靈芝白果功能性食品及其制備方法
【專利摘要】本發明公開了靈芝白果功能性食品及其制備方法，該工藝涉及生物工程【技術領域】。以銀杏白果為主要原料采用菌種液體深層培養和固體發酵技術靈芝白果功能性食品。白果切成3－5mm小塊，滅菌后接入5～30%靈芝種子液，用保鮮膜密封發酵，發酵物經過烘干和粉碎、即為靈芝銀杏功能性食品。該制品含總黃酮0.3~2mg/g，銀杏內脂0.2~1.5mg/g，靈芝三萜0.8～3.9mg/g，蛋白質0.9～8mg/g，可溶性糖<0.5%，多糖1~15mg/g，銀杏酚酸<5ug/g，氫氰酸<0.1μg/g。該產品中由于含有黃酮類化合物，萜類以及靈芝三萜等活性成分，因而具有抑制腫瘤細胞繁殖和降低體內氧化壓力之功效。
【專利說明】靈芝白果功能性食品及其制備方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及生物工程【技術領域】，特指利用靈芝采用液體技術擴大靈芝菌種數量，然后通過固體發酵技術轉化銀杏白果生產靈芝銀杏白果功能性食品的方法和該食品的用途。
【背景技術】
[0002]銀杏白果的主要成分是蛋白質、淀粉和脂肪，另外含有黃酮、萜類化合物、銀杏酸、氫化白果酸、氫化白果亞酸、銀杏醇、白果酚和多糖。我國中醫古書，一直將白果列為重要藥材，白果酸抑制多種桿菌及皮膚真菌，并對葡萄球菌、鏈球菌、白喉、炭瘟桿菌，枯草芽孢桿菌、大腸桿菌、傷寒菌等都有不同程度的抑制作用。從鮮白果中提取出來的白果酚酸，有降低血壓作用，增加血管的滲透性作用。臨床試驗證明，經常食用白果，可治療高血壓、止白帶、咳嗽、發熱，以及心腦血管、呼吸系統、皮膚病、牙痛等疾病，還有清熱擾菌、溫肺益氣、擴張血管、增加血流量、定痰喘、去皺紋、防衰老、潤音喉、健身美容、延年益壽等功效。但是白果中由于含有微量的白果酚、白果酚酸，易導致人體食欲不振、脫皮、觸痛，不等程度的肝損害、腎小球腎炎，白果酚酸有溶血作用，引起驚厥和死亡。由于這些副作用阻礙了白果的大量的食用。因此采用生物工程技術，一方面可以強化白果的藥用價值，同時具有降低白果毒性，對于開發利用白果資源具有重要社會學意義，同時也會產生巨大的經濟價值。
[0003]國內關于銀杏白果開發為功能性食品的已有不少相關專利，如專利(申請號:CN98113554.4)報道了銀杏葉粉碎后噴上絞股藍總甙、速溶茶、甜菊素制成銀杏茶，該茶具有降低血脂，防治高脂血癥、動脈硬化、心腦血管病；孔贊榮利用銀杏白果為原料提取銀杏酚和利用銀杏葉提取液制備銀杏酒的方法，用該方法制得的酒就具有抗病治病、延緩衰老，益壽延年的功效(申請號:CN200910005034)。專利(申請號:CN99113767.1)公開了以銀杏葉提取物(GBE)為原料，配以助溶劑，與蜂蜜、甜味劑、瓊脂、海藻酸鈉，維生素C，酸味劑，山梨酸鉀，苯甲酸鈉，香料等復配成銀杏茶，該茶具有清熱解毒，益氣補腎，潤肺平喘，改善血液循環，軟化血管，消除體內自由基，潤膚，抗衰老，延年益壽等藥用價值和保健功能。這些都是以天然的白果或銀杏葉提取物為原料制得銀杏功能性食品，這些食品由于沒有脫毒處理，因而降低了產品的攝入量，影響其功效的發揮；專利(申請號:CN200710049086.7)報道了利用聚酰胺和大孔樹脂聯合脫去毒性的方法。專利(申請號:CN200910251634.3)報道了利用酒精脫去銀杏毒素的方法。這些方法不僅脫毒效果不徹底，而且成本高，污染較重，易導致環境污染。

【發明內容】

[0004]本發明提供的是一種靈芝白果功能性食品的生產工藝，以銀杏白果為主要原料，靈芝為菌種，采用固體好氧發酵技術，獲得靈芝白果功能性食品。
