專(zhuān)利名稱(chēng)：一種展庫(kù)酸a的提取方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于天然物質(zhì)的提取技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種展庫(kù)酸A的提取方法。
背景技術(shù)：
展庫(kù)酸A (Zhankuic acid A),分子式為C29H4tlO5,分子量為468. 63，是從多孔菌科(Polyporaceae)玉桂薄孔菌JfliratZia cinnamomea Chang & Chou, sp. nov.子實(shí)體中分離得到的一種活性成分。研究發(fā)現(xiàn)，展庫(kù)酸A對(duì)淋巴白血病細(xì)胞P388呈細(xì)胞毒活性，IC50為I. 8 μ g/ml ο經(jīng)文獻(xiàn)檢索，國(guó)內(nèi)尚未發(fā)現(xiàn)展庫(kù)酸A的工業(yè)提取方法相關(guān)報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種高效、環(huán)保的展庫(kù)酸A的提取方法。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案
(1)以玉桂薄孔菌子實(shí)體為原料，于65°C干燥至恒重，粉碎，加入閃式提取器中，以95%乙醇溶液為提取溶劑，進(jìn)行閃式提取，過(guò)濾得到提取液；
(2)提取液濃縮后得到粗提物，用雙水相溶劑系統(tǒng)進(jìn)行萃取，收集有機(jī)相萃取液，減壓回收溶劑得濃縮液；
(3)將濃縮液用高速逆流色譜分離純化，以氯仿-甲醇-水兩相溶劑系統(tǒng)，上相為固定相，下相為流動(dòng)相，根據(jù)圖譜收集成分，低溫濃縮干燥即得展庫(kù)酸A。所述步驟(I)中閃式提取電壓為140-160V，提取時(shí)間為90s-120S。所述步驟(2)中雙水相溶劑系統(tǒng)為乙醇/硫酸銨雙水相體系，稱(chēng)取22g硫酸銨加入65ml水中，溶解結(jié)束加入32ml無(wú)水乙醇。所述步驟(3)中氯仿-甲醇-水體積比為(12-14) :(8-10) : (5-8)。本發(fā)明的有益效果是(I)本發(fā)明采用閃式提取法，快速高效、低耗能、環(huán)保；(2)本發(fā)明所用乙醇/硫酸銨雙水相體系可以回收、重復(fù)利用，節(jié)約了試劑，降低了成本；(3)本發(fā)明利用高速逆流色譜分離展庫(kù)酸A，分離過(guò)程無(wú)產(chǎn)品損失，高效，制備周期短。
具體實(shí)施例方式 下面將結(jié)合具體實(shí)施方式
進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限于下列實(shí)施方式。實(shí)施例I :
取玉桂薄孔菌子實(shí)體100g，于65°C干燥至恒重，粉碎，加入閃式提取器中，以95%乙醇溶液為提取溶劑，提取電壓為150V，提取時(shí)間為100s，進(jìn)行閃式提取，過(guò)濾得到提取液，提取液濃縮后得到粗提物；稱(chēng)取22g硫酸銨加入65ml水中，溶解結(jié)束加入32ml無(wú)水乙醇，建立乙醇/硫酸銨雙水相體系，將粗提物加入3L乙醇/硫酸銨雙水相體系中，振蕩搖勻，靜置，收集上相，減壓回收溶劑得濃縮液；取氯仿、甲醇、水按13:8:7比例混合，靜置分層，取上相泵入色譜管，開(kāi)啟高速逆流色譜儀，調(diào)整轉(zhuǎn)速為900rpm，同時(shí)把下相以2. 5ml/min流速泵入，注入濃縮液，紫外檢測(cè)器監(jiān)測(cè)，監(jiān)測(cè)波長(zhǎng)為266nm，收集流分，減壓濃縮后，干燥即得展庫(kù)酸A,含量96. 4%。實(shí)施例2:
取玉桂薄孔菌子實(shí)體100g，于65°C干燥至恒重，粉碎，加入閃式提取器中，以95%乙醇溶液為提取溶劑，提取電壓為160V，提取時(shí)間為120s，進(jìn)行閃式提取，過(guò)濾得到提取液，提取液濃縮后得到粗提物；稱(chēng)取22g硫酸銨加入65ml水中，溶解結(jié)束加入32ml無(wú)水乙醇，建立乙醇/硫酸銨雙水相體系，將粗提物加入2. 5L乙醇/硫酸銨雙水相體系中，振蕩搖勻，靜置，收集上相，減壓回收溶劑得濃縮液；取氯仿、甲醇、水按14:9:8比例混合，靜置分層，取上相泵入色譜管，開(kāi)啟高速逆流色譜儀，調(diào)整轉(zhuǎn)速為850rpm，同時(shí)把下相以3ml/min流速泵入，注入濃縮液，紫外檢測(cè)器監(jiān)測(cè)，監(jiān)測(cè)波長(zhǎng)為266nm，收集流分，減壓濃縮后，干燥即得展庫(kù)酸A，含量94. 