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一株酶活提高的苯丙氨酸脫氨酶突變體的制作方法

文檔序號:11145163閱讀:來源:國知局

技術特征:

1.一種苯丙氨酸脫氨酶突變體,其特征在于,由SEQ ID NO.1所示核苷酸序列編碼。

2.編碼權利要求1所述的苯丙氨酸脫氨酶突變體的基因。

3.攜帶權利要求2所述基因的載體或細胞。

4.一種重組表達權利要求1所述苯丙氨酸脫氨酶突變體的重組菌,其特征在于,以大腸桿菌BL21為宿主,以pET28a為表達載體。

5.一種重組表達權利要求1所述苯丙氨酸脫氨酶突變體的方法,其特征在于,是以大腸桿菌BL21為宿主,以pET28a為表達載體,將所得重組菌的種子液接種于含卡那霉素的2YT表達培養基中,37℃、200r/min振蕩培養至OD600至0.8-1.0時,加入誘導劑IPTG至0.1mM,于20℃誘導16-18h苯丙氨酸脫氨酶突變體的表達;所述2YT表達培養基含蛋白胨16g/L、酵母提取物10g/L、NaCl 5g/L。

6.根據權利要求5所述的方法,其特征在于,還包括將重組菌體破碎后,收集上清,上清膜過濾后,用His Trap HF柱分離得到苯丙氨酸脫氨酶突變體。

7.權利要求1所述的苯丙氨酸脫氨酶突變體在制備用于治療苯丙酮尿癥的藥物中的應用。

8.權利要求3所述的載體或細胞在制備用于治療苯丙酮尿癥的藥物中的應用。

9.權利要求4所述的重組菌在制備用于治療苯丙酮尿癥的藥物中的應用。

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