[0005]靈芝銀杏白果功能性食品，其特征在于該食品總黃酮含量0.3_2mg/g，銀杏內脂
0.2-1.5 mg/g,靈芝三職含量0.8-3.9 mg/g,蛋白質0.9_8 mg/g,可溶性糖〈0.5%,多糖1-15mg/g,銀杏酹酸 <5ug/g,氫氰酸〈0.1 μ g/go
[0006]本發明的目的在于提供一種靈芝白果功能性食品的制備方法，其特征在于靈芝銀杏功能性食品按下述步驟制備得到:
(1)液體搖瓶菌種的制備:蔗糖20?100克，黃豆餅粉10?50克，玉米漿10?50克，麩皮10?60克，磷酸二氫鉀0.06?0.6克，硫酸鎂0.05?0.5克，水IOOOmL,分裝250mL三角瓶，每瓶40?150mL，100?130°C滅菌10?60分鐘，冷卻后接入靈芝試管斜面菌種，在轉速60?180轉/分鐘，溫度22?33°C培養5?10天，制得靈芝液體搖瓶菌種；
(2)液體擴大培養菌種的制備:根據種子罐體積，按下述比例稱取蔗糖20?100克，黃豆餅粉10?50克，玉米漿10?50克，麩皮10?60克，磷酸二氫鉀0.06?0.6克，硫酸鎂0.05?0.5克，豆油2?7克，水IOOOmL ;液體深層培養培養基按罐體積50?80%轉入種子罐，經過100?120°C滅菌，冷卻至室溫，以3?10% (體積比)接種量接入靈芝的液體搖瓶菌種，在溫度22?33°C，罐壓0.03?0.08兆帕，攪拌轉速60?250轉/分，通風量1:0.3?1:1.2v/v/m培養3?8天，制得靈芝液體深層培養菌種；
(3)靈芝固態發酵:白果切成3?5mm的顆粒，110?150°C滅菌10?60分鐘，冷卻到室溫后，以5?20% (體積與重量比)接種量接入靈芝的液體深層培養的菌種，覆蓋保鮮膜，在溫度22?33°C，濕度55、0%培養5?20天獲得靈芝發酵白果發酵物，該發酵物經過烘干和粉碎制得靈芝銀杏白果功能性食品。該食品為黃色至褐色，具有淡淡白果香味和靈芝發酵的特有香味。
[0007]許多研究都已研究證明靈芝三萜具有保護肝臟功能(Su CH, Lain麗，ChanMH.Hepato-protective trit erpenoids from Ganoderma Tsugae Murri11.MushroomBiology and Mushroom Products.Hongkong: The Chinese University Press, 1993，275?283;王明宇，林志彬:靈芝三萜類成分在體內外對小鼠免疫性肝損傷的影響.中國藥學雜志2000，35(12)，809-812)，靈芝多糖能夠抗氧化(張志軍；李淑芳；魏雪生；陳曉明.靈芝多糖體外抗氧化活性的研究；楊紅梅；王黎；陳潔；李宜培；裴瑞；.靈芝多糖肽對Alzheimer樣大鼠海馬超微結構和抗氧化能力的影響.中國老年學雜志，2009, 29(18):2351-2353)，因此本發明提供的靈芝果酒具有保護肝臟和抗氧化等功效。
【具體實施方式】
[0008]下面結合實施例對本發明做進一步闡述:
其中所述的靈芝白果功能性食品中功能性成分按下列方法測定:
總黃酮含量的測定采用亞硝酸鈉一硝酸鋁法(鄧斌，蔣剛彪，陳六平.分光光度法測定食品包裝紙用紫甘薯總黃酮的含量.包裝工程，2008，29 (I): 27?29.);萜類含量的測定采用王翔飛介紹的測定方法(王翔飛，潘旭東，劉雯霞，等.黃花瓦松中總三萜成分的含量的測定.中國民族民間醫藥，2009，18(10):11.);銀杏內酯含量測定采用分光光度法(張渝陽等:分光光度法測定銀杏萜內酯的含量.遼寧化工，2006，35(10): 618?620)；蛋白質含量測定采用考馬斯亮藍(陳建勛，王曉峰:植物生理學實驗指導.