6%ο實(shí)施例3: 取玉桂薄孔菌子實(shí)體100g，于65°C干燥至恒重，粉碎，加入閃式提取器中，以95%乙醇溶液為提取溶劑，提取電壓為160V，提取時(shí)間為90s，進(jìn)行閃式提取，過(guò)濾得到提取液，提取液濃縮后得到粗提物；稱(chēng)取22g硫酸銨加入65ml水中，溶解結(jié)束加入32ml無(wú)水乙醇，建立乙醇/硫酸銨雙水相體系，將粗提物加入3L乙醇/硫酸銨雙水相體系中，振蕩搖勻，靜置，收集上相，減壓回收溶劑得濃縮液；取氯仿、甲醇、水按12:10:5比例混合，靜置分層，取上相泵入色譜管，開(kāi)啟高速逆流色譜儀，調(diào)整轉(zhuǎn)速為SOOrpm，同時(shí)把下相以3ml/min流速泵入，注入濃縮液，紫外檢測(cè)器監(jiān)測(cè)，監(jiān)測(cè)波長(zhǎng)為266nm，收集流分，減壓濃縮后，干燥即得展庫(kù)酸A，含量94. 9%ο實(shí)施例4:
取玉桂薄孔菌子實(shí)體100g，于65°C干燥至恒重，粉碎，加入閃式提取器中，以95%乙醇溶液為提取溶劑，提取電壓為140V，提取時(shí)間為120s，進(jìn)行閃式提取，過(guò)濾得到提取液，提取液濃縮后得到粗提物；稱(chēng)取22g硫酸銨加入65ml水中，溶解結(jié)束加入32ml無(wú)水乙醇，建立乙醇/硫酸銨雙水相體系，將粗提物加入2L乙醇/硫酸銨雙水相體系中，振蕩搖勻，靜置，收集上相，減壓回收溶劑得濃縮液；取氯仿、甲醇、水按13:10: 5比例混合，靜置分層，取上相泵入色譜管，開(kāi)啟高速逆流色譜儀，調(diào)整轉(zhuǎn)速為850rpm，同時(shí)把下相以3ml/min流速泵入，注入濃縮液，紫外檢測(cè)器監(jiān)測(cè)，監(jiān)測(cè)波長(zhǎng)為266nm，收集流分，減壓濃縮后，干燥即得展庫(kù)酸A,含量95. 5%ο
權(quán)利要求
1.一種展庫(kù)酸A的提取方法，其特征在于包括以下步驟 (1)以玉桂薄孔菌子實(shí)體為原料，于65°C干燥至恒重，粉碎，加入閃式提取器中，以95%乙醇溶液為提取溶劑，進(jìn)行閃式提取，過(guò)濾得到提取液； (2)提取液濃縮后得到粗提物，用雙水相溶劑系統(tǒng)進(jìn)行萃取，收集有機(jī)相萃取液，減壓回收溶劑得濃縮液； (3)將濃縮液用高速逆流色譜分離純化，以氯仿-甲醇-水兩相溶劑系統(tǒng)，上相為固定相，下相為流動(dòng)相，根據(jù)圖譜收集成分，低溫濃縮干燥即得展庫(kù)酸A。
2.如權(quán)利要求I所述的一種展庫(kù)酸A的提取方法，其特征在于所述步驟(I)中閃式提取電壓為140-160V，提取時(shí)間為90s-120s。
3.如權(quán)利要求I所述的一種展庫(kù)酸A的提取方法，其特征在于所述步驟(2)中雙水相溶劑系統(tǒng)為乙醇/硫酸銨雙水相體系，稱(chēng)取22g硫酸銨加入65ml水中，溶解結(jié)束加入32ml無(wú)水乙醇。
4.如權(quán)利要求I所述的一種展庫(kù)酸A的提取方法，其特征在于所述步驟(3)中氯仿-甲醇-水體積比為(12-14) :(8-10) : (5-8)。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種展庫(kù)酸A的提取方法，屬于天然藥物化學(xué)領(lǐng)域。所述的方法包括以下過(guò)程以玉桂薄孔菌子實(shí)體為原料，加入閃式提取器中，以95%乙醇溶液為提取溶劑，進(jìn)行閃式提取，過(guò)濾得到提取液，濃縮，濃縮液經(jīng)過(guò)雙水相溶劑系統(tǒng)萃取，收集有機(jī)相，濃縮后采用高速逆流色譜分離，以氯仿-甲醇-水為溶劑系統(tǒng)，流分減壓濃縮，即得展庫(kù)酸A。本發(fā)明采用閃式提取、雙水相溶劑系統(tǒng)萃取和高速逆流色譜分離技術(shù)，高效環(huán)保，適合產(chǎn)業(yè)規(guī)模化生產(chǎn)。
文檔編號(hào)C07J9/00GK102863496SQ20121036666
公開(kāi)日2013年1月9日 申請(qǐng)日期2012年9月28日 優(yōu)先權(quán)日2012年9月28日
發(fā)明者蘇劉花 申請(qǐng)人:南京澤朗農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司