本發明屬于水產品保鮮領域，涉及一種魷魚的復合生物保鮮劑及其保鮮方法。
背景技術：
魷魚，海生軟體動物，頭足綱，肉質細嫩。魷魚含脂量低，主要是磷脂，為高度不飽和脂肪。魷魚中蛋白質含量高，含有豐富的氨基酸，并且必需氨基酸比重非常大。同時還含有大量牛磺酸、鈣、磷、鐵等元素，以及十分豐富的硒、碘、錳、銅等微量元素。魷魚具有調節血脂，降低血壓，抗炎癥、抗氧化和保護神經細胞等作用。
由于魷魚組織結構和理化特點決定其容易腐敗變質，使產品品質受到影響，降低商品價值。因此，如何延長魷魚魚肉的保藏期，提高其衛生安全性，成為整個魷魚產業鏈中非常重要的一個環節，魷魚的保鮮方法一直是水產界專家和水產加工企業探討的熱門課題。
長期以來，人們多采用冷凍法來延長魷魚肉的保藏期，雖然魷魚能保存很長的時間，但在凍結、儲藏、解凍的過程中，由于冰晶形成和肌肉組織中水分的重結晶，蛋白發生冷凍變性，魷魚肉的品質和營養與鮮魷魚肉相比都發生了較大的變化，而且能耗很高；除了冷凍法外，添加化學防腐劑也能夠大大延長鮮魷魚的貨價期，但是過量使用防腐劑，對人體健康危害較大。
技術實現要素：
本發明的目的在于解決魷魚肉化學防腐劑保鮮安全性低的問題，提供了一種具有較好的保水、抑菌、殺菌、抗氧化效果的一種魷魚的復合生物保鮮劑及其保鮮方法，可提高魷魚的食用和商品價值。
本發明的技術解決方案是：
一種魷魚的復合生物保鮮劑，所述復合生物保鮮劑包括魷魚保鮮劑一和魷魚保鮮劑二，魷魚保鮮劑一和魷魚保鮮劑二配合使用對魷魚進行保鮮，所述魷魚保鮮劑一的有效成分為鰈魚下腳料酶解物；所述魷魚保鮮劑二的有效成分為海帶多糖、松樹皮多酚提取物和白藜蘆醇。
進一步的，所述魷魚保鮮劑一中的鰈魚下腳料酶解物質量濃度為7.5％～15％；所述魷魚保鮮劑二中的海帶多糖質量濃度為0.1％～1.0％，松樹皮多酚提取物質量濃度為0.01％～0.2％，白藜蘆醇質量濃度為0.01％～0.2％，余量為水。
一種魷魚的保鮮方法，其具體步驟如下：
(1)鰈魚下腳料酶解物的制備
將鰈魚下腳料高壓蒸煮，干燥，與水混合，所述鰈魚下腳料與水混合質量體積比為1:5(g/mL)，勻漿，得到鰈魚下腳料混合漿料，調溫度40℃、用氫氧化鈉調pH為7.0～8.0，加入胰酶酶解，加入占鰈魚下腳料總質量0.5％～1.0％的胰酶，水解時間為4h，滅酶，離心，取上清液，濃縮、冷凍干燥，得到鰈魚下腳料酶解物；
(2)海帶多糖的制備
原料為海帶粉末，利用超聲波輔助提取海帶多糖；
(3)松樹皮多酚提取物制備
取紅松樹皮，用萬能搗碎機粉碎，過30目篩，按紅松皮與乙醇溶液的料液比1:30(g/mL)加入體積濃度60％乙醇溶液，在50℃超聲波輔助提取，超聲功率200W條件下提取20min，過濾，55℃采用旋轉蒸發儀蒸發，得到濃縮液，用AB-8型大孔樹脂富集松樹皮多酚，用乙醇進行梯度洗脫，濃縮，真空凍干，獲得紅松樹皮多酚凍干粉末，置于4℃備用；
(4)制備魷魚保鮮劑一
將鰈魚下腳料酶解物加水配制成質量濃度為7.5％～15％的溶液，作為魷魚保鮮劑一；
(5)制備魷魚保鮮劑二