實驗19:考馬斯亮藍G-250法測定蛋白質含量.華南理工大學出版社p54?55);氫氰酸含量測定依據中華人民共和國國家標準GB/T15665-1995:豆類、配糖氫氰酸含量的測定；銀杏酚酸采用熒光分析法測定(田亞平，尤文元，李或娜，熒光分析法測定銀杏酚酸.分析化學研究簡報.2006年特刊，sl55-sl57)，多糖含量的測定采用硫酸一苯酚法(趙陽楠，常繼東.苯酚硫酸法和間接碘量法測定靈芝多糖含量比較.食用菌，2007，(3): 58-61.)，還原糖含量測定米用3,5 —二硝基水楊酸法。
[0009]本發明中實施例1?3中所使用的靈芝菌種為可以購買到的任意一種靈芝菌種，包括:赤芝、紫芝、樹舌等多種靈芝菌種。玉米漿為市售任意廠家生產，但是其蛋白質含量不低于37%，靈芝斜面菌種采用PDA培養基制備。IOOOmLPDA培養基含200g馬鈴薯提取液(去皮馬鈴薯切成碎片、IOOOmL蒸餾水煮沸30分鐘，八層紗布過濾，濾液定容至IOOOmL,濾液即為馬鈴薯提取液)加入蔗糖20g、瓊脂20g，煮沸待瓊脂完全溶化后分裝試管，塞上棉塞，121°C滅菌，制成斜面。無菌接種靈芝菌種，30°C培養7天，4°C冷藏待用。
[0010]實施例1
液體搖瓶菌種的制備:蔗糖20克，黃豆餅粉50克，玉米漿50克，麩皮60克，磷酸二氫鉀0.6克，硫酸鎂0.5克，水IOOOmL,分裝250mL三角瓶，每瓶40mL，100°C滅菌60分鐘，冷卻后接入靈芝試管斜面菌種iGanoderma在轉速60轉/分鐘,溫度22°C培養10
天，制得靈芝液體搖瓶菌種；
液體擴大培養菌種的制備:根據種子罐體積，按下述比例稱取蔗糖100克，黃豆餅粉10克，玉米漿10克，麩皮10克，磷酸二氫鉀0.6克，硫酸鎂0.5克，豆油7克，水IOOOmL ;液體深層培養培養基按罐體積50%轉入種子罐，經過100°C滅菌，冷卻至室溫，以10% (體積比)接種量接入靈芝的液體搖瓶菌種，在溫度22°C，罐壓0.03兆帕，攪拌轉速70轉/分，通風量1:0.3v/v/m培養8天,制得靈芝液體深層培養菌種；
靈芝固態發酵:白果切成3mm的顆粒，110°C滅菌60分鐘，冷卻到室溫后，以20%(體積比重量)接種量接入靈芝的液體深層培養的菌種，覆蓋保鮮膜，在溫度32°C，濕度90%培養20天獲得靈芝發酵白果發酵物；該發酵物經過烘干、粉碎，制成靈芝銀杏白果功能性食品，該食品為黃色，具有淡淡白果香味和靈芝發酵的特有香味。
[0011]實施例2
液體搖瓶菌種的制備:蔗糖60克，黃豆餅粉30克，玉米漿30克，麩皮30克，磷酸二氫鉀0.3克，硫酸鎂0.3克，水IOOOmL,分裝250mL三角瓶，每瓶80mL，115°C滅菌40分鐘，冷卻后接入靈芝試管斜面菌種iGanoderma在轉速120轉/分鐘,溫度28°C培養7
天，制得靈芝液體搖瓶菌種；
液體擴大培養菌種的制備:根據種子罐體積，按下述比例稱取蔗糖60克，黃豆餅粉25克，玉米漿31克，麩皮30克，磷酸二氫鉀0.25克，硫酸鎂0.25克，豆油4.1克，水IOOOmL ；液體深層培養培養基按罐體積60%轉入種子罐，經過115°C滅菌，冷卻至室溫，以6% (體積t匕)接種量接入靈芝的液體搖瓶菌種，在溫度27°C，罐壓0.05兆帕，攪拌轉速120轉/分，通風量1:0.8v/v/m培養5天，制得靈芝液體深層培養菌種；
靈芝固態發酵:白果切成4mm的顆粒，130°C滅菌30分鐘，冷卻到室溫后，以10%(體積比重量)接種量接入靈芝的液體深層培養的菌種，覆蓋保鮮膜，在溫度60°C，濕度85%培養10天獲得靈芝發酵白果發酵物；該發酵物經過烘干、粉碎，制成靈芝銀杏白果功能性食品，該食品為淺褐色，具有淡淡白果香味和靈芝發酵的特有香味。
