本發(fā)明涉及一種杉木種植
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體涉及一種杉木莖尖組織培養(yǎng)繁殖方法。
背景技術(shù)：
：杉木是我國特有的速生商品材樹種，生長快，材質(zhì)好，在大豐杉木基地大量人工培育。木材紋理通直，結(jié)構(gòu)均勻，不翹不裂，材質(zhì)輕韌，強(qiáng)度適中，質(zhì)量系數(shù)高。具香味,材中含有“杉腦”，能抗蟲耐腐，加工容易。廣泛用于建筑、家具、器具、造船等各方面。近年雖然小徑材市場低迷，但中、大徑材銷路仍好，今后要培養(yǎng)中大徑材杉木為主，目前，較為成熟的杉木快速繁殖方式較多，主要包括有性繁殖和無性繁殖兩種，在林木生產(chǎn)中，有性繁殖是指通過種實培育生苗，無性繁殖則包括通過插條、插根、壓條、埋條、根蘗、插葉、嫁接和組織培養(yǎng)方式培育營養(yǎng)繁殖苗，在杉木組織培養(yǎng)過程中，目前技術(shù)并不十分成熟，因此培養(yǎng)成功率較低。技術(shù)實現(xiàn)要素：本發(fā)明提供一種杉木莖尖組織培養(yǎng)繁殖方法。本發(fā)明技術(shù)方案如下：一種杉木莖尖組織培養(yǎng)繁殖方法，包括以下步驟：（1）選擇杉木莖尖作為外植體，將莖尖浸漬于質(zhì)量濃度為2-2.8%的碘化銀水溶液中，在功率為130-140W的超聲波下處理10-12秒；（2）將滅菌后的莖尖置于消毒后的濕度為85-90%的沙床上誘導(dǎo)形成愈傷組織，向沙床中均勻噴灑3-4%質(zhì)量濃度的硫酸小檗堿溶液調(diào)節(jié)沙床濕度；（3）將形成愈傷組織的莖尖置于溫度為25-28℃、并在光照強(qiáng)度為800-1000Lx的紅光下誘導(dǎo)生芽，誘導(dǎo)生芽期間，每隔2小時，在莖尖表面霧噴一次3-4%質(zhì)量濃度的堿性成纖維細(xì)胞生長因子溶液；（4）將已生成從芽的莖尖基部浸漬于質(zhì)量濃度為1%的二水合磷酸氫二鈉溶液與質(zhì)量濃度為2%的氯化鋅溶液按3:1混合得到的生根誘導(dǎo)液中誘導(dǎo)生根，誘導(dǎo)生根期間將小分子團(tuán)水與氧氣混合緩慢通入生根誘導(dǎo)液中，保持生根誘導(dǎo)液以5-7cm/s的速率流動。本發(fā)明有益效果在于，本發(fā)明以杉木莖尖作為外植體誘導(dǎo)培養(yǎng)杉木小苗，誘導(dǎo)成本低，誘導(dǎo)方法簡單，可大量成批誘導(dǎo)，能使莖尖快速形成帶根帶芽小苗；將外植體浸漬于碘化銀水溶液中并超聲波下處理，可快速充分滅除外莖尖表面及孔隙內(nèi)的一切微生物，降低培養(yǎng)過程中細(xì)菌和真菌的污染率；3-4%質(zhì)量濃度的硫酸小檗堿溶液能提高莖尖細(xì)胞分化活躍度，與沙床混合可促使莖尖愈傷組織快速形成，愈傷組織誘導(dǎo)率在99.98%以上，誘導(dǎo)形成的愈傷組織呈淡黃色且生長旺盛；3-4%質(zhì)量濃度的堿性成纖維細(xì)胞生長因子溶液能夠促進(jìn)莖尖合成生長素和細(xì)胞分裂素，促進(jìn)莖尖腋芽生長，分階段霧噴于莖尖表面可促使莖尖生成數(shù)量較多的不定芽，從芽誘導(dǎo)發(fā)芽率可達(dá)到99.5%以上，芽誘導(dǎo)期間結(jié)合紅光光照處理可有效縮短不定芽誘導(dǎo)所需時間；由質(zhì)量濃度為1%的二水合磷酸氫二鈉溶液與質(zhì)量濃度為2%的氯化鋅溶液按3:1混合得到的生根誘導(dǎo)液作為營養(yǎng)源誘導(dǎo)不定根生成效果較好，不定根誘導(dǎo)率在99.2%以上，誘導(dǎo)期間，將小分子團(tuán)水與氧氣混合緩慢通入氨基葡萄糖鹽酸鹽水溶液中可加快不定根生成，并提高不定根生成數(shù)量，最終誘導(dǎo)不定根數(shù)量多，生長快，粗壯。具體實施方式以下結(jié)合實例，對本發(fā)明作進(jìn)一步的說明。但本發(fā)明的保護(hù)范圍不應(yīng)局限于此。