一種基于人表皮生長因子的靜電紡絲溶液及其制備方法
【技術領域】
[0001]本發明屬于醫藥領域，涉及一種靜電紡絲溶液，特別涉及一種基于人表皮生長因子的靜電紡絲溶液及其制備方法。
【背景技術】
[0002]人表皮生長因子(hEGF)是一個具有53個氨基酸殘基，分子量6045道爾頓的單鏈多肽。它能夠有效地刺激或抑制細胞的增殖、促進細胞的分化，具有非常高的生物活性。同時，極微量的hEGF就能強烈地促進表皮細胞的生長和增殖，還能有效地刺激細胞外透明質酸等大分子物質的分泌與合成。臨床醫學表明，hEGF具有極強的促進表皮生長代謝的作用，主要用于促進外科手術傷口及創面的提前愈合，并且hEGF可使皮膚細嫩光滑，具有顯著的美容效果。
[0003]但是，由于hEGF在常溫下裸露空氣中難以維持其生物學活性、易被蛋白酶降解而失去活性及難以透皮吸收等一系列問題，極大地限制了 hEGF的實際應用。
[0004]姜黃素是從姜科植物姜黃中提取的一種活性成分，具有抗炎、抗氧、抗菌、抗腫瘤等活性。然而，研究表明，姜黃素水溶性差、難以透皮吸收等缺點，從而限制了姜黃素的實際應用。
[0005]此外，銀一來自土壤的天然無機抗菌劑，作用十分廣泛，能夠殺死650多種致病菌，抗菌率達99.9%以上。微量濃度的銀離子對人體基本無毒害作用，具有安全性高、抗菌持續時間長等優點。但是，由于銀容易與靜電紡絲裝置中的金屬針頭發生置換反應，從而降低銀的殺菌效率。
[0006]我們知道，作為傷口包覆材料必須要有較高的氣體透過性，能夠阻隔細菌侵染和防止脫水等作用。但是，一般的傷口包覆材料功能單一、抗菌效果差、氣體透過性不好、不易保持藥物活性因子的活性且藥物活性因子不易被表皮細胞吸收。
[0007]然而，靜電紡絲作為一種制備聚合物納米纖維的技術，利用電場力對聚合物溶液進行紡絲的過程中，可以得到孔隙率小、比表面積大、直徑在納米級的超細納米纖維。從病理學理論可知，藥物和藥物載體的表面積越大，藥物顆粒的分解速率和透皮吸收效果就越好。而且，納米纖維材料能夠均勻地黏附在傷口上，使傷口血液很快凝結，起到止血的作用。因此，借助靜電紡絲技術將藥物和藥物載體制成納米纖維能夠有效解決上述問題。

【發明內容】

[0008]本發明的目的在于針對上述現有技術中存在的問題與缺陷，提出了一種基于人表皮生長因子的靜電紡絲溶液及其制備方法。
[0009 ]本發明擬采用以下技術方案:
一種基于人表皮生長因子的靜電紡絲溶液及其制備方法，其特征在于它是按以下重量比的原料和方法制成靜電紡絲溶液:
人表皮生長因子50-100ug、透皮吸收促進劑l-8g、活性穩定劑20-40g、蛋白酶抑制劑5-10g、活性促進劑l-10g、薰衣草精油0.01-0.03ml、維生素E l_20mg、醋酸銀6_12ml、姜黃素5-20mg、乙醇70-100ml、PBS溶液10ml、丙三醇5_8ml、適量聚丙烯腈(PAN)、適量二甲基甲酰胺(DMF) 0
[0010]所述醋酸銀為弱電解質醋酸銀，且其摩爾濃度為0.04-0.18 mol/L;所述乙醇濃度90%以上;所述活性促進劑是純度大于95%的水溶性膠原蛋白；所述PBS溶液PH值為4.8-7.5;所述PAN的分子量為Mw=150000 g/mol;所述透皮吸收促進劑是丙二醇、巰基乙酸|丐中任一種;所述活性穩定劑是透明質酸、右旋糖酐中任一種;所述蛋白酶抑制劑是硼酸亮氨酸、N-乙酰半胱氨酸中任一種。
