;

所述第二繼代培養(yǎng)基為:含有0.1~0.7mg/L KT、0.05~0.2mg/L GA3、0.04~0.2mg/L NAA、30g/L蔗糖、7g/L瓊脂的WPM培養(yǎng)基,pH值為5.9;

所述生根培養(yǎng)基為:含有5~7g/L瓊脂和15~25g/L蔗糖的WPM培養(yǎng)基,pH值為5.9。

2.根據(jù)權利要求1所述的培養(yǎng)基,其特征在于,所述初代培養(yǎng)基為:含有0.1mg/L KT、0.1mg/L NAA、30g/L蔗糖、7g/L瓊脂、15mL/L大蒜汁和10mL/L椰汁的WPM培養(yǎng)基;

所述第一繼代培養(yǎng)基為:含有0.5mg/L KT、0.01mg/L TDZ、0.2mg/L NAA、30g/L蔗糖、7g/L瓊脂、100mL/L番茄汁和20mL/L香蕉汁的WPM培養(yǎng)基;

所述第二繼代培養(yǎng)基為:含有0.3mg/L KT、0.05mg/L GA3、0.04mg/L NAA、30g/L蔗糖、7g/L瓊脂的WPM培養(yǎng)基;

所述生根培養(yǎng)基為:含有7g/L瓊脂和20g/L蔗糖的WPM培養(yǎng)基。

3.一種黃金甲的組織培養(yǎng)方法,其特征在于,包括如下步驟:

將黃金甲外植體接種到初代培養(yǎng)基進行初代培養(yǎng),得到芽眼開始萌動的外植體;

將芽眼開始萌動的外植體轉接到第一繼代培養(yǎng)基進行第一次繼代培養(yǎng),得到芽眼分化完成的外植體;

將芽眼分化完成的外植體轉接到第二繼代培養(yǎng)基進行第二次繼代培養(yǎng),得到叢生芽;

將叢生芽轉接到生根培養(yǎng)基進行生根培養(yǎng),得到組培苗;

所述初代培養(yǎng)基為:含有0.05~0.2mg/L KT、0.06~0.2mg/L NAA、30g/L蔗糖、7g/L瓊脂、12~18mL/L大蒜汁和8~11mL/L椰汁的WPM培養(yǎng)基,pH值為5.9;

所述第一繼代培養(yǎng)基為:含有0.5~2mg/L KT、0.01~0.1mg/L TDZ、0.02~0.2mg/L NAA、30g/L蔗糖、7g/L瓊脂、50mL~150mL/L番茄汁和15mL~25mL/L香蕉汁的WPM培養(yǎng)基,pH值為5.9;

所述第二繼代培養(yǎng)基為:含有0.1~0.7mg/L KT、0.05~0.2mg/L GA3、0.04~0.2mg/L NAA、30g/L蔗糖、7g/L瓊脂的WPM培養(yǎng)基,pH值為5.9;

所述生根培養(yǎng)基為:含有5~7g/L瓊脂和15~25g/L蔗糖的WPM培養(yǎng)基,pH值為5.9。

4.根據(jù)權利要求3所述的組織培養(yǎng)方法,其特征在于,所述將黃金甲外植體接種到初代培養(yǎng)基進行初代培養(yǎng)之前還包括:采取黃金甲的帶芽一年生健康枝條,去掉葉片保留葉柄,進行消毒處理,然后切成有一對芽或一個頂芽的長0.5~1.0cm小段。

5.根據(jù)權利要求3或4所述的組織培養(yǎng)方法,其特征在于,所述黃金甲的帶芽一年生健康枝條的采取時間為每年5~6月。

6.根據(jù)權利要求4或5所述的組織培養(yǎng)方法,其特征在于,所述消毒處理具體為:將去掉葉片的黃金甲枝條用水和NaClO溶液清洗,然后用酒精和氯化汞溶液消毒,再用水清洗。

7.根據(jù)權利要求6所述的組織培養(yǎng)方法,其特征在于,所述NaClO溶液的質(zhì)量百分濃度0.1%;所述酒精的體積百分濃度為75%,酒精消毒的時間為20s;所述氯化汞溶液的質(zhì)量百分濃度為0.1%,氯化汞溶液的消毒時間為5min。

8.根據(jù)權利要求3至7中任一項所述的組織培養(yǎng)方法,其特征在于,所述黃金甲組織培養(yǎng)的光照周期為12h/d,光照強度為3500lx,培養(yǎng)溫度為25℃,相對濕度為48%。

9.根據(jù)權利要求3至8中任一項所述的組織培養(yǎng)方法,其特征在于,所述得到組培苗后還包括煉苗的步驟。

10.根據(jù)權利要求9所述的組織培養(yǎng)方法,其特征在于,所述煉苗為:將組培苗打開瓶蓋通風2d,洗掉根部附著的培養(yǎng)基,晾干水分后栽植至培養(yǎng)土中,噴施含有多菌靈和代鋅蒙森混合液,放置背光處,覆膜保濕,保持溫度在15~20℃之間;待長出新葉后將苗挪至向陽處,并逐漸去掉覆膜,30~50d后轉入正常養(yǎng)護。

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