將白藜蘆醇、海帶多糖和松樹皮多酚提取物加入去離子水中，攪拌均勻，配制成海帶多糖質量百分比濃度為0.1％～1.0％，松樹皮多酚提取物質量百分比濃度為0.01％～0.2％，白藜蘆醇質量百分比濃度為0.01％～0.2％，作為魷魚保鮮劑二；
(6)魷魚保鮮處理
將新鮮魷魚洗凈，切囊，然后切割成片狀，將魷魚片在0℃魷魚保鮮劑一和魷魚保鮮劑二中分別均勻浸泡30min～60min，將魷魚撈出瀝干1min～2min，并置于4℃條件下自然風干，將風干后的魷魚肉片放入保鮮袋中，封口，放置在0℃的環境中保藏。
進一步的，高壓蒸煮時溫度為121℃，時間為15min。
進一步的，高壓蒸煮后干燥溫度為80℃，干燥時間為2h。
進一步的，所述鰈魚下腳料為鰈魚的魚頭、魚骨和魚皮。
進一步的，用海帶粉末提取海帶多糖時，先將海帶用去離子水清洗干凈，在105℃下烘干30min，將經烘干的海帶磨成海帶粉末；按照海帶粉末與去離子水的料液比為1:30(g/mL)在超聲波輔助下提取海帶多糖，過濾，55℃采用旋轉蒸發儀蒸發，將收集的上清液體積濃縮到原來體積的1/5，然后將濃縮液與無水乙醇按照體積比1:4～1:6混合均勻，4℃過夜；在6000轉/min轉數下離心15min，收集沉淀物，在55℃烘干至恒重，得到海帶多糖。
進一步的，步驟(1)離心時，離心力為5000g，離心時間為15min。
進一步的，步驟(2)超聲波提取時，超聲波發出時間為2s，超聲波的間隙時間為2s，提取全程時間為50min，超聲功率為600W，提取溫度60℃。
本發明的有益效果：
(1)鰈魚下腳料易得，價格低廉，蛋白質含量高，將其水解成短鏈的小分子多肽，可以釋放出更多的氨基，清除魷魚中的甲醛；胰酶為胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、彈性蛋白酶、胰淀粉酶和胰脂肪酶的混合物，多種酶作用于鰈魚下腳料的不同反應位點，釋放更多的氨基捕獲甲醛。同時鰈魚下腳料酶解液還有一定保水作用。
(2)白藜蘆醇能夠抑制TMAOase活性，降低魷魚中甲醛形成，保持魷魚蛋白質的品質；海帶和魷魚都生長在化學組分復雜的海水中，具有相同的生理環境，以海帶多糖、松樹皮多酚提取物與白藜蘆醇復合使用，具有更好的抑菌和抗氧化效果，能延長魷魚的保藏時間。
(3)此復合生物保鮮劑，既抑制了魷魚中甲醛的產生，又消除了魷魚中產生的甲醛，此保鮮劑還具有抑菌和抗氧化作用，同時復合生物保鮮劑對魷魚品質的保持具有增效作用，且均對魷魚制品的色澤沒有顯著影響。
(4)魷魚保鮮劑制備方法簡單，工序步驟少，使用方便，只需用魷魚保鮮劑在低溫下浸泡魷魚肉片即可達到保鮮目的。
具體實施方式
實施例1
(1)鰈魚下腳料酶解物的制備
將鰈魚下腳料(魚頭、骨、皮)高壓蒸煮(121℃、15min)，干燥(80℃、2h)，與水混合(下腳料與水混合質量比1:5(g/mL))，勻漿，調溫度40℃，用氫氧化鈉調pH為7.0，加入占鰈魚下腳料總質量0.5％的胰酶，水解時間為4h，滅酶，離心(5000×g、15min)，取上清液，濃縮、冷凍干燥，得到鰈魚下腳料蛋白酶解產物；
