1.修飾的動物細胞,其在與基因組監(jiān)測、細胞周期控制和/或細胞死亡控制相關的一個或多個基因中具有基因修飾,并且其中所述動物是適合人類或動物食用的任選地用于農業(yè)中的動物物種。
2.根據(jù)權利要求1的修飾的動物細胞,其中所述修飾使所述細胞永生化。
3.根據(jù)權利要求1或權利要求2的修飾的動物細胞,其中所述動物選自豬、牛、家禽、綿羊、山羊、魚、甲殼動物或軟體動物。
4.根據(jù)前述權利要求中任一項所述的修飾的動物細胞,其中所述修飾的細胞是體細胞。
5.根據(jù)權利要求4所述的修飾的動物細胞,其中所述修飾的細胞選自以下細胞類型中的一種:成肌細胞、成纖維細胞、肌成纖維細胞、脂肪來源的干細胞、上皮細胞、間充質干細胞、衛(wèi)星細胞或肝細胞。
6.根據(jù)前述權利要求中任一項所述的修飾的動物細胞,其中所述細胞不表達外源性核酸以操縱所述基因組監(jiān)測、細胞周期控制和/或細胞死亡控制通路。
7.根據(jù)前述權利要求中任一項所述的修飾的動物細胞,其中所述動物細胞在以下基因中的一個或多個中具有基因修飾:rb1、tp53和/或ras基因。
8.根據(jù)前述權利要求中任一項所述的修飾的動物細胞,其中所述動物細胞在rb1中具有基因修飾。
9.根據(jù)前述權利要求中任一項所述的修飾的動物細胞,其中所述動物細胞在tp53中具有基因修飾。
10.根據(jù)前述權利要求中任一項所述的修飾的動物細胞,其中所述動物細胞在ras基因中具有基因修飾。
11.根據(jù)前述權利要求中任一項所述的修飾的動物細胞,其中所述動物細胞在rb1中和在tp53中具有基因修飾。
12.根據(jù)前述權利要求中任一項所述的修飾的動物細胞,其中所述動物細胞在rb1中和在ras基因中具有基因修飾。
13.根據(jù)前述權利要求中任一項所述的修飾的動物細胞,其中所述動物細胞在tp53中和在ras基因中具有基因修飾。
14.根據(jù)前述權利要求中任一項所述的修飾的動物細胞,其中所述動物細胞在rb1、tp53中和在ras基因中具有基因修飾。
15.根據(jù)權利要求7、10、12、13或14中任一項所述的修飾的動物細胞,其中所述ras基因是hras、nras或kras。
16.根據(jù)前述權利要求中任一項所述的修飾的動物細胞,其中所述修飾在所述一個或多個基因的啟動子區(qū)或編碼區(qū)中。
17.根據(jù)前述權利要求中任一項所述的修飾的動物細胞,其中使用靶向基因組修飾引入所述修飾。
18.根據(jù)權利要求17所述的修飾的動物細胞,其使用內切核酸酶。
19.根據(jù)權利要求18所述的修飾的動物細胞,其中所述內切核酸酶選自talen、zfn或crispr/cas9。
20.根據(jù)前述權利要求中任一項所述的修飾的動物細胞,其中所述基因選自rb1和/或tp53中的一個或兩者,并且所述修飾是功能喪失修飾。
21.根據(jù)權利要求20所述的修飾的動物細胞,其中所述功能喪失修飾包括基因的敲除。
22.根據(jù)權利要求1至21中任一項所述的修飾的動物細胞,其中所述基因是ras基因,所述修飾是超活化修飾,任選地,其中所述ras基因是hras、nras或kras。
23.根據(jù)權利要求22所述的修飾的動物細胞,其中所述超活化修飾包含一個或多個氨基酸置換。
24.根據(jù)權利要求22所述的修飾的動物細胞,其中所述一或多個氨基酸置換包含置換在seq?id?no:46、47或48的位置12或13處的甘氨酸或者位置61處的谷氨酰胺。
25.根據(jù)權利要求22所述的修飾的動物細胞,其中所述一個或多個氨基酸置換包括置換在seq?id?no:46、47或48的位置12或13處的甘氨酸,其中所述一個或多個氨基酸選自包含丙氨酸、半胱氨酸、天冬氨酸、精氨酸、絲氨酸和纈氨酸的列表。
26.根據(jù)權利要求22所述的修飾的動物細胞,其中所述一個或多個氨基酸置換包括用纈氨酸置換seq?id?no:46、47或48的位置12或13處的甘氨酸。
27.根據(jù)權利要求22所述的修飾的動物細胞,其中所述一個或多個氨基酸置換包括置換在seq?id?no:46、47或48的位置61處的甘氨酸,其中所述一個或多個氨基酸選自包含谷氨酸、組氨酸、賴氨酸、脯氨酸和精氨酸的列表。
28.制備培育肉或培養(yǎng)肉產品的方法,其包括培養(yǎng)根據(jù)權利要求1至27中任一項所述的修飾的動物細胞。
29.根據(jù)權利要求28所述的方法,其中所述方法包括所述修飾的細胞的連續(xù)或分批培養(yǎng)。
30.根據(jù)權利要求28或29所述的方法,其包括使所述細胞形成組織樣結構的步驟。
31.根據(jù)權利要求28至30中任一項所述的方法,其中所述細胞形成肌肉組織樣結構。
32.制備根據(jù)權利要求1至27中任一項所述的修飾的動物細胞的方法,其中所述方法包括在與基因組監(jiān)測、細胞周期控制和/或細胞死亡控制相關的一個或多個基因中引入基因修飾,并且其中所述動物是適合人類或動物食用的任選地用于農業(yè)中的動物。
33.永生化動物細胞的方法,其中所述方法包括在與基因組監(jiān)測、細胞周期控制和/或細胞死亡控制相關的一個或多個基因中引入基因修飾,并且其中所述動物是適合人類或動物食用的任選地用于農業(yè)中的動物。
