本發(fā)明屬于中草藥繁育栽培領(lǐng)域，具體涉及一種旋覆花組培快繁方法。

背景技術(shù)：

旋覆花，又名：金佛花、金佛草等，拉丁學(xué)名：Inula japonica Thunb.屬于菊科、旋覆花屬多年生草本，主要分布于東北、華北、華東、華中及廣西等地。夏、秋二季花開時采收，除去雜質(zhì)，陰干或曬干。生用或蜜炙用。《神農(nóng)本草經(jīng)》：“主結(jié)氣脅下滿，驚悸。除水，去五臟間寒熱，補中，下氣。”現(xiàn)代研究，旋覆花對免疫性肝損傷有保護作用，其化學(xué)成分天人菊內(nèi)酯有抗癌作用。其根及莖葉或地上部分亦可入藥，治刀傷、疔毒，煎服可平喘鎮(zhèn)咳。其主要具有降氣，消痰，行水，止嘔的藥效。

目前，由于旋覆花的藥用價值較高，旋覆花的種植也逐漸普及，通常采用種子繁殖和分株繁殖方法進行種植。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的是提供一種繁殖效率高、周期短且成本低的旋覆花培育方法。

為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案予以實現(xiàn)。

一種旋覆花組培快繁方法，包括以下的步驟：

⑴外植體消毒：采取當年生的腋芽的莖段為外植體，去塵，放入清水中培養(yǎng)，24h換水一次，培養(yǎng)至抽出嫩芽，取生長健壯的嫩芽，流水沖洗1h，在超凈臺上用75％酒精處理20s，無菌水漂洗3次，再用質(zhì)量比為1％NaClO處理5min，之后無菌水漂洗4次，并用無菌濾紙吸去多余水分，得到無菌苗；

⑵誘導(dǎo)培養(yǎng)：在無菌條件下將獲得的無菌苗接種于誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，在23℃、光照8h、光強2500lx條件下培養(yǎng)，獲得叢生芽；其中所述快誘導(dǎo)培養(yǎng)基的組成為：MS培養(yǎng)基+TDZ0.015mg/L+6-BA0.01mg/L+蔗糖30g/L+瓊脂5g/L，pH值為5.8；

⑶生根培養(yǎng)：步驟⑵培養(yǎng)得到的叢生芽生長至3cm高時，在無菌條件下將獲得的叢生芽分成單株，切去基部直接轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)，在25℃、光照16小時、光照強度為3000lx條件下培養(yǎng)；其中所述生根培養(yǎng)基的組成為MS培養(yǎng)基+IBA0.1mg/L+NAA0.2mg/L+蔗糖20g/L+瓊脂5g/L，pH值為5.8；

⑷煉苗移栽：將獲得的生根組培苗移至煉苗室，室內(nèi)溫度22℃，濕度70％，閉瓶煉苗7天，開瓶蓋煉苗5天，取出小苗，洗凈培養(yǎng)基后，移栽至鋸末:蛭石:河沙：腐葉土＝1:2:3：1的基質(zhì)中，在溫室內(nèi)繼續(xù)煉苗35天，待根系發(fā)育正常，苗株生長健壯后移栽至大田。

本發(fā)明的有益技術(shù)效果：本發(fā)明的方法步驟簡單、繁殖效率高，為旋覆花工廠化育苗或規(guī)模化生產(chǎn)及推廣奠定了良好基礎(chǔ)。

具體實施方式

下面結(jié)合實施例對本發(fā)明進一步詳述，不構(gòu)成對本發(fā)明的限制。

實施例

采取當年生的腋芽的莖段為外植體，去塵，放入清水中培養(yǎng)，24h換水一次，培養(yǎng)至抽出嫩芽，取生長健壯的嫩芽，流水沖洗1h，在超凈臺上用75％酒精處理20s，無菌水漂洗3次，再用質(zhì)量比為1％NaClO處理5min，之后無菌水漂洗4次，并用無菌濾紙吸去多余水分，得到無菌苗。在無菌條件下將獲得的無菌苗接種于誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，在23℃、光照8h、光強2500lx條件下培養(yǎng)，獲得叢生芽；其中所述快誘導(dǎo)培養(yǎng)基的組成為：MS培養(yǎng)基+TDZ0.015mg/L+6-BA0.01mg/L+蔗糖30g/L+瓊脂5g/L，pH值為5.8。培養(yǎng)得到的叢生芽生長至3cm高時，在無菌條件下將獲得的叢生芽分成單株，切去基部直接轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)，在25℃、光照16小時、光照強度為3000lx條件下培養(yǎng)；其中所述生根培養(yǎng)基的組成為MS培養(yǎng)基+IBA0.1mg/L+NAA0.2mg/L+蔗糖20g/L+瓊脂5g/L，pH值為5.8。將獲得的生根組培苗移至煉苗室，室內(nèi)溫度22℃，濕度70％，閉瓶煉苗7天，開瓶蓋煉苗5天，取出小苗，洗凈培養(yǎng)基后，移栽至鋸末:蛭石:河沙：腐葉土＝1:2:3：1的基質(zhì)中，在溫室內(nèi)繼續(xù)煉苗35天，待根系發(fā)育正常，苗株生長健壯后移栽至大田。