(2)海帶多糖的制備
將海帶用去離子水清洗干凈，在105℃下烘干30min，將經烘干的海帶磨成海帶粉末，超聲波輔助提取海帶多糖，超聲波發出時間為2.0s，超聲波的間隙時間為2s，提取全程時間為50min，超聲功率為600W，提取溫度60℃，料液比為1:30(g/mL)，過濾，在55℃采用旋轉蒸發儀蒸發，將收集的上清液體積濃縮到原來體積的1/5，將濃縮液與無水乙醇按照體積比1:5混合均勻，4℃過夜；在6000轉/min轉數下離心15min，收集沉淀物，55℃烘干至恒重，得到海帶多糖；
(3)松樹皮多酚提取物制備
取50g紅松樹皮，用萬能搗碎機粉碎，過30目篩置于2000mL燒杯中，按料液比1:30(g/mL)加入體積濃度60％乙醇，超聲波輔助提取，在50℃，超聲功率200W條件下提取20min，過濾，55℃采用旋轉蒸發儀蒸發，得到濃縮液，用AB-8型大孔樹脂富集松樹皮多酚，用乙醇進行梯度洗脫，濃縮，真空冷凍干燥機凍干，獲得紅松樹皮多酚凍干粉末，置于4℃冰箱中備用；
(4)制備保鮮劑一
取鰈魚下腳料酶解物與水混合均勻，配制成質量濃度為7.5％的溶液，作為保鮮劑一；
(5)制備保鮮劑二
將白藜蘆醇、海帶多糖和松樹皮多酚提取物加入去離子水中，攪拌均勻，配制成海帶多糖質量百分比濃度為0.1％，松樹皮多酚提取物百分比濃度為0.01％，白藜蘆醇百分比濃度為0.01％；(6)魷魚保鮮處理
將新鮮魷魚洗凈，切囊，然后切割成片狀，將魷魚在溫度為0℃魷魚保鮮劑一中和保鮮劑二中分別均勻浸泡30min，將魷魚撈出瀝干1min，并置于4℃條件下自然風干，將風干后的魷魚肉片放入保鮮袋中，封口，放置在0℃的環境中保藏。
實施例2
(1)鰈魚下腳料酶解物的制備
將鰈魚下腳料(魚頭、骨、皮)高壓蒸煮(121℃、15min)，干燥(80℃、2h)，與水混合(下腳料與水混合質量比1:5(g/mL))，勻漿，調溫度40℃，用氫氧化鈉調pH為7.5，加入占鰈魚下腳料總質量0.7％的胰酶，水解時間為4h，滅酶，離心(5000×g、15min)，取上清液，濃縮、冷凍干燥，得到鰈魚下腳料蛋白酶解產物；
(2)海帶多糖的制備
將海帶用去離子水清洗干凈，在105℃下烘干30min，將經烘干的海帶磨成海帶粉末，超聲波輔助提取海帶多糖，超聲波發出時間為2.0s，超聲波的間隙時間為2s，提取全程時間為50min，超聲功率為600W，提取溫度60℃，料液比為1:30(g/mL)，過濾，55℃采用旋轉蒸發儀蒸發，將收集的上清液體積濃縮到原來體積的1/5，將濃縮液與無水乙醇按照體積比1:4混合均勻，4℃過夜；在6000轉/min轉數下離心15min，收集沉淀物，在55℃烘干至恒重，得到海帶多糖；
(3)松樹皮多酚提取物制備
取50g紅松樹皮，用萬能搗碎機粉碎，過30目篩，置于2000mL燒杯中，按料液比1:30(g/mL)加入體積濃度60％乙醇，超聲波輔助提取，在50℃，超聲功率200W條件下提取20min，過濾，55℃采用旋轉蒸發儀蒸發，得到濃縮液，用AB-8型大孔樹脂富集松樹皮多酚，用乙醇進行梯度洗脫，濃縮，真空冷凍干燥機真空凍干，獲得紅松樹皮多酚凍干粉末，置于4℃冰箱中備用；