實施例1、一種杉木莖尖組織培養(yǎng)繁殖方法，包括以下步驟：（1）選擇杉木莖尖作為外植體，將莖尖浸漬于質(zhì)量濃度為2%的碘化銀水溶液中，在功率為130W的超聲波下處理10秒；（2）將滅菌后的莖尖置于消毒后的濕度為85%的沙床上誘導(dǎo)形成愈傷組織，向沙床中均勻噴灑3%質(zhì)量濃度的硫酸小檗堿溶液調(diào)節(jié)沙床濕度；（3）將形成愈傷組織的莖尖置于溫度為25℃、并在光照強(qiáng)度為800Lx的紅光下誘導(dǎo)生芽，誘導(dǎo)生芽期間，每隔2小時，在莖尖表面霧噴一次3%質(zhì)量濃度的堿性成纖維細(xì)胞生長因子溶液；（4）將已生成從芽的莖尖基部浸漬于質(zhì)量濃度為1%的二水合磷酸氫二鈉溶液與質(zhì)量濃度為2%的氯化鋅溶液按3:1混合得到的生根誘導(dǎo)液中誘導(dǎo)生根，誘導(dǎo)生根期間將小分子團(tuán)水與氧氣混合緩慢通入生根誘導(dǎo)液中，保持生根誘導(dǎo)液以5cm/s的速率流動。實施例2、一種杉木莖尖組織培養(yǎng)繁殖方法，包括以下步驟：（1）選擇杉木莖尖作為外植體，將莖尖浸漬于質(zhì)量濃度為2.8%的碘化銀水溶液中，在功率為140W的超聲波下處理12秒；（2）將滅菌后的莖尖置于消毒后的濕度為90%的沙床上誘導(dǎo)形成愈傷組織，向沙床中均勻噴灑4%質(zhì)量濃度的硫酸小檗堿溶液調(diào)節(jié)沙床濕度；（3）將形成愈傷組織的莖尖置于溫度為28℃、并在光照強(qiáng)度為1000Lx的紅光下誘導(dǎo)生芽，誘導(dǎo)生芽期間，每隔2小時，在莖尖表面霧噴一次4%質(zhì)量濃度的堿性成纖維細(xì)胞生長因子溶液；（4）將已生成從芽的莖尖基部浸漬于質(zhì)量濃度為1%的二水合磷酸氫二鈉溶液與質(zhì)量濃度為2%的氯化鋅溶液按3:1混合得到的生根誘導(dǎo)液中誘導(dǎo)生根，誘導(dǎo)生根期間將小分子團(tuán)水與氧氣混合緩慢通入生根誘導(dǎo)液中，保持生根誘導(dǎo)液以7cm/s的速率流動。以下結(jié)合具體誘導(dǎo)試驗對本發(fā)明進(jìn)一步說明，誘導(dǎo)試驗分為實驗組、對照組1、對照組2、對照組3四組，其中實驗組按照實施例1方式進(jìn)行繁殖；對照組1在實施例1的基礎(chǔ)上將4%質(zhì)量濃度的硫酸小檗堿溶液替換成水；對照組2在實施例1的基礎(chǔ)上將4%質(zhì)量濃度的堿性成纖維細(xì)胞生長因子溶液替換成水；對照組3在實施例1的基礎(chǔ)上取消芽組織誘導(dǎo)期間將小分子團(tuán)水與氧氣混合緩慢通入氨基葡萄糖鹽酸鹽水溶液中，保持水池內(nèi)的水慢慢流動；四組所用外植體均取自同一種植場內(nèi)4年生杉木根莖尖，莖尖外觀與健康狀況差異極微，每組30個，各組誘導(dǎo)環(huán)境相同；其中，試驗期間，除實驗組按實施例1規(guī)定時間進(jìn)行誘導(dǎo)外，對照組3組根據(jù)外植體實際生長情況進(jìn)行誘導(dǎo)；試驗期間，對各組誘導(dǎo)期間污染率、愈傷組織誘導(dǎo)率、愈傷組織誘導(dǎo)所需時間、從芽誘導(dǎo)發(fā)芽率，從芽誘導(dǎo)所需時間、不定根誘導(dǎo)率，不定根誘導(dǎo)所需時間進(jìn)行統(tǒng)計，結(jié)果見下表1：組別污染率（%）愈傷組織誘導(dǎo)率（%）從芽誘導(dǎo)發(fā)芽率（%）不定根誘導(dǎo)率（%）不定根誘導(dǎo)所需時間實驗組099.99699.8399.3523小時對照組1028.4328.3828.1238對照組2099.98322.1521.9637小時對照組3099.98599.899.3355小時由表1可知，外植體經(jīng)實施例1方式滅菌后再進(jìn)行誘導(dǎo)，可顯著降低誘導(dǎo)污染率，用硫酸小檗堿溶液調(diào)節(jié)沙床濕度可顯著提高愈傷組織誘導(dǎo)率，在莖尖表面霧噴堿性成纖維細(xì)胞生長因子溶液可顯著提高從芽誘導(dǎo)發(fā)芽率，二水合磷酸氫二鈉溶液與氯化鋅溶液誘導(dǎo)不定根生成率較高，根組織誘導(dǎo)期間，將小分子團(tuán)水與氧氣混合緩慢通入氨基葡萄糖鹽酸鹽水溶液中，保持水池內(nèi)的水慢慢流動，能分別縮短愈傷組織誘導(dǎo)所需時間、從芽誘導(dǎo)所需時間。當(dāng)前第1頁1 2 3