本發(fā)明涉及醫(yī)藥
技術(shù)領(lǐng)域：
，尤其涉及一種地塞米松脂質(zhì)乳滴眼液及其制備方法。
背景技術(shù)：
：地塞米松是用于治療眼內(nèi)炎癥特別是黃斑性病變的常用藥物，但是通過傳統(tǒng)滴眼給藥的治療效果受藥物難以進入眼內(nèi)組織，并且在眼內(nèi)分布量少，治療眼內(nèi)或眼后段疾病的效果并不顯著。因此，眼內(nèi)或眼后段疾病如虹膜、睫狀體等眼內(nèi)炎、玻璃體出血或視網(wǎng)膜黃斑性病變等疾病的治療，臨床需采用靜脈注射或玻璃體注射、結(jié)膜注射等給藥方法。但是眼內(nèi)注射是侵入性的，而且治療過程中需要重復多次注射，可能導致結(jié)膜下結(jié)疤、粘連；注射過程容易刺傷角膜或引起出血，這無疑增加了發(fā)生眼內(nèi)炎的風險，一旦發(fā)生眼內(nèi)炎，將可能導致患者視力不可逆損傷乃至喪失，這也是困擾本領(lǐng)域技術(shù)人員的技術(shù)難題。技術(shù)實現(xiàn)要素：本發(fā)明提供一種地塞米松脂質(zhì)乳滴眼液及其制備方法，以增加眼內(nèi)組織分布、促進向眼內(nèi)的滲透，進而達到安全、有效治療眼內(nèi)及眼底疾病的目的。為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供的技術(shù)方案是這樣的，一種地塞米松脂質(zhì)乳滴眼液，所述的地塞米松脂質(zhì)乳滴眼液為水包油亞微乳液體系，乳滴中的油脂中包覆有由脂質(zhì)載體和地塞米松形成的脂質(zhì)納米顆粒。需要說明的是，上述的地塞米松脂質(zhì)乳滴眼液乳滴平均粒徑小于200nm，粒徑分布為173±36nm，90％粒徑累計值小于等于500nm。需要說明的是，上述的地塞米松脂質(zhì)乳滴眼液組分包括以下重量百分比：需要說明的是，上述的脂質(zhì)載體為蛋黃卵磷脂、LIPOIDE80(精制蛋黃卵磷脂，其中磷脂酰膽堿含量為80)、LIPOIDS75(大豆卵磷脂)、大豆磷脂、氫化大豆磷脂中的任意一種或多種任意比例的混合物。需要說明的是，上述的油脂為藥用大豆油、橄欖油、注射用大豆油、辛酸/癸酸甘油三酯、中鏈甘油三酯中的任意一種或多種任意比例的混合物。需要說明的是，上述的乳化劑為聚氧乙烯蓖麻油、聚乙二醇十五羥基硬脂酸酯、聚氧乙烯氫化蓖麻油、泊洛沙姆、丙三醇、丙二醇中的任意一種或多種任意比例的混合物。需要說明的是，上述的等滲調(diào)節(jié)劑為丙三醇、氯化鈉、甘露糖醇中的任意一種或多種任意比例的混合物；pH調(diào)節(jié)劑采用鹽酸、氫氧化鈉、磷酸鹽、枸櫞酸鹽中的任意一種或多種任意比例的混合物；所述的pH調(diào)節(jié)劑的用量為調(diào)節(jié)所述的地塞米松脂質(zhì)乳滴眼液的pH為5.5～8。需要說明的是，上述的抑菌劑采用苯乙醇、山梨酸或苯氧乙醇中的任意一種或多種任意比例的混合物，所述的抑菌劑的質(zhì)量濃度為0.75％～1.5％。一種如上所述的地塞米松脂質(zhì)乳滴眼液的制備方法，包括以下步驟：步驟1：將地塞米松和脂質(zhì)載體分散在揮發(fā)性的有機溶劑中，減壓除去揮發(fā)性的有機溶劑，形成地塞米松脂質(zhì)載體的蜂窩狀膜，并分散于油脂中形成的油相；步驟2：將油相與具有乳化劑的水相混合、剪切乳化，即得地塞米松脂質(zhì)乳滴眼液的初乳；步驟3：向地塞米松脂質(zhì)乳滴眼液的初乳中加入適量的水，即得。在上述的地塞米松脂質(zhì)乳滴眼液的制備方法中，所述的步驟3為初乳經(jīng)壓力500～1200bar的高壓均質(zhì)，循環(huán)次數(shù)為3～15次，乳勻，得脂質(zhì)乳；制得的脂質(zhì)乳用微孔濾膜過濾，調(diào)節(jié)pH，最后加入抑菌劑、硼酸緩沖水溶液液、磷酸鹽緩沖水溶液或硼酸鹽緩沖水溶液中的一種或幾種，即得脂質(zhì)滴眼液。