[0011]將上述各組分按以下步驟制備:
(I)人表皮生長因子溶液配制
將透皮吸收促進劑l_8g、活性穩定劑20-40g、蛋白酶抑制劑5-10g、活性促進劑HOg加入到100ml PBS溶液中溶解，然后向溶液中添加5-8ml丙三醇混勻后分裝，置于真空冷凍機中將制品降溫至2_8°C。隨后向制品中添加50-100ug人表皮生產因子并混勻，制成人表皮生長因子溶液，并在2_8°C溫度下保存備用。
[0012](2)專用溶媒配制
將薰衣草精油0.01-0.03ml、維生素E l_20mg、姜黃素5_20mg加入到70_100ml乙醇中混勻后用過濾機過濾得到過濾液I。取醋酸銀6-12ml與過濾液I混勻后得到專用溶媒。
[0013](3)紡絲溶液制備
將聚丙烯腈(PAN)直接溶解于二甲基甲酰胺(DMF)中，配制成濃度為7wt%-9wt%的溶液I。然后，將配制好的人表皮生長因子溶液、專用溶媒和溶液I按一定比例混合，配成總濃度為40-55%的紡絲溶液，并將紡絲溶液在2-8°C溫度下保存。
[0014]本發明外觀為淡黃色透明液體，具有良好的穩定性。
[0015]有益效果:中國專利《便攜式大氣輝光放電等離子體射流及靜電紡絲一體裝置》(申請號:201410704814.3，申請公布號:CN 104372423 A)，公布了一種便攜式大氣輝光放電等離子體射流及靜電紡絲一體裝置。利用靜電紡絲技術對本發明進行紡絲，可以得到比表面積大、孔隙率小的藥物和藥物載體納米纖維。人表皮生長因子在納米纖維中可以保持其活性，并且由于納米纖維比表面積大、孔隙率小的特點，納米纖維中的藥物顆粒分解速率和透皮吸收效果好，生物利用率高和氣體透過性好等優點。此外，本發明采用弱電解質醋酸銀作為銀源，可以有效減小或者防止銀離子跟靜電紡絲裝置中的金屬針頭發生置換反應，從而提高銀離子的殺菌效率。因此，本發明利用靜電紡絲技術在臨床醫學、美容等領域具有良好的市場前景。
【附圖說明】
[0016]圖1為本發明通過靜電紡絲裝置制備納米纖維的示意圖。其中，靜電紡絲裝置(1)，紡絲溶液(2)，納米纖維(3)，接收物體(4)。
【具體實施方式】
[0017]以下通過實施例進一步闡述本發明一種基于人表皮生長因子的靜電紡絲溶液及其制備方法，但是，應當理解為，這些實施例僅用于更詳細具體地說明之用，而不應理解為用于以任何形式限制本發明。
[0018]實施例1
精確稱取巰基乙酸I丐3g、透明質酸23g、N-乙酰半胱氨酸5g、水溶性膠原蛋白3g加入到100ml PBS溶液中溶解，然后向溶液中添加6ml丙三醇混勻后分裝，置于真空冷凍機中將制品降溫至2-8°C。隨后向制品中添加68ug人表皮生產因子并混勻，制成人表皮生長因子溶液，并在2-8°C溫度下保存備用。將薰衣草精油0.01ml、維生素E 3mg、姜黃素Smg加入到75ml乙醇中混勻后用過濾機過濾得到過濾液I。取醋酸銀7ml與過濾液I混勻后得到專用溶媒。將聚丙烯腈(PAN)直接溶解于二甲基甲酰胺(DMF)中，配制成濃度為7.3wt%的溶液I。然后，將配制好的人表皮生長因子溶液、專用溶媒和溶液I按一定比例混合，配成總濃度為42%的紡絲溶液，并將紡絲溶液在2-8 0C溫度下保存。
[0019]實施例2