(4)制備保鮮劑一
取鰈魚下腳料酶解物與水混合均勻，配制成質量濃度為10.0％的溶液，作為保鮮劑一；
(5)制備保鮮劑二
將白藜蘆醇、海帶多糖和松樹皮多酚提取物加入去離子水中，攪拌均勻，配制成海帶多糖質量百分比濃度為0.5％，松樹皮多酚提取物質量百分比濃度為0.1％，白藜蘆醇質量百分比濃度為0.1％；
(6)魷魚保鮮處理
將新鮮魷魚洗凈，切囊，然后切割成片狀，將魷魚在溫度為0℃魷魚保鮮劑一和保鮮劑二中均勻浸泡45min，將魷魚撈出瀝干1.5min，并置于4℃條件下自然風干，將風干后的魷魚肉片放入保鮮袋中，封口，放置在0℃的環境中保藏。
實施例3
(1)鰈魚下腳料酶解物的制備
將鰈魚下腳料(魚頭、骨、皮)高壓蒸煮(121℃、15min)，干燥(80℃、2h)，與水混合(下腳料與水混合質量比1:5(g/mL))，勻漿，調溫度40℃，用氫氧化鈉調pH為8.0，加入占鰈魚下腳料總質量1.0％的胰酶，水解時間為4h，滅酶，離心(5000×g、15min)，取上清液，濃縮、冷凍干燥，得到鰈魚下腳料蛋白酶解產物；
(2)海帶多糖的制備
將海帶用去離子水清洗干凈，在105℃下烘干30min，將經烘干的海帶磨成海帶粉末，超聲波輔助提取海帶多糖，超聲波發出時間為2.0s，超聲波的間隙時間為2s，提取全程時間為50min，超聲功率為600W，提取溫度60℃，料液比為1:30(g/mL)，過濾，在55℃采用旋轉蒸發將收集的上清液體積濃縮到原來體積的1/5，將濃縮液與無水乙醇按照體積比1:6混合均勻，4℃過夜；6000轉/min離心15min，收集沉淀物，在55℃烘干至恒重，得到海帶多糖；(3)松樹皮多酚提取物制備
取50g紅松樹皮，用萬能搗碎機粉碎，過30目篩置于2000mL燒杯中，按料液比1:30(g/mL)加入體積濃度60％乙醇，超聲波輔助提取，在50℃，超聲功率200W條件下提取20min，過濾，55℃采用旋轉蒸發儀蒸發，得到濃縮液，用AB-8型大孔樹脂富集松樹皮多酚，用乙醇進行梯度洗脫，濃縮，真空冷凍干燥機凍干，獲得紅松樹皮多酚凍干粉末，置于4℃冰箱中備用；
(4)制備保鮮劑一
取鰈魚下腳料酶解物與水混合均勻，配制成質量濃度為15.0％的溶液，作為保鮮劑一；
(5)制備保鮮劑二
將白藜蘆醇、海帶多糖和松樹皮多酚提取物加入去離子水中，攪拌均勻，配制成海帶多糖質量百分比濃度為1.0％，松樹皮多酚提取物質量百分比濃度為0.2％，白藜蘆醇質量百分比濃度為0.2％；
(6)魷魚保鮮處理
將新鮮魷魚洗凈，切囊，然后切割成片狀，將魷魚在溫度為0℃魷魚保鮮劑一和保鮮劑二中均勻浸泡60min，將魷魚撈出瀝干2min，并置于4℃條件下自然風干，將風干后的魷魚肉片放入保鮮袋中，封口，放置在0℃的環境中保藏。
對比例1
(1)鰈魚下腳料酶解物的制備