優(yōu)選地，步驟3為初乳經(jīng)壓力600～800bar的高壓均質(zhì)，循環(huán)次數(shù)為5～10次，乳勻，得脂質(zhì)乳；制得的脂質(zhì)乳用微孔濾膜過濾，調(diào)節(jié)pH，最后加入處方量抑菌劑、硼酸緩沖水溶液液、磷酸鹽緩沖水溶液或硼酸鹽緩沖水溶液中的一種，即得脂質(zhì)滴眼液。在上述的地塞米松脂質(zhì)乳滴眼液的制備方法中，所述的揮發(fā)性的有機溶劑由乙醇與丙酮組成，乙醇與丙酮的總重量和脂質(zhì)載體的體積比為20：1，乙醇與丙酮的體積比1：1～1：3；需要說明的是，乙醇與丙酮的總重量和脂質(zhì)載體的體積比在實際應(yīng)用中并不需要嚴格限定在20:1這個值，如乙醇與丙酮的總重量為25g，脂質(zhì)載體的體積為1ml依然可以實施本方案，乙醇與丙酮的用量的原則在于使地塞米松和蛋黃卵磷脂能夠有效分散即可。對于本領(lǐng)域技術(shù)人員來說，其合理的選用范圍都是可選的。在上述的地塞米松脂質(zhì)乳滴眼液的制備方法中，所述的減壓過程中，反應(yīng)溫度為40℃，真空度為-0.07～-0.08MPa。需要說明的是，在實際應(yīng)用中，在減壓過程中的溫度對于本發(fā)明的效果的影響并不是決定性的，反應(yīng)溫度一般可以選擇為室溫或者略高于或低于室溫的溫度如20-40℃都是可選的，當然也并不排除與更高的溫度。本發(fā)明中減壓溫度和減壓時間是密切相關(guān)的，溫度越高，真空度越接近真空，其減壓時間越短，在實際操作過程中，控制合理的溫度使揮發(fā)性溶劑能夠以穩(wěn)定的速度揮發(fā)即可，應(yīng)當避免溫度過高導致的溶液爆沸。本發(fā)明的有益效果：本發(fā)明將藥物與具有兩親性的磷脂結(jié)合，能夠分散形成獨立的納米粒子，具有生物黏附性。將其包載于水包油型亞微乳中的油相，可形成類似于淚液膜的微觀結(jié)構(gòu)，能夠促進藥物透過生物膜屏障。由于脂質(zhì)納米粒與水包油型亞微乳獨特的結(jié)構(gòu)，能夠緩慢地釋放出包封的藥物，增加藥物在眼內(nèi)組織的分布、促進向眼內(nèi)的滲透，進而達到安全、有效治療眼內(nèi)及眼底疾病的目的。因此，通過本發(fā)明制備的一種地塞米松脂質(zhì)乳滴眼液與市售滴眼液相比，在眼內(nèi)滯留時間明顯延長，眼內(nèi)各組織藥物濃度明顯提高，并且能使其透過眼內(nèi)屏障的藥物量增加，不僅有益于提高眼內(nèi)藥物濃度，而且還能通過滴眼方式治療眼內(nèi)或眼后段疾病。附圖說明圖1是實施例1的粒徑分布圖；圖2是實施例2的粒徑分布圖；圖3是實施例3的粒徑分布圖；圖4是實施例1的Zeta電位圖；圖5是實施例2的Zeta電位圖；圖6是實施例3的Zeta電位圖；圖7是實施例1的空白對照的組織檢查學圖；圖8是實施例2的空白對照的組織檢查學圖；圖9是實施例3的空白對照的組織檢查學圖；圖10是市售對照組的空白對照的組織檢查學圖；圖11是實施例1的受試制劑的組織檢查學圖；圖12是實施例2的受試制劑的組織檢查學圖；圖13是實施例3的受試制劑的組織檢查學圖；圖14是市售對照組的受試制劑的組織檢查學圖；圖15是實施例1-3以及市售對照組的離體角膜累計滲透量圖；圖16是實施例1-3以及市售對照組的各時間點藥物在角膜組織中的分布圖；圖17是實施例1-3以及市售對照組的各時間點藥物在鞏膜組織中的分布圖；圖18是實施例1-3以及市售對照組的各時間點藥物在玻璃體組織中的分布圖；圖19是實施例1-3以及市售對照組的各時間點藥物在晶狀體組織中的分布圖；圖20是實施例1-3以及市售對照組的藥物濃度-時間曲線圖。具體實施方式下面結(jié)合具體實施方式，對本發(fā)明的技術(shù)方案作進一步的詳細說明，但不構(gòu)成對本發(fā)明的任何限制。