本發明涉及一種溫敏型殼聚糖/氧化石墨烯材料的制備方法。
背景技術：
目前，生物材料快速發展，主要針對某些生物相容性好的材料進行生物方面的應用。以殼聚糖/氧化石墨烯材料為例來說，由于殼聚糖生物相容性好、免疫排斥反應小、無細胞毒性、易降解同時具有抗菌消炎的優點被廣泛應用于生物技術領域，例如作為生物傳感器、組織工程支架、藥物緩釋載體等等，同時在復合氧化石墨烯材料以后，該材料的機械應力、電傳導性得以增強，進一步擴大了殼聚糖/氧化石墨烯的應用范圍。
然而，作為生物材料，殼聚糖/氧化石墨烯材料往往要作用在細胞培養體系中，如何能讓細胞均勻分布在殼聚糖/氧化石墨烯材料中以便實現該材料的載藥、傳感功能成為當前研究的難題。
技術實現要素：
本發明的目的是提供一種溫敏型殼聚糖/氧化石墨烯材料的制備方法，以便殼聚糖/氧化石墨烯復合材料在低于37℃時能以液態和細胞充分混勻，使得材料和細胞更加均勻、充分接觸，進一步實現殼聚糖/氧化石墨烯材料的功能。
本發明的技術方案：
一種溫敏型殼聚糖/氧化石墨烯材料的制備方法，步驟如下：
制備濃度為100-600mg/l的氧化石墨烯水溶液，超聲20min，向氧化石墨烯水溶液中加入殼聚糖粉末，使得殼聚糖/氧化石墨烯的質量比為0.1～0.6，冰水浴條件下磁力攪拌，并逐滴滴入冰醋酸，使得冰醋酸/水的體積比為0.1％～0.6％，持續攪拌2h，得到澄清透明的溶液；配置β-甘油膦酸二鈉鹽溶液，在冰水浴條件下，向澄清透明的溶液中逐滴滴入β-甘油磷酸二鈉鹽溶液，使得β-甘油磷酸二鈉鹽的濃度在0.1-0.2mol/l，充分攪拌30min，即得到溫敏型殼聚糖/氧化石墨烯；保存在4℃條件下，待用時取出，置于37℃水浴10-15min，即得溫敏型殼聚糖/氧化石墨烯材料。
本發明的有益效果：本發明能夠拓寬殼聚糖/氧化石墨烯材料在生物技術方面的應用，以該方法制備的殼聚糖/氧化石墨烯材料能夠在進行生物利用之前在低溫條件下先和目的細胞充分混合。
具體實施方式
以下結合技術方案，進一步說明本發明的具體實施方式。
實施例1：
取100mg/l的氧化石墨烯水溶液10ml，冰水浴條件下，向其中加入200mg殼聚糖粉末，攪拌成乳濁液，由于殼聚糖不溶于水，向混合的乳濁液中逐滴加入60微升冰醋酸，邊加邊攪拌，待乳濁液逐漸澄清透明，配置56％β-甘油膦酸二鈉鹽溶液，逐滴滴入置于磁力攪拌器，充分攪拌0.5小時，存放于4℃冰箱，待用時取出，37℃水浴10-15min，即得100mg/l殼聚糖/氧化石墨烯生物材料(以氧化石墨烯濃度為基準)。
實施例2：
采用200mg/l的氧化石墨烯水溶液10ml，冰水浴條件下，向其中加入200mg殼聚糖粉末，攪拌成乳濁液，向混合的乳濁液中逐滴加入60微升冰醋酸，邊加邊攪拌，待乳濁液逐漸澄清透明，配置56％β-甘油膦酸二鈉鹽溶液，逐滴滴入置于磁力攪拌器，充分攪拌0.5小時，存放于4℃冰箱，待用時取出，37℃水浴10-15min，即得200mg/l殼聚糖/氧化石墨烯生物材料(以氧化石墨烯濃度為基準)。
實施例3：
取400mg/l的氧化石墨烯水溶液10ml，冰水浴條件下，向其中加入200mg殼聚糖粉末，攪拌成乳濁液，由于殼聚糖不溶于水，向混合的乳濁液中逐滴加入60微升冰醋酸，邊加邊攪拌，待乳濁液逐漸澄清透明，配置56％β-甘油膦酸二鈉鹽溶液，逐滴滴入置于磁力攪拌器，充分攪拌0.5小時，存放于4℃冰箱，待用時取出，37℃水浴10-15min，即得400mg/l殼聚糖/氧化石墨烯生物材料(以氧化石墨烯濃度為基準)。
實施例4：
取600mg/l的氧化石墨烯水溶液10ml，冰水浴條件下，向其中加入200mg殼聚糖粉末，攪拌成乳濁液，由于殼聚糖不溶于水，向混合的乳濁液中逐滴加入60微升冰醋酸，邊加邊攪拌，待乳濁液逐漸澄清透明，配置56％β-甘油膦酸二鈉鹽溶液，逐滴滴入置于磁力攪拌器，充分攪拌0.5小時，存放于4℃冰箱，待用時取出，37℃水浴10-15min，即得600mg/l殼聚糖/氧化石墨烯生物材料(以氧化石墨烯濃度為基準)。
本發明方法的磁力攪拌過程是處于紫外燈照射下進行，經過紫外燈持續照射，可以營造一種無菌環境，同時減少支架材料內部的微生物。
本發明優選包括在制備殼聚糖/氧化石墨烯復合支架時不采用交聯劑。