將鰈魚下腳料(魚頭、骨、皮)高壓蒸煮(121℃、15min)，干燥(80℃、2h)，與水混合(鰈魚下腳料與水混合質量比1:5(g/mL))，勻漿，調溫度40℃，用氫氧化鈉調pH為7.5，加入占鰈魚下腳料總質量0.7％的胰酶，水解時間為4h，滅酶，離心(5000×g、15min)，取上清液，濃縮、冷凍干燥，得到鰈魚下腳料蛋白酶解產物；
(2)制備保鮮劑
取鰈魚下腳料酶解物與水混合均勻，配制成質量濃度為10.0％的溶液，作為保鮮劑一；
(3)魷魚保鮮處理
將新鮮魷魚洗凈，切囊，然后切割成片狀，將魷魚片在溫度為0℃魷魚保鮮劑中均勻浸泡45min，將魷魚撈出瀝干1.5min，并置于4℃條件下自然風干，將風干后的魷魚肉片放入保鮮袋中，封口，放置在0℃的環境中保藏。
對比例2
(1)鰈魚下腳料酶解物的制備
將鰈魚下腳料(魚頭、骨、皮)高壓蒸煮(121℃、15min)，干燥(80℃、2h)，與水混合(下腳料與水混合質量比1:5(g/mL))，勻漿，調溫度40℃，用氫氧化鈉調pH為7.5，加入占鰈魚下腳料總質量0.7％的胰酶，滅酶，離心(5000×g、15min)，取上清液，濃縮、冷凍干燥，得到鰈魚下腳料蛋白酶解產物；
(2)制備保鮮劑一
取鰈魚下腳料酶解物與水混合均勻，配制成質量濃度為10.0％的溶液，作為保鮮劑一；
(3)制備保鮮劑二
將白藜蘆醇加入去離子水中，攪拌均勻，配制成白藜蘆醇百分比濃度為0.1％；
(4)魷魚保鮮處理
將新鮮魷魚洗凈，切囊，然后切割成片狀，將魷魚在溫度為0℃魷魚保鮮劑一和保鮮劑二中分別均勻浸泡45min，將魷魚撈出瀝干1.5min，并置于4℃條件下自然風干，將風干后的魷魚肉片放入保鮮袋中，封口，放置在0℃的環境中保藏。
對比例3
(1)鰈魚下腳料酶解物的制備
將鰈魚下腳料(魚頭、骨、皮)高壓蒸煮(121℃、15min)，干燥(80℃、2h)，與水混合(下腳料與水混合質量比1:5(g/mL))，勻漿，調溫度40℃，用氫氧化鈉調pH為7.5，加入占鰈魚下腳料總質量0.7％的胰酶，水解時間為4h，滅酶，離心(5000×g、15min)，取上清液，濃縮、冷凍干燥，得到鰈魚下腳料蛋白酶解產物；
(2)松樹皮多酚提取物制備
取50g紅松樹皮，用萬能搗碎機粉碎，過30目篩置于2000mL燒杯中，按料液比1:30(g/mL)加入體積濃度60％乙醇，超聲波輔助提取，在50℃，超聲功率200W條件下提取20min，過濾，55℃采用旋轉蒸發儀蒸發，得到濃縮液，用AB-8型大孔樹脂富集松樹皮多酚，用乙醇進行梯度洗脫，濃縮，真空冷凍干燥機凍干，獲得紅松樹皮多酚凍干粉末，置于4℃冰箱中備用；
(3)制備保鮮劑一
取鰈魚下腳料酶解物與水混合均勻，配制成質量濃度為10.0％的溶液，作為保鮮劑一；
(4)制備保鮮劑二
將白藜蘆醇和松樹皮多酚提取物加入去離子水中，攪拌均勻，配制成松樹皮多酚提取物百分比濃度為0.1％，白藜蘆醇百分比濃度為0.1％；
(5)魷魚保鮮處理