實施例1制備方法：取處方量蛋黃卵磷脂PL-100M和地塞米松溶解在乙醇與丙酮(1:1，v/v)的混合溶劑中，混合溶劑為200g；40℃減壓蒸發(fā)除去溶劑形成藥物與磷脂的混合物，將該混合物分散至處方量的藥用大豆油中形成油相，另取處方量的泊洛沙姆188乳化劑溶解于適量水中，隨后將含丙三醇的水溶液與油相混合，800rpm剪切乳化10min，既得初乳。調(diào)節(jié)高壓均質(zhì)機的二級閥壓力為200～300bar，均質(zhì)2min使已細化的顆粒分布的更加均勻，再調(diào)節(jié)一級閥500～600bar之間，循環(huán)10次勻質(zhì)處理，使物料充分在閥芯、閥座和沖擊環(huán)三者組成的狹小區(qū)域內(nèi)產(chǎn)生類似爆咋效應(yīng)的強烈的孔穴作用，同時伴隨著物料通過閥芯和閥座間的狹縫產(chǎn)生的剪切作用以及沖擊環(huán)撞擊產(chǎn)生的高速撞擊作用，使得整個體系得到超微細化，待高壓勻質(zhì)結(jié)束后，調(diào)節(jié)pH至6.5～7.8之間，加入苯乙醇，通氮氣，小容量安瓿熔封，100℃流通蒸汽滅菌30～45min，即得地塞米松脂質(zhì)乳滴眼液。實施例2制備方法：取處方量LIPOIDE80和地塞米松溶解在乙醇與丙酮(1:3，v/v)的混合溶劑中，混合溶劑為100g；40℃減壓蒸發(fā)除去溶劑形成藥物與磷脂的混合物，將該混合物分散至處方量的藥用大豆油中形成油相，另取處方量的SolutolHS15乳化劑溶解于適量水中，隨后將含乳化劑的水溶液與油相混合，800rpm剪切乳化10min，既得初乳。調(diào)節(jié)高壓均質(zhì)機的二級閥壓力為200～300bar，均質(zhì)2min使已細化的顆粒分布的更加均勻，再調(diào)節(jié)一級閥500～600bar之間，循環(huán)10次勻質(zhì)處理，使物料充分在閥芯、閥座和沖擊環(huán)三者組成的狹小區(qū)域內(nèi)產(chǎn)生類似爆炸效應(yīng)的強烈的孔穴作用，同時伴隨著物料通過閥芯和閥座間的狹縫產(chǎn)生的剪切作用以及沖擊環(huán)撞擊產(chǎn)生的高速撞擊作用，使得整個體系得到超微細化，待高壓勻質(zhì)結(jié)束后，調(diào)節(jié)pH至6.5～7.8之間，加入山梨酸，通氮氣，小容量安瓿熔封，100℃流通蒸汽滅菌30～45min，即得地塞米松脂質(zhì)乳滴眼液。實施例3制備方法：取處方量LIPOIDS75和地塞米松溶解在乙醇與丙酮(1:2，v/v)的混合溶劑中，混合溶劑為140g；40℃減壓蒸發(fā)除去溶劑形成藥物與磷脂的混合物，將該混合物分散至處方量的藥用大豆油中形成油相，另取處方量的CremophorEL乳化劑溶解于適量水中，隨后將含乳化劑的水溶液與油相混合，800rpm剪切乳化10min，既得初乳。調(diào)節(jié)高壓均質(zhì)機的二級閥壓力為200～300bar，均質(zhì)2min使已細化的顆粒分布的更加均勻，再調(diào)節(jié)一級閥500～600bar之間，循環(huán)10次勻質(zhì)處理，使物料充分在閥芯、閥座和沖擊環(huán)三者組成的狹小區(qū)域內(nèi)產(chǎn)生類似爆咋效應(yīng)的強烈的孔穴作用，同時伴隨著物料通過閥芯和閥座間的狹縫產(chǎn)生的剪切作用以及沖擊環(huán)撞擊產(chǎn)生的高速撞擊作用，使得整個體系得到超微細化，待高壓勻質(zhì)結(jié)束后，調(diào)節(jié)pH至6.5～7.8之間，加苯氧乙醇，通氮氣，小容量安瓿熔封，100℃流通蒸汽滅菌30～45min，即得地塞米松脂質(zhì)乳滴眼液。通過以下實驗來說明本發(fā)明中地塞米松脂質(zhì)乳滴眼液的制劑特征、眼部刺激性及其與常規(guī)制劑相比角膜滲透性增強的特性。