34.根據(jù)權利要求32或33所述的方法,其中所述基因修飾改變與基因組監(jiān)測、細胞周期控制和/或細胞死亡控制相關的一個或多個基因的表達或功能。
35.根據(jù)權利要求32至34中任一項所述的方法,其中所述動物細胞是永生化的。
36.根據(jù)權利要求32至35中任一項所述的方法,其中所述動物選自豬、牛、家禽、綿羊、山羊、魚、甲殼動物或軟體動物。
37.根據(jù)權利要求32至36中任一項所述的方法,其中所述修飾的細胞是體細胞。
38.根據(jù)權利要求37所述的修飾的動物細胞,其中所述修飾的細胞選自以下細胞類型中的一種:成肌細胞、成纖維細胞、肌成纖維細胞、脂肪來源的干細胞、上皮細胞、間充質干細胞、衛(wèi)星細胞或肝細胞。
39.根據(jù)權利要求32至38所述的方法,其中所述細胞不表達外源性核酸以操縱基因組監(jiān)測、細胞周期控制和/或細胞死亡控制。
40.根據(jù)權利要求32至39中任一項所述的方法,其中所述動物細胞在以下基因中的一個或多個中具有基因修飾:rb1、tp53和/或ras基因。
41.根據(jù)權利要求32至40中任一項所述的方法,其中所述動物細胞在rb1中具有基因修飾。
42.根據(jù)權利要求32至41中任一項所述的方法,其中所述動物細胞在tp53中具有基因修飾。
43.根據(jù)權利要求32至42中任一項所述的方法,其中所述動物細胞在ras基因中具有基因修飾。
44.根據(jù)權利要求32至43中任一項所述的方法,其中所述動物細胞在rb1中和在tp53中具有基因修飾。
45.根據(jù)權利要求32至44中任一項所述的方法,其中所述動物細胞在rb1中和在ras基因中具有基因修飾。
46.根據(jù)權利要求32至45中任一項所述的方法,其中所述動物細胞在tp53中和在ras基因中具有基因修飾。
47.根據(jù)權利要求32至46中任一項所述的方法,其中所述動物細胞在rb1、tp53中和在ras基因中具有基因修飾。
48.根據(jù)權利要求40、43、45、46或47中任一項所述的方法,其中所述ras基因是hras、nras或kras。
49.根據(jù)權利要求32至48中任一項所述的方法,其中對所述一個或多個基因的啟動子區(qū)或編碼區(qū)進行所述修飾。
50.根據(jù)權利要求32至49所述的方法,其中使用靶向基因組修飾引入所述修飾。
51.根據(jù)權利要求50所述的方法,其使用內切核酸酶。
52.根據(jù)權利要求51所述的方法,其中所述內切核酸酶選自talen、zfn或crispr/cas9。
53.根據(jù)權利要求32至52所述的方法,其中所述基因選自rb1和/或tp53中的一個或兩者,并且所述修飾是功能喪失修飾。
54.根據(jù)權利要求53所述的方法,其中所述功能喪失修飾包括基因的敲除。
55.根據(jù)權利要求32至54中任一項所述的方法,其中所述基因是ras基因,并且所述修飾是超活化修飾,任選地,其中所述ras基因是hras、nras或kras。
56.根據(jù)權利要求55所述的方法,其中所述超活化修飾包括一個或多個氨基酸置換。
57.根據(jù)權利要求55所述的方法,其中所述一個或多個氨基酸置換包括置換在seq?idno:46、47或48的位置12或13處的甘氨酸或者位置61處的谷氨酰胺。
58.根據(jù)權利要求55所述的方法,其中所述一個或多個氨基酸置換包括置換在seq?idno:46、47或48的位置12或13處的甘氨酸,其中所述一個或多個氨基酸選自包含丙氨酸、半胱氨酸、天冬氨酸、精氨酸、絲氨酸和纈氨酸的列表。
59.根據(jù)權利要求55所述的方法,其中所述一個或多個氨基酸置換包括用纈氨酸置換在seq?id?no:46、47或48的位置12或13處的甘氨酸。
60.根據(jù)權利要求55所述的方法,其中所述一個或多個氨基酸置換包括置換在seq?idno:46、47或48的位置61處的甘氨酸,其中所述一個或多個氨基酸選自包含谷氨酸、組氨酸、賴氨酸、脯氨酸和精氨酸的列表。
61.培育或培養(yǎng)的動物組織或者培育或培養(yǎng)肉產品,其包含根據(jù)權利要求1至27中任一項所述的修飾的細胞。
62.根據(jù)權利要求61所述的培養(yǎng)的動物組織,其中所述培養(yǎng)是懸浮培養(yǎng)。
63.根據(jù)權利要求1至27中任一項所述的修飾的動物細胞用于細胞農業(yè)的用途。
64.制備永生化動物細胞系的方法,所述方法包括根據(jù)權利要求16至27中任一項所述的方法。
65.指導rna,其用于根據(jù)權利要求32至60或權利要求64中任一項所述的制備修飾的、永生化細胞或永生化動物細胞系的方法中。
66.指導rna,其包含選自seq?id?no.15、16、17、18的任一序列。
67.根據(jù)權利要求66所述的指導rna,其用于根據(jù)權利要求32至60中任一項所述的制備修飾的或永生化細胞的方法中。
68.根據(jù)權利要求67所述的指導rna,其中所述修飾的細胞是根據(jù)權利要求1至31中任一項的修飾的細胞。
69.部件的試劑盒,其包含根據(jù)權利要求65至68中任一項所述的指導rna。