本發(fā)明屬于植物分子生物學、基因工程，具體涉及一種百合花青素合成調控基因lvwrky75及其應用，是參與百合花色合成過程中的重要調控因子。

背景技術：

1、觀賞植物被廣泛栽培于公園中、道路邊以及盆栽陳設于室內，一方面可美化環(huán)境，另一方面可凈化空氣，改善環(huán)境質量。因而市場需求量大，栽培面積逐年擴大，商業(yè)價值頗高。花是觀賞植物的主要觀賞器官，花的顏色是最重要的觀賞性狀，也是決定花觀賞價值的重要因素之一。因此，培育不同花色品種是觀賞植物育種的重要目標。目前，一些轉錄因子通過調控花色素苷生物合成相關結構基因的表達，從而影響這些編碼酶的活性，進而調節(jié)花青素的積累。然而，具體的調控機制仍需要進一步深入研究。因此，百合作為著名的觀賞花卉之一，探究其花色形成機理顯得尤為重要。

技術實現(xiàn)思路

1、為了解決上述技術問題，本發(fā)明提供一種百合花青素合成調控基因lvwrky75及其應用。

2、本發(fā)明是這樣實現(xiàn)的，提供一種百合花青素合成調控基因lvwrky75，所述百合花青素合成調控基因lvwrky75的核苷酸序列如seq?id?no.1所示。

3、提供一種百合花青素合成調控基因lvwrky75編碼的蛋白質，所述蛋白質的氨基酸序列如seq?id?no.2所示。

4、提供了擴增上述的百合花青素合成調控基因lvwrky75的引物，提供一種重組載體，含有上述的百合花青素合成調控基因lvwrky75。

5、具體的，上述重組載體的制備過程為：以百合花瓣的cdna為模板，pri101-lvwrky75-f和pri101-lvwrky75-r為引物擴增lvwrky75基因編碼區(qū)全長，回收目的小片段；應用salⅰ和bamhⅰ對載體pri101進行酶切，回收線性大片段；利用hd?cloning?plus將lvwrky75目的小片段連接到pri101線性大片段上，利用熱激法將連接產(chǎn)物轉入大腸桿菌dh5α中，經(jīng)菌落pcr、測序鑒定后，搖菌、提質粒獲得重組載體pri101-lvwrky75。

6、提供了上述的百合花青素合成調控基因lvwrky75的應用，用于調控植物的花青素合成。

7、與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明的優(yōu)點在于：

8、本發(fā)明在百合中發(fā)現(xiàn)了一種百合花青素合成調控基因lvwrky75，并得到了該基因的過表達載體和沉默表達載體。將過表達lvwrky75基因轉化到野生型擬南芥中，獲得第三代轉基因植株后，對其轉基因株系中l(wèi)vwrky75基因及其下游靶基因的表達量進行檢測，證明lvwrky75基因具有促進花青素合成的作用。利用酵母單雜交技術、凝膠阻滯實驗以及雙分子螢光互補實驗證明lvwrky75基因在西諾紅百合花色調控過程中起正調控作用，這些發(fā)現(xiàn)為進一步了解植物花色形成的分子機制和遺傳調控網(wǎng)絡提供了重要的實驗和理論基礎。

技術特征：

1.一種百合花青素合成調控基因lvwrky75，其特征在于，所述百合花青素合成調控基因lvwrky75的核苷酸序列如seq?id?no.1所示。

2.一種百合花青素合成調控基因lvwrky75編碼的蛋白質，其特征在于，所述蛋白質的氨基酸序列如seq?id?no.2所示。

3.擴增權利要求1所述的百合花青素合成調控基因lvwrky75的引物，其特征在于，含有權利要求1所述的百合花青素合成調控基因lvwrky75。

4.一種重組載體，其特征在于，含有權利要求1所述的百合花青素合成調控基因lvwrky75。

5.根據(jù)權利要求4所述的重組載體，其特征在于，以百合花瓣的cdna為模板，pri101-lvwrky75-f和pri101-lvwrky75-r為引物擴增lvwrky75基因編碼區(qū)全長，回收目的小片段；應用salⅰ和bamhⅰ對載體pri101進行酶切，回收線性大片段；利用hd?cloning?plus將lvwrky75目的小片段連接到pri101線性大片段上，利用熱激法將連接產(chǎn)物轉入大腸桿菌dh5α中，經(jīng)菌落pcr、測序鑒定后，搖菌、提質粒獲得重組載體pri101-lvwrky75。

6.權利要求1所述的百合花青素合成調控基因lvwrky75的應用，其特征在于，用于調控植物的花青素合成。

技術總結
本發(fā)明屬于植物分子生物學、基因工程技術領域，具體涉及一種百合花青素合成調控基因LvWRKY75及其應用，本發(fā)明得到了該基因的過表達載體和沉默表達載體。將過表達LvWRKY75基因轉化到野生型擬南芥中，獲得第三代轉基因植株后，對其轉基因株系中LvWRKY75基因及其下游靶基因的表達量進行檢測，證明LvWRKY75基因具有促進花青素合成的作用。利用酵母單雜交技術、凝膠阻滯實驗以及雙分子螢光互補實驗證明LvWRKY75基因在西諾紅百合花色調控過程中起正調控作用，這些發(fā)現(xiàn)為進一步了解植物花色形成的分子機制和遺傳調控網(wǎng)絡提供了重要的實驗和理論基礎。

技術研發(fā)人員：孫弋博,陳麗靜,王旭,孫紅梅,張麗,姜程奕,張選坤,張明慧
受保護的技術使用者：沈陽農業(yè)大學
技術研發(fā)日：
技術公布日：2025/4/24