1.粒徑與電位試驗藥物：本發(fā)明公開的地塞米松脂質(zhì)乳滴眼液；實驗方法：取本發(fā)明公開的地塞米松脂質(zhì)乳滴眼液適量用去離子水適當稀釋，采用粒度DelsaNanoC激光粒度儀測定，自動調(diào)節(jié)儀器光強度在10000ICP左右，溫度控制在25℃，散射角度為165°，測定其粒徑分布及電位強度。測試結(jié)果：實施例1-3的粒徑分布圖見圖1-圖3；其中，在圖1-圖3中，橫坐標Diameter(nm)表示直徑(nm)，縱坐標(左)DifferentialIntensity(％)為激光強度；縱坐標(右)CumulativeIntensity(％)為累計強度(％)。實施例1-3的Zeta電位圖見圖4-圖6；其中，在圖4-圖6中，橫坐標(上)Frequency(Hz)為電位信號出現(xiàn)的頻次(Hz)；縱坐標Intensity為電位信號強度；橫坐標(下)ZetaPotential(mV)為電位(mV)。實施例1-3的多分散指數(shù)(PDI)見表-1：表-1實施例1-3的多分散性指數(shù)項目實施例1實施例2實施例3PDI0.103±0.0120.176±0.270.119±0.0172.刺激性評價試驗藥物：本發(fā)明公開的地塞米松脂質(zhì)乳滴眼液，實施例1、實施例2、實施例3和市售滴眼液(含地塞米松、妥布霉素復方制劑)對照組，每次給藥量為100μl；試驗動物：清潔級新西蘭白兔12只，雌雄各半，體重2.5～3.5kg(購自南方醫(yī)科大學實驗動物中心)；動物飼養(yǎng)環(huán)境：20℃，RT30％～70％，人工光線，12小時日光，12小時黑暗；實驗動物合格證號：NO.44002100003592；實驗方法：采用同體自身對照法，將0.1mL試驗藥物滴入右眼結(jié)膜囊內(nèi)，左眼滴入乳酸林格注射液作為對照。給藥后使眼睛被動閉合5～10s。每天3次，連續(xù)給藥7天，觀察每次給藥前及最后一次給藥后(1、2、4、24、48和72h)時角膜，虹膜，結(jié)膜的生理情況，按照Draize試驗表進行評分，計算各組受試制劑得分。刺激性評價末次給藥觀察結(jié)束后，耳緣靜脈注射空氣處死家兔，分別取對組及受試組眼球，用4％多聚甲醛溶液固定48h后，石蠟切片，HE(蘇木精-伊紅)染色，中性樹膠封片，顯微鏡下放大適當倍數(shù)分別檢查對照組及受試組虹膜、角膜、視網(wǎng)膜等組織，觀察基底細胞與上皮細胞形態(tài)、嗜曙紅細胞、嗜中性粒細胞和肥大細胞的組織形態(tài)、浸潤有無改變。實驗結(jié)果：給藥期間和末次給藥后，肉眼觀察家兔眼角膜無混濁，虹膜和結(jié)膜未見紅腫、充血等異常現(xiàn)象。眼球組織切片如圖7-圖14所示，與對照組相比，暴露于不同制劑的組織并未發(fā)生顯著改變。顯微鏡下觀察受試組上皮細胞形態(tài)正常，基質(zhì)中淋巴組織、白細胞正常，未出現(xiàn)形態(tài)改變、嗜中性粒細胞浸潤等現(xiàn)象。3.離體角膜透過性評價試驗藥物：本發(fā)明公開的地塞米松脂質(zhì)乳滴眼液，實施例1、實施例2、實施例3和市售滴眼液對照組，每次給藥量為100μl；評價方法：采用改進的Franz立式擴散池，擴散口直徑8mm，有效擴散面積為0.5024cm2，接收池容積為6mL。將新鮮離體角膜小心固定在Franz擴散池的供給池和接收池之間，使上皮層面向供給池。接收池中灌滿接收介質(zhì)，精密移取樣品于供給池，薄膜封口，防止水分蒸發(fā)。擴散池置于透皮擴散試驗儀上，調(diào)節(jié)溫度34±1℃，轉(zhuǎn)速為200rpm，于時間點取樣2ml，HPLC測定，計算地塞米松的透過參數(shù)。實驗結(jié)果：不同時間點離體角膜累積透過量Q如圖-15所示，將Q與滲透時間t擬合方程，計算表觀滲透系數(shù)。