將新鮮魷魚洗凈，切囊，然后切割成片狀，將魷魚在溫度為0℃魷魚保鮮劑一和保鮮劑二中分別均勻浸泡45min，將魷魚撈出瀝干1.5min，并置于4℃條件下自然風干，將風干后的魷魚肉片放入保鮮袋中，封口，放置在0℃的環境中保藏。
對比例4
(1)鰈魚下腳料酶解物的制備
將鰈魚下腳料(魚頭、骨、皮)高壓蒸煮(121℃、15min)，干燥(80℃、2h)，與水混合(下腳料與水混合質量比1:5(g/mL))，勻漿，調溫度40℃，用氫氧化鈉調pH為7.5，加入占鰈魚下腳料總質量0.7％的胰酶，水解時間為4h，滅酶，離心(5000×g、15min)，取上清液，濃縮、冷凍干燥，得到鰈魚下腳料蛋白酶解產物；
(2)海帶多糖的制備
將海帶用去離子水清洗干凈，在105℃下烘干30min，將經烘干的海帶磨成海帶粉末，超聲波輔助提取海帶多糖，超聲波發出時間為2.0s，超聲波的間隙時間為2s，提取全程時間為50min，超聲功率為600W，提取溫度60℃，料液比為1:30(g/mL)，過濾，55℃采用旋轉蒸發儀蒸發，將收集的上清液體積濃縮到原來體積的1/5，將濃縮液與無水乙醇按照體積比1:4混合均勻，4℃過夜；6000轉/min離心15min，收集沉淀物，55℃烘干至恒重，得到海帶多糖；
(3)制備保鮮劑一
取鰈魚下腳料酶解物與水混合均勻，配制成質量濃度為10.0％的溶液，作為保鮮劑一；
(4)制備保鮮劑二
將白藜蘆醇、海帶多糖提取物加入去離子水中，攪拌均勻，配制成海帶多糖質量百分比濃度為0.5％，白藜蘆醇百分比濃度為0.1％；
(5)魷魚保鮮處理
將新鮮魷魚洗凈，切囊，然后切割成片狀，將魷魚在溫度為0℃魷魚保鮮劑一中和保鮮劑二中分別均勻浸泡45min，將魷魚撈出瀝干1.5min，并置于4℃條件下自然風干，將風干后的魷魚肉片放入保鮮袋中，封口，放置在0℃的環境中保藏。
保鮮效果
對照組采用無菌水代替保鮮劑，將處理好的魷魚放入PE保鮮袋內，貯藏于0℃冰箱中，通過TVB-N、菌落總數和甲醛含量的測定來確定保鮮效果，如表1、表2和表3所示。
表1魷魚貯藏期間揮發性鹽基氮(TVB-N)含量的變化單位(mg/100g)
表2魷魚貯藏期間菌落總數的變化單位(lgCFU/g)
表3魷魚貯藏期間甲醛含量的變化單位(mg/kg)
利用本發明的保鮮劑處理的魷魚，在TVB-N、菌落總數和甲醛含量均低于對照組，延長魷魚貨架期，海帶多糖、紅松樹皮多酚提取物和白藜蘆醇混合使用對魷魚的保鮮效果好于單獨使用效果，他們存在協同增效作用，其中實施例2和實施例3對魷魚保鮮效果最好。對比例1和對比例2的甲醛含量顯著低于對照，說明鰈魚下腳料酶解物和白藜蘆醇具有清除魷魚中甲醛作用，對比例3、對比例4以及實施例1-3甲醛含量顯著低于對比例1和對比例2，說明海帶多糖、紅松樹皮多酚提取物與鰈魚下腳料酶解物、白藜蘆醇存在交互作用，清除甲醛效果好于鰈魚下腳料酶解物和白藜蘆醇單獨使用的效果。
以上僅為本發明的具體實施例而已，并不用于限制本發明，對于本領域的技術人員來說，本發明可以有各種更改和變化。凡在本發明的精神和原則之內，所作的任何修改、等同替換、改進等，均應包含在本發明的保護范圍之內。