1.一種旋覆花組培快繁方法,其特征在于,包括以下的步驟:
⑴外植體消毒:采取當年生的腋芽的莖段為外植體,去塵,放入清水中培養,24h換水一次,培養至抽出嫩芽,取生長健壯的嫩芽,流水沖洗1h,在超凈臺上用75%酒精處理20s,無菌水漂洗3次,再用質量比為1%NaClO處理5min,之后無菌水漂洗4次,并用無菌濾紙吸去多余水分,得到無菌苗;
⑵誘導培養:在無菌條件下將獲得的無菌苗接種于誘導培養基上,在23℃、光照8h、光強2500lx條件下培養,獲得叢生芽;其中所述快誘導培養基的組成為:MS培養基+TDZ0.015mg/L+6-BA0.01mg/L+蔗糖30g/L+瓊脂5g/L,pH值為5.8;
⑶生根培養:步驟⑵培養得到的叢生芽生長至3cm高時,在無菌條件下將獲得的叢生芽分成單株,切去基部直接轉入生根培養基上進行培養,在25℃、光照16小時、光照強度為3000lx條件下培養;其中所述生根培養基的組成為MS培養基+IBA0.1mg/L+NAA0.2mg/L+蔗糖20g/L+瓊脂5g/L,pH值為5.8;
⑷煉苗移栽:將獲得的生根組培苗移至煉苗室,室內溫度22℃,濕度70%,閉瓶煉苗7天,開瓶蓋煉苗5天,取出小苗,洗凈培養基后,移栽至鋸末:蛭石:河沙:腐葉土=1:2:3:1的基質中,在溫室內繼續煉苗35天,待根系發育正常,苗株生長健壯后移栽至大田。