如表-2所示，實施例中地塞米松脂質(zhì)乳滴眼液的表觀滲透系數(shù)Papp與溶液對照組相比有顯著性差異(P＜0.05)，脂質(zhì)滴眼液對于地塞米松可產(chǎn)生顯著的促滲作用。表-2離體角膜透過參數(shù)4.眼組織分布研究試驗藥物：本發(fā)明公開的地塞米松脂質(zhì)乳滴眼液，實施例1、實施例2、實施例3和市售滴眼液對照組，每次給藥量為100μl。給藥設(shè)計：家兔隨機分為3組，每組5只，每組給予不同的制劑。實驗前12h開始禁食，但正常飲水。給藥時，分別撐開家兔眼瞼使用微量注射器在左、右眼分別滴入試驗藥物100μl，迫使家兔眼瞼閉合約15秒使藥物分布均勻。樣品采集：待0.75、1.5、3、6和9h時間點后，摘取眼球，用乳酸林格溶液沖洗并用濾紙吸干水分，分離角膜、鞏膜、玻璃體和晶狀體，精密稱重，采用Re-HPLC測定各時間點藥物濃度。實驗結(jié)果：不同處方制劑在眼部各組織的分布情況見圖16～圖19。實施例的眼部組織分布量明顯比市售滴眼液高。由于生物相容性磷脂的加入，改變了難溶性藥物地塞米松的滲透性，與市售滴眼液相比脂質(zhì)乳可提高藥物在眼部組織分布的分布量，為其治療眼后段疾病奠定基礎(chǔ)。5.房水內(nèi)藥物時間分布試驗藥物：本發(fā)明公開的地塞米松脂質(zhì)乳滴眼液，實施例1、實施例2、實施例3和市售滴眼液對照組，每次給藥量為100μl。給藥設(shè)計：采用角膜穿刺術(shù)，家兔隨機分為3組，每組3只，每組給予不同的制劑。實驗前12h開始禁食，但正常飲水。給藥時，分別撐開家兔眼瞼使用微量注射器在左、右眼分別滴入試驗藥物100μl，迫使家兔眼瞼閉合約15秒使藥物分布均勻。樣品采集：待0.75、1.5、3、6和9h時間點后，抽取房水100μL，采用Re-HPLC測定各時間點藥物濃度。采用統(tǒng)計矩法計算藥動學參數(shù)，如圖-20房水中的藥物濃度-時間曲線可以看出，滴眼給藥后，由于藥物進入房水前需要透過角膜，因此房水中的地塞米松有一個非靜脈給藥途徑的吸收過程，達峰濃度的時間相對比較慢。結(jié)果表明，實施例中脂質(zhì)乳滴眼液組的峰濃度顯著高于市售滴眼液對照組，本發(fā)明制備的脂質(zhì)乳滴眼液有利于地塞米松在眼內(nèi)的吸收。本發(fā)明與傳統(tǒng)方法相比具有以下優(yōu)點：1.本發(fā)明將藥物與具有兩親性的磷脂結(jié)合，能夠分散形成獨立的納米粒子，具有生物黏附性。將其包載于水包油型亞微乳中的油相，可形成類似于淚液膜的微觀結(jié)構(gòu)，能夠促進藥物透過生物膜屏障。由于脂質(zhì)納米粒與水包油型亞微乳獨特的結(jié)構(gòu)，能夠緩慢地釋放出包封的藥物，增加藥物在眼內(nèi)組織的分布、促進向眼內(nèi)的滲透，進而達到安全、有效治療眼內(nèi)及眼底疾病的目的。2.通過本發(fā)明制備的一種地塞米松脂質(zhì)乳滴眼液與市售滴眼液相比，在眼內(nèi)滯留時間明顯延長，眼內(nèi)各組織藥物濃度明顯提高，并且能使其透過眼內(nèi)屏障的藥物量增加，不僅有益于提高眼內(nèi)藥物濃度，而且還能通過滴眼方式治療眼內(nèi)或眼后段疾病3.本發(fā)明采用薄膜分散-高壓均質(zhì)的工藝制備得到的地塞米松脂質(zhì)乳滴眼液采用激光粒度法測得平均粒徑小于200nm，粒徑分布范圍在173±36nm之間，D90小于500nm，體系乳滴表面所帶負電荷，ζ電位值在-(50±10)mV，體系穩(wěn)定性良好。以上所述的僅為本發(fā)明的較佳實施例，凡在本發(fā)明的精神和原則范圍內(nèi)所作的任何修改、等同替換和改進等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。當前第1頁1 2 3