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一種獨角石斛的組織培養方法與流程

文檔序號:11867040閱讀:來源:國知局

技術特征:

1.一種獨角石斛的組織培養方法,其特征在于,包括以下步驟:

(1)取獨角石斛的果莢進行消毒和預處理,先用體積分數為2%的洗潔精水溶液浸泡5min后,用流水沖洗15-30min,然后將獨角石斛的果莢灼燒2次,每次灼燒5-10s后,得到外植體;

(2)將所述外植體切開,取出種子后接種到第一培養基中,在第一培養基中培養20-30天,得到無菌試管苗;

(3)將所述無菌試管苗置于第二培養基中,在第二培養基中培養50~70天,得到試管苗叢生芽;

(4)將所述試管苗叢生芽置于壯苗培養基中,在壯苗培養基中培養20-40天,得到試管苗;

(5)將所述試管苗置于生根培養基中,在生根培養基中培養30-50天,得到組培苗;

(6)煉苗:將所述組培苗和培養所述組培苗的培養瓶一起移出培養室,打開培養瓶瓶蓋,向培養瓶中加入30mL的自來水后,自然光照3-5d;

(7)煉苗結束后,從培養瓶中取出所述組培苗,將所述組培苗的根部洗凈后移栽至基質中。

2.根據權利要求1所述的獨角石斛的組織培養方法,其特征在于,步驟(1)中將獨角石斛的果莢灼燒2次的具體方法為:在無菌超凈臺內將獨角石斛的果莢用無菌鑷夾住,在整個果莢表面沾染體積分數為75%的酒精,然后灼燒,將酒精燒盡后再重復灼燒1次。

3.根據權利要求1所述的獨角石斛的組織培養方法,其特征在于,步驟(2)中所述的第一培養基中包括:MS、3.0mg/L的6-芐基氨嘌呤、2.0mg/L的萘乙酸和3g/L的活性炭。

4.根據權利要求1所述的獨角石斛的組織培養方法,其特征在于,步驟(3)中所述的第二培養基中包括:MS、0.5-2.0mg/L的甲巰達嗪、0.5-1.5mg/L的萘乙酸和0.2-0.5mg/L的激動素。

5.根據權利要求1所述的獨角石斛的組織培養方法,其特征在于,步驟(4)中所述的壯苗培養基中包括:MS、1.0-4.0mg/L的6-芐氨基腺嘌呤和1.0-4.0mg/L的萘乙酸。

6.根據權利要求1所述的獨角石斛的組織培養方法,其特征在于,步驟(5)中所述的生根培養基中包括:1/2MS和20g/L的土豆泥,所述的土豆泥為將土豆攪碎后得到。

7.根據權利要求1所述的獨角石斛的組織培養方法,其特征在于,所述的第一培養基、所述的第二培養基、所述的壯苗培養基以及所述的生根培養基中還含有5g/L的瓊脂和30g/L蔗糖,且所述第一培養基、所述第二培養基、所述壯苗培養基以及所述生根培養基的初始pH值均為5.8。

8.根據權利要求1所述的獨角石斛的組織培養方法,其特征在于,步驟(2)-(5)中的培養均為控制光照培養條件為:培養溫度23-27℃,光照強度1500lux,光照時間為8-10h/d。

9.根據權利要求1所述的獨角石斛的組織培養方法,其特征在于,步驟(7)中所述的基質中樹皮、腐殖質土與水苔的體積比為1:1:1。

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