精確稱取丙二醇4g、透明質酸27g、硼酸亮氨酸6g、水溶性膠原蛋白4.3g加入到10mlPBS溶液中溶解，然后向溶液中添加6ml丙三醇混勻后分裝，置于真空冷凍機中將制品降溫至2-8°C。隨后向制品中添加71ug人表皮生產因子并混勻，制成人表皮生長因子溶液，并在2_8°C溫度下保存備用。將薰衣草精油0.01ml、維生素E 5mg、姜黃素6mg加入到75ml乙醇中混勻后用過濾機過濾得到過濾液I。取醋酸銀7ml與過濾液I混勻后得到專用溶媒。將聚丙烯腈(PAN)直接溶解于二甲基甲酰胺(DMF)中，配制成濃度為7.5wt%的溶液I。然后，將配制好的人表皮生長因子溶液、專用溶媒和溶液I按一定比例混合，配成總濃度為45%的紡絲溶液，并將紡絲溶液在2-8°C溫度下保存。
[0020]實施例3
精確稱取丙二醇5.5g、右旋糖酐31g、N-乙酰半胱氨酸7g、水溶性膠原蛋白5.5g加入到100ml PBS溶液中溶解，然后向溶液中添加6ml丙三醇混勻后分裝，置于真空冷凍機中將制品降溫至2-8°C。隨后向制品中添加76ug人表皮生產因子并混勻，制成人表皮生長因子溶液，并在2-8°C溫度下保存備用。將薰衣草精油0.01ml、維生素E 8mg、姜黃素12mg加入到80ml乙醇中混勻后用過濾機過濾得到過濾液I。取醋酸銀6ml與過濾液I混勻后得到專用溶媒。將聚丙烯腈(PAN)直接溶解于二甲基甲酰胺(DMF)中，配制成濃度為8wt%的溶液I。然后，將配制好的人表皮生長因子溶液、專用溶媒和溶液I按一定比例混合，配成總濃度為49%的紡絲溶液，并將紡絲溶液在2-8 0C溫度下保存。
[0021 ] 實施例4
精確稱取巰基乙酸鈣7.2g、右旋糖酐36g、硼酸亮氨酸8g、水溶性膠原蛋白7.5g加入到100ml PBS溶液中溶解，然后向溶液中添加7ml丙三醇混勻后分裝，置于真空冷凍機中將制品降溫至2-8°C。隨后向制品中添加Slug人表皮生產因子并混勻，制成人表皮生長因子溶液，并在2-8°C溫度下保存備用。將薰衣草精油0.02ml、維生素E 12mg、姜黃素9.3mg加入到90ml乙醇中混勻后用過濾機過濾得到過濾液I。取醋酸銀Ilml與過濾液I混勻后得到專用溶媒。將聚丙烯腈(PAN)直接溶解于二甲基甲酰胺(DMF)中，配制成濃度為8.5wt%的溶液I。然后，將配制好的人表皮生長因子溶液、專用溶媒和溶液I按一定比例混合，配成總濃度為53%的紡絲溶液，并將紡絲溶液在2-8 0C溫度下保存。
[0022]使用時，將以上制備好的紡絲溶液通過靜電紡絲裝置制備成納米纖維，該納米纖維可用于包敷傷口、美容等等。
【主權項】
1.一種基于人表皮生長因子的靜電紡絲溶液及其制備方法，其特征在于它是按以下重量比的原料和方法制成靜電紡絲溶液: 人表皮生長因子50-100ug、透皮吸收促進劑l-8g、活性穩定劑20-40g、蛋白酶抑制劑5-10g、活性促進劑l-10g、薰衣草精油0.01-0.03ml、維生素E l_20mg、醋酸銀6_12ml、姜黃素5-20mg、乙醇70-100ml、PBS溶液10ml、丙三醇5_8ml、適量聚丙烯腈(PAN)、適量二甲基甲酰胺(DMF); 將上述各組分按以下步驟制備: 精確稱取透皮吸收促進劑l_8g、活性穩定劑20-40g、蛋白酶抑制劑5-10g、活性促進劑1-1Og加入到100ml PBS溶液中溶解，然后向溶液中添加5_8ml丙三醇混勻后分裝，置于真空冷凍機中將制品降溫至2_8°C;隨后向制品中添加50-100ug人表皮生產因子并混勻，制成人表皮生長因子溶液，并在2-8°C溫度下保存備用；將薰衣草精油0.01-0.03ml、維生E 