[0012]實施例3
液體搖瓶菌種的制備:蔗糖100克，黃豆餅粉10克，玉米漿10克，麩皮10克，磷酸二氫鉀0.06克，硫酸鎂0.05克，水1000mL,分裝250mL三角瓶，每瓶140mL, 128°C滅菌55分鐘，冷卻后接入靈芝試管斜面菌種iGanoderma Iucidum)，在轉速180轉/分鐘,溫度33°C培養5天，制得靈芝液體搖瓶菌種；
'液體擴大培養菌種的制備:根據種子罐體積，按下述比例稱取蔗糖20克，黃豆餅粉45克，玉米漿45克，麩皮60克，磷酸二氫鉀0.06克，硫酸鎂0.05克，豆油2克，水1000mL ;液體深層培養培養基按罐體積80%轉入種子罐，經過120°C滅菌，冷卻至室溫，以3%(體積比)接種量接入靈芝的液體搖瓶菌種，在溫度33°C，罐壓0.08兆帕，攪拌轉速250轉/分，通風量1:1.lv/v/m培養8天，制得靈芝液體深層培養菌種；
靈芝固態發酵:白果切成5mm的顆粒，150°C滅菌10分鐘，冷卻到室溫后，以5% (體積比重量)接種量接入靈芝的液體深層培養的菌種，覆蓋保鮮膜，在溫度22°C，濕度60%培養5天獲得靈芝發酵白果發酵物；該發酵物經過烘干、粉碎，制成靈芝銀杏白果功能性食品，該食品色質為褐色。
[0013]實施例1、實施例2和實施例3的測定結果顯示在表1 表1:實施例1 — 3成分分析表
【權利要求】
1.靈芝銀杏白果功能性食品，其特征在于其總黃酮含量0.3-2mg/g，銀杏內脂0.2-1.5mg/g,靈芝三職含量0.8-3.9 mg/g,蛋白質0.9-8 mg/g,可溶性糖〈0.5%,多糖l_15mg/g,銀杏酹酸<5ug/g,氫氰酸〈0.1 μ g/go
2.權利要求1所述的靈芝白果功能性食品的制備方法，其特征在于按下述步驟制備得到: (1)液體搖瓶菌種的制備:蔗糖20?100克，黃豆餅粉10?50克，玉米漿10?50克，麩皮10?60克，磷酸二氫鉀0.06?0.6克，硫酸鎂0.05?0.5克，水IOOOmL,按照體積比16?60%分裝三角瓶，100?130°C滅菌10?60分鐘，冷卻后接入靈芝試管斜面菌種，在轉速60?180轉/分鐘，溫度22?33°C培養5?10天，制得靈芝液體搖瓶菌種； (2)液體擴大培養菌種的制備:根據種子罐體積，按下述比例稱取蔗糖20?100克，黃豆餅粉10?50克，玉米漿10?50克，麩皮10?60克，磷酸二氫鉀0.06?0.6克，硫酸鎂0.05?0.5克，豆油2?7克，水IOOOmL ;液體深層培養培養基按罐體積50?80%轉入種子罐，經過100?120°C滅菌，冷卻至室溫，以體積比3?10%接種量接入靈芝的液體搖瓶菌種，在溫度22?33°C，罐壓0.03?0.08兆帕，攪拌轉速60?250轉/分，通風量1:0.3?1:1.2 (v/v/m)培養3?8天，制得靈芝液體深層培養菌種； (3)靈芝固態發酵:白果切成3?5mm的顆粒，110?150°C滅菌10?60分鐘，冷卻到室溫后，以體積與重量比5?20%接種量接入靈芝的液體深層培養的菌種，覆蓋保鮮膜，在溫度22?33°C，濕度55、0%培養5?20天獲得靈芝發酵白果發酵物，該發酵物經過烘干和粉碎制得靈芝銀杏白果功能性食品。
【文檔編號】A23L1/28GK103689557SQ201210366763
【公開日】2014年4月2日 申請日期:2012年9月27日 優先權日:2012年9月27日
【發明者】張志才, 鄭惠華, 任曉峰, 謝德中, 陳惠 , 張才九 申請人:江蘇大學, 江蘇安惠生物科技有限公司