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儲存穩(wěn)定的微生物組合物的制作方法

文檔序號:41775203發(fā)布日期:2025-04-29 18:49閱讀:來源:國知局

技術特征:

1.一種生產(chǎn)穩(wěn)定的水凝膠-細胞組合物的方法,包括以下步驟:

2.一種生產(chǎn)穩(wěn)定的水凝膠組合物的方法,包括以下步驟:

3.根據(jù)權利要求2所述的方法,其中所述反應混合物還包括細胞。

4.根據(jù)權利要求1至3中任一項所述的方法,其中所述至少一種可聚合底物是糖磷酸,優(yōu)選己糖磷酸,更優(yōu)選葡萄糖磷酸,甚至更優(yōu)選α-d-葡萄糖-1-磷酸。

5.根據(jù)權利要求4所述的方法,其中所述α-d-葡萄糖-1-磷酸通過將蔗糖與蔗糖磷酸化酶孵育而形成。

6.根據(jù)權利要求1至5中任一項所述的方法,其中所述反應混合物包括至少一種另外的單糖、寡糖和/或多糖。

7.根據(jù)權利要求6所述的方法,其中所述至少一種另外的單糖是葡萄糖和/或所述至少一種另外的寡糖是二糖,優(yōu)選纖維二糖。

8.根據(jù)權利要求1至7中任一項所述的方法,其中所述反應混合物包括10mm至500mm、優(yōu)選15mm至400mm、更優(yōu)選20mm至300mm的所述至少一種可聚合底物和/或所述至少一種另外的寡糖或多糖。

9.根據(jù)權利要求4至8中任一項所述的方法,其中所述反應混合物包括α-d-葡萄糖-1-磷酸和纖維二糖作為可聚合底物,優(yōu)選摩爾比為20:1至1:1,優(yōu)選地10:1至2:1,更優(yōu)選地8:1至5:1。

10.根據(jù)權利要求1至9中任一項所述的方法,其中所述至少一種酶是磷酸化酶,更優(yōu)選寡糖磷酸化酶或多糖磷酸化酶。

11.根據(jù)權利要求1至10中任一項所述的方法,其中所述至少一種酶是纖維糊精磷酸化酶。

12.根據(jù)權利要求1至11中任一項所述的方法,其中所述反應混合物包括0.5u/ml至50u/ml、優(yōu)選0.5u/ml至30u/ml、更優(yōu)選1u/ml至20u/ml、更優(yōu)選1u/ml至10u/ml的所述至少一種酶。

13.根據(jù)權利要求1至12中任一項所述的方法,其中所述反應混合物包括至少一種另外的碳水化合物聚合物,優(yōu)選含量為所述反應混合物的0.1wt%至1wt%,其中所述至少一種碳水化合物聚合物優(yōu)選為黃原膠。

14.根據(jù)權利要求13所述的方法,其中所述至少一種碳水化合物聚合物包括羧基、乙酰基和/或硫酸酯基團。

15.根據(jù)權利要求1至14中任一項所述的方法,其中所述反應混合物通過在緩沖溶液中、優(yōu)選地在ph值優(yōu)選為6.5至7.5的磷酸鹽緩沖液(pbs)中混合其組分而得到。

16.根據(jù)權利要求1至15中任一項所述的方法,其中所述細胞為細菌細胞、真菌細胞、動物細胞或人細胞。

17.根據(jù)權利要求16所述的方法,其中所述細菌細胞屬于乳桿菌目,優(yōu)選屬于乳桿菌科和/或鏈球菌科,更優(yōu)選屬于乳球菌屬和/或乳桿菌屬,其中所述細菌細胞優(yōu)選地選自由乳酸乳球菌,優(yōu)選乳酸乳球菌10123(dsm?34156),以及鼠李糖乳桿菌組成的組中。

18.根據(jù)權利要求1至17中任一項所述的方法,其中所述反應混合物包括濃度為0.5-50mg/ml、優(yōu)選0.5-40mg/ml、更優(yōu)選0.5-30mg/ml、更優(yōu)選1-20mg/ml、更優(yōu)選1-10mg/ml的細胞。

19.根據(jù)權利要求1至18中任一項所述的方法,其中,將凍干細胞加入到所述反應混合物中。

20.根據(jù)權利要求1至19中任一項所述的方法,其中步驟a)的所述混合物在步驟b)期間以50rpm至1000rpm、優(yōu)選100rpm至800rpm、更優(yōu)選200rpm至600rpm、更優(yōu)選200rpm至500rpm搖動。

21.一種水凝膠-細胞組合物,其能夠通過根據(jù)權利要求1至20中任一項所述的方法獲得。

22.乳酸乳球菌菌株10123,其于2022年2月4日以保藏編號dsm?34156保藏于dsmz。

23.一種用于生產(chǎn)穩(wěn)定的水凝膠-細胞組合物的試劑盒,其包括至少一種可聚合底物和至少一種能夠聚合所述至少一種底物的酶,其中所述至少一種可聚合底物為優(yōu)選地如權利要求4至9中任一項所定義的底物,其中所述至少一種酶為優(yōu)選地如權利要求10至12中任一項所定義的酶。


技術總結
本發(fā)明涉及一種生產(chǎn)穩(wěn)定的水凝膠?細胞組合物的方法,包括以下步驟:a)提供反應混合物,所述反應混合物包含至少一種可聚合底物和至少一種能夠聚合所述至少一種底物的酶以及細胞,和b)孵育步驟a)的混合物以形成穩(wěn)定的水凝膠?細胞組合物。

技術研發(fā)人員:K·瓦爾納,B·尼德茨基,鐘超
受保護的技術使用者:蘭生物有限公司
技術研發(fā)日:
技術公布日:2025/4/28
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