1-20mg、姜黃素5-20mg加入到70-100ml乙醇中混勻后用過濾機過濾得到過濾液I;取醋酸銀6-12ml與過濾液I混勻后得到專用溶媒;將聚丙烯腈(PAN)直接溶解于二甲基甲酰胺(DMF沖，配制成濃度為7wt%-9wt%的溶液I;然后，將配制好的人表皮生長因子溶液、專用溶媒和溶液I按一定比例混合，配成總濃度為40-55%的紡絲溶液，并將紡絲溶液在2-8°C溫度下保存。2.根據權利要求1所述的一種基于人表皮生長因子的靜電紡絲溶液及其制備方法，其特征在于各原料的重量配比的優先范圍是: 人表皮生長因子60-85ug、透皮吸收促進劑3-7.5g、活性穩定劑22-38g、蛋白酶抑制劑5-8g、活性促進劑2-8g、薰衣草精油0.01-0.03ml、維生素E l_20mg、醋酸銀6_12ml、姜黃素5-14mg、乙醇70-100ml、PBS溶液10ml、丙三醇6-7.5ml、適量聚丙烯腈(PAN)、適量二甲基甲酰胺(DM1。3.根據權利要求1所述的一種基于人表皮生長因子的靜電紡絲溶液及其制備方法，其特征在于各原料的重量配比的最佳配方是: 人表皮生長因子76ug、透皮吸收促進劑5.5g、活性穩定劑31g、蛋白酶抑制劑7g、活性促進劑5.5g、薰衣草精油0.01ml、維生素E 8mg、醋酸銀6ml、姜黃素12mg、乙醇80ml、PBS溶液100ml、丙三醇6ml、適量聚丙烯腈(PAN)、適量二甲基甲酰胺(DMF)。4.根據權利要求1或2或3所述的一種基于人表皮生長因子的靜電紡絲溶液及其制備方法，其特征在于所述醋酸銀為弱電解質醋酸銀，且其摩爾濃度為0.04-0.18 mol/L;所述乙醇濃度90%以上；所述活性促進劑是純度大于95%的水溶性膠原蛋白；所述PBS溶液PH值為4.8-7.5;所述PAN的分子量為Mw=150000 g/mol;所述透皮吸收促進劑是丙二醇、巰基乙酸鈣中任一種;所述活性穩定劑是透明質酸、右旋糖酐中任一種;所述蛋白酶抑制劑是硼酸亮氨酸、N-乙酰半胱氨酸中任一種。
【專利摘要】本發明公開了一種基于人表皮生長因子的靜電紡絲溶液及其制備方法，該紡絲溶液是按以下重量比的原料制成：人表皮生長因子50?100ug、透皮吸收促進劑1?8g、活性穩定劑20?40g、蛋白酶抑制劑5?10g、活性促進劑1?10g、薰衣草精油0.01?0.03ml、維生素E 1?20mg、醋酸銀6?12ml、姜黃素5?20mg、乙醇70?100ml、PBS溶液100ml、丙三醇5?8ml、適量聚丙烯腈（PAN）、適量二甲基甲酰胺（DMF）。利用靜電紡絲技術對本發明進行紡絲，得到比表面積大、孔隙率小的藥物和藥物載體納米纖維，從而提高藥物顆粒分解速率、藥物活性和透皮吸收效果。由本發明制成的納米纖維具有藥物利用率高、氣體透過性好、藥物穩定性高以及應用范圍廣等優點，在臨床醫學、美容等領域具有良好的市場前景。
【IPC分類】D01F1/10, A61L15/40, A61L15/24, D01F6/54, A61K47/42, A61L15/42, A61L15/32, A61L15/44, A61L15/20, A61K47/32
【公開號】CN105709260
【申請號】CN201610241394
【發明人】陳兆權, 丘漢標, 洪伶俐
【申請人】陳兆權, 丘漢標