本發(fā)明涉及生物制藥，更具體地說，本發(fā)明涉及一種制備nmn的方法。

背景技術：

1、在現(xiàn)代生物制藥研究的蓬勃發(fā)展進程中，煙酰胺單核苷酸(nmn)逐漸成為備受矚目的焦點物質。nmn在生物細胞的代謝進程里占據(jù)著極為關鍵的地位，它經過特定的生化反應被煙酰胺核苷酸腺苷轉移酶腺苷化后，能夠順利轉化為細胞生存所必需的煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(nad，即輔酶i)。在此過程中，nmn還直接參與體內的腺苷轉移活動，其在生物細胞內的含量水平對nad的濃度有著直接且重要的影響，進而在生物細胞能量生成這一核心環(huán)節(jié)中發(fā)揮著不可或缺的作用。

2、隨著科學研究的持續(xù)深入，nmn在醫(yī)療保健領域所展現(xiàn)出的巨大潛力不斷被挖掘出來。眾多研究表明，nmn在延緩衰老進程、應對帕金森等老年疾病、精細調節(jié)胰島素分泌以及影響mrna表達等諸多方面都有著積極的表現(xiàn)，這使得其在醫(yī)藥和保健品市場上的應用前景極為廣闊，市場對nmn的需求呈現(xiàn)出迅猛增長的態(tài)勢。

3、然而，當前已有的nmn制備方法都存在著不同程度的缺陷。酵母發(fā)酵法雖然在一定程度上能夠實現(xiàn)nmn的生產，但在生產過程中會不可避免地殘留有機溶劑，這些殘留物質可能會對產品的純度和安全性產生潛在的威脅，限制了其在高端醫(yī)藥領域的應用。化學合成法盡管具有合成路線相對明確的優(yōu)點，但在實際操作中存在成本高昂的問題，并且在合成過程中容易產生手性化合物，后續(xù)復雜的分離和提純工序不僅增加了生產成本，還降低了生產效率。而傳統(tǒng)的生物催化法雖然在環(huán)保方面具有一定的優(yōu)勢，不含有機溶劑殘留且不存在手性問題，所制備的nmn與機體內的同型物質較為相似，但由于其通常采用煙酰胺和5’磷酸核糖基-1’-焦磷酸(prpp)或amp或核糖作為底物進行催化反應，其中prpp的市場價格昂貴且供應來源極為有限，這就導致了采用這種生物催化法制備nmn的成本居高不下，在大規(guī)模工業(yè)化生產和市場推廣應用方面面臨著巨大的阻礙。

4、綜上所述，鑒于nmn在生物醫(yī)學和健康產業(yè)中的重要地位以及現(xiàn)有制備方法的局限性，因此，現(xiàn)提出一種全新的、能夠有效克服現(xiàn)有技術缺陷的nmn制備方法，以滿足日益增長的市場需求，并推動nmn在更廣泛領域的應用和發(fā)展。

技術實現(xiàn)思路

1、為了克服現(xiàn)有技術的上述缺陷，本發(fā)明提供一種制備nmn的方法，以解決上述背景技術中提出的問題。

2、為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供如下技術方案：一種制備nmn的方法，包括以下步驟：

3、s1：選擇適宜的反應容器中，將核糖、多聚磷酸鹽、rk酶混合，并添加高能物質atp和ppk1酶，構建反應體系，促使核糖與多聚磷酸鹽經rk酶催化，并在atp和ppk1酶作用下合成磷酸核糖，形成反應液；

4、s2：取s1反應所得反應液，加入煙酰胺、多聚磷酸鹽、prpps酶、nmprt酶，形成新的反應體系，實現(xiàn)nmn的合成。

5、優(yōu)選地，所述s1和s2步驟中反應溫度為35-38℃，且處于常壓狀態(tài)下。

6、優(yōu)選地，所述s1中采用20％氫氧化鈉溶液調控ph，所述ph調整至5.0-8.0。

7、優(yōu)選地，所述s1中反應時間為1-1.5h。

8、優(yōu)選地，所述s2中首先采用20％碳酸鈉溶液調控ph，再加入si中的反應液時采用20％氫氧化鈉溶液調控ph，且將ph均調整至5.0-8.0。

9、優(yōu)選地，所述s2中反應時間為2-4h。

10、優(yōu)選地，所述s1中轉化為磷酸核糖的具體方法步驟包括：

11、首先，在反應容器內配合濃度為50mm的磷酸鹽溶液；

12、隨后，加入適量的氯化鎂、atp和底物核糖，并進行保溫攪拌；

13、然后，檢測反應體系的ph值，并用堿性溶液調ph，再加入rk酶和ppk1酶，隨后加水進行均勻攪拌；

14、最后，勻速補加多聚磷酸鈉，40min內補完，整個反應過程在常壓下保溫進行，用20％氫氧化鈉溶液控制ph，反應一定時間后底物完全轉化完成。

15、優(yōu)選地，所述s2中轉化為nmn的具體方法步驟包括：

16、首先，在反應容器中加入濃度為50mm磷酸鹽緩沖液；

17、隨后，加入適量的氯化鎂、煙酰胺，并進行保溫攪拌；

18、然后，檢測反應體系的ph值，并用堿性溶液調ph，再加入prpps酶、ppk1酶、ppk2酶和prpp酶，攪拌均勻。

19、最后，常壓下保溫攪拌反應，均勻加入s1中的反應液，反應過程中用堿性溶液控制ph，反應一定時間后完成轉化，制備出nmn。

20、本發(fā)明的技術效果和優(yōu)點：

21、1、在反應過程中，通過ppk1酶和ppk2酶分別在第一步和第二步反應里對atp進行循環(huán)利用，極大地減少了atp的消耗，有效降低了生產成本，提高了生產效益。

22、2、整個制備過程在常溫、常壓、中性條件下進行，對設備的要求相對較低，降低了設備投入成本，同時也減少了能源消耗，并且操作相對簡便，易于控制和實施，有利于大規(guī)模工業(yè)化生產。

23、3、第一步合成磷酸核糖的轉化率大于99％，第二步合成nmn的轉化率大于65％，較高的轉化率保證了原料的有效利用，減少了原料浪費，提高了生產效率，降低了生產成本，使得產品在市場上更具競爭力。

技術特征：

1.一種制備nmn的方法，其特征在于，包括以下步驟：

2.根據(jù)權利要求1所述的一種制備nmn的方法，其特征在于，所述s1和s2步驟中反應溫度為35-38℃，且處于常壓狀態(tài)下。

3.根據(jù)權利要求1所述的一種制備nmn的方法，其特征在于，所述s1中采用20％氫氧化鈉溶液調控ph，所述ph調整至5.0-8.0。

4.根據(jù)權利要求1所述的一種制備nmn的方法，其特征在于，所述s1中反應時間為1-1.5h。

5.根據(jù)權利要求1所述的一種制備nmn的方法，其特征在于，所述s2中首先采用20％碳酸鈉溶液調控ph，再加入si中的反應液時采用20％氫氧化鈉溶液調控ph，且將ph均調整至5.0-8.0。

6.根據(jù)權利要求1所述的一種制備nmn的方法，其特征在于，所述s2中反應時間為2-4h。

7.根據(jù)權利要求1所述的一種制備nmn的方法，其特征在于，所述s1中轉化為磷酸核糖的具體方法步驟包括：

8.根據(jù)權利要求1所述的一種制備nmn的方法，其特征在于，所述s2中轉化為nmn的具體方法步驟包括：

技術總結
本發(fā)明公開了一種制備NMN的方法，具體涉及生物制藥技術領域，該方法首先在適宜反應容器中，將核糖、多聚磷酸鹽、RK酶與高能物質ATP和PPK1酶混合，在35?38℃、常壓及pH為5.0?8.0條件下反應1?1.5小時，合成磷酸核糖。接著取該反應液，加入煙酰胺、多聚磷酸鹽、PRPPS酶、NMPRT酶等，在同樣溫度、常壓及pH條件下反應2?4小時，實現(xiàn)NMN合成。此過程中，PPK1酶和PPK2酶可循環(huán)利用ATP，且反應轉化率高，條件溫和，有效降低成本，為NMN的高效制備提供了新途徑。

技術研發(fā)人員：請求不公布姓名,請求不公布姓名
受保護的技術使用者：叁爻生物科技（上海）有限公司
技術研發(fā)日：
技術公布日：2025/4/28