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一種大規模制備人臍帶間充質干細胞因子用誘導分泌培養基的制作方法

文檔序號:12108620閱讀:來源:國知局

技術特征:

1.大規模制備人臍帶間充質干細胞因子用誘導分泌培養基,其特征在于,所述誘導分泌培養基主要由DMEM、L-丙氨酰-L-谷氨酰胺、4-2-羥乙基-1-哌嗪乙磺酸、D-葡萄糖和L-抗壞血酸溶解于磷酸鹽緩沖液而成,DMEM、L-丙氨酰-L-谷氨酰胺、4-2-羥乙基-1-哌嗪乙磺酸、D-葡萄糖和L-抗壞血酸在誘導分泌培養基中的濃度分別為400-600ml/L、1-3mmol/L、10-20μmol/L、10-20g/L、10-100μmol/L。

2.如權利要求1所述的大規模制備人臍帶間充質干細胞因子用誘導分泌培養基,其特征在于,主要由DMEM、L-丙氨酰-L-谷氨酰胺、4-2-羥乙基-1-哌嗪乙磺酸、D-葡萄糖和L-抗壞血酸溶解于磷酸鹽緩沖液而成,DMEM、4-2-羥乙基-1-哌嗪乙磺酸、D-葡萄糖和L-抗壞血酸在誘導分泌培養基中的濃度分別為500ml/L、2mmol/L、15μmol/L、15g/L、50μmol/L。

3.如權利要求1所述的大規模制備人臍帶間充質干細胞因子用誘導分泌培養基,其特征在于,所述誘導分泌培養基還包括誘導增強劑,所述誘導增強劑在誘導分泌培養基中濃度為1-2g/L,所述誘導增強劑包括10-20重量份的三磷酸腺苷、10-20重量份的三磷酸鳥苷、10-50重量份環磷酸鳥苷和5-20重量份的NaNO3

4.如權利要求3所述的大規模制備人臍帶間充質干細胞因子用誘導分泌培養基,其特征在于,所述誘導增強劑在誘導分泌培養基中濃度為1.5g/L。

5.如權利要求4所述的大規模制備人臍帶間充質干細胞因子用誘導分泌培養基,其特征在于,所述誘導增強劑包括15重量份的三磷酸腺苷、15重量份的三磷酸鳥苷、20重量份環磷酸鳥苷和10重量份的NaNO3

6.如權利要求5所述的大規模制備人臍帶間充質干細胞因子用誘導分泌培養基,其特征在于,所述誘導分泌培養基還包括分泌增強劑,所述分泌增強劑在誘導分泌培養基中濃度為0.1-1g/L,所述分泌增強劑包括10-20重量份的甘油、10-20重量份的亞麻酸、10-50重量份二十二碳六烯酸和1-10重量份的脂肪醇聚氧乙烯醚。

7.如權利要求6所述的大規模制備人臍帶間充質干細胞因子用誘導分泌培養基,其特征在于,所述分泌增強劑在誘導分泌培養基中濃度為0.5g/L。

8.如權利要求7所述的大規模制備人臍帶間充質干細胞因子用誘導分泌培養基,其特征在于,所述分泌增強劑包括15重量份的甘油、15重量份的亞麻酸、20重量份二十二碳六烯酸和5重量份的脂肪醇聚氧乙烯醚。

9.制備如權利要求1或2任一所述的大規模制備人臍帶間充質干細胞因子用誘導分泌培養基的方法,其特征在于,包括以下步驟:

a取配置培養基目標體積四分之一的磷酸鹽緩沖液,充分攪拌;

b依次加入DMEM、L-丙氨酰-L-谷氨酰胺、4-2-羥乙基-1-哌嗪乙磺酸、D-葡萄糖和L-抗壞血酸,充分攪拌;

c用磷酸鹽緩沖液定容至目標體積。

10.制備如權利要求6-8任一所述的大規模制備人臍帶間充質干細胞因子用誘導分泌培養基的方法,其特征在于,包括以下步驟:

a取配置培養基目標體積四分之一的磷酸鹽緩沖液,充分攪拌;

b1依次加入DMEM、L-丙氨酰-L-谷氨酰胺、4-2-羥乙基-1-哌嗪乙磺酸、D-葡萄糖和L-抗壞血酸,充分攪拌;

b2依次加入三磷酸腺苷、三磷酸鳥苷、環磷酸鳥苷、NaNO3和甘油,充分攪拌;

b3加入脂肪醇聚氧乙烯醚充分攪拌,依次加入亞麻酸和二十二碳六烯酸,充分攪拌;

c用磷酸鹽緩